RELATÓRIO A Ambiental 1 - PD

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
ENSINO DIGITAL 
	
RELATÓRIO 02
	
	
	DATA:
30/09/2023
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Análise Ambiental 
DADOS DO(A) ALUNO(A):
	NOME: 
	MATRÍCULA: 
	CURSO: BIOMEDICINA
	POLO: 
	PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): 
	ORIENTAÇÕES GERAIS: 
· O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e
· concisa;
· O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema;
· Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado);
· Tamanho: 12;
Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm;
· Espaçamento entre linhas: simples;
· Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). 
		TEMA DE AULA: TUBULOS MULTIPLOS- TESTE PRESUNTIVO E CONFIRMÁTORIO 
RELATÓRIO:
1. TESTE PRESUNTIVO
A. Quais meios de cultura são utilizados para a realização do método presuntivo? Qual classe de bactérias essas técnicas investigam?
O teste presuntivo é utilizado para detectar a presença de coliformes na água, por meio da inoculação da amostra no meio de cultura LST (Caldo Lauril Sulfato Triptose) ou no caldo lactosado. A positividade do método é identificada pela bolha de gás que se forma no interior do tubo de Durham contido em cada tubo semeado. Havendo tubos positivos o teste segue para a próxima etapa, que é o teste confirmatório, e indicará mais especificamente a presença de coliformes totais, nesse método os meios de cultura utilizados são o VBBL (Verde Bile Brilhante Lactose) que indicará a concentração de Coliforme totais e o Caldo EC (Escherichia Coli) que indicará a concentração de Coliformes fecais.
B. Descreva quais as proporções e diluições são obtidas após adicionar a amostra de água a ser analisada. 
Para realização do teste utiliza-se 9 tubos, onde cada um irá conter um tubo de Durham em seu interior, organizados em 3 fileiras; os 3 tubos da primeira fileira possuem 10ml de caldo lactosado de concentração dupla, neles inocula-se 10ml da amostra de água a ser analisada resultando na diluição 1:1, os demais tubos possuem de caldo lactosado de concentração simples; nos 3 tubos da segunda fileira inocula-se 1ml da água para 9ml do meio de cultura, resultando na diluição 1:10, e nos 3 tubos da terceira fileira inocula-se 0,1ml da água para 9,9 do meio de cultura, resultando na diluição 1:100.
C. Adicione uma ou mais fotos do resultado do teste presuntivo.
 
 Higienização da torneira e coleta da água teste presuntivo
D. Como devemos atribuir o laudo para a amostra de água analisada? 
O laudo deve conter os parâmetros que foram analisados, como os físico-químicos (cor, turbidez, cloro, pH) e os microbiológicos (presença de microrganismos), que dar-se pela interpretação dos resultados da análise, no caso do presuntivo será lido da seguinte forma: os tubos que contiverem uma bolha de ar formada pelo gás, indicaram a presença de coliformes. 
2. TESTE CONFIRMÁTORIO
A. Descrever qual a importância dessa técnica para a identificação microbiológica da água? Como é realizada a leitura?
O teste confirmatório é de suma importância, pois o teste presuntivo indica a presença de coliformes mas não tem alta precisão tendo em vista que ele considera que todos os microrganismos que produzem gás por meio da lactose do meio de cultura, sejam coliformes, já o confirmatório é mais específico, ele identifica a presença dos coliformes e inibe o crescimento de demais microrganismos. A leitura é realizada macroscopicamente por meio da identificação da presença de bolhas de gás que indicará a positividade do teste ou a ausência que indicará a sua negatividade.
B. Relatar como é realizada a análise do número mais provável (NMP), utilizada para obtenção do resultado do teste confirmatório.
O NMP é utilizado para quantificar a concentração de coliformes totais da água, A análise é realizada por meio da inoculação de amostras, dos tubos que positivaram em todas as diluições do teste presuntivo, em tubos contendo o meio de cultura VBBL (Verde Bile Brilhante Lactose), que serão incubados por 24 a 48h a 35ºC. Após esse período verificar quantos tubos positivaram, que são identificados pela formação da bolha de gás e/ou turbidez da amostra, em seguida, caso seja positivo para a presença de colônias de Escherichia coli deve-se fazer uma nova inoculação, sendo dessa vez utilizado o caldo EC e as amostras devem ser incubadas por 24h a 44,5ºC. Após realização das análises o cálculo é realizado por meio da tabela de NMP verificando o valor relacionado a quantidade de tubos positivos.
C. Como devemos atribuir o laudo final dessa amostra baseado na tabela de Hoskins?
Em aula nas amostras que analisamos obtivemos o seguinte resultado, para detecção de coliformes totais:
Nos 5 tubos da diluição 1:1 = 5 tubos positivos
Nos 5 tubos da diluição 1:10 = 2 tubos positivos
Nos 5 tubos da diluição 1:100 = 2 tubos positivos
Resultando na combinação 5-2-2 que corresponde a 94 NMP, sendo assim o resultado segundo a tabela de Hoskins é 94 NMP x 100 = 9.400 (coliformes totais).
Para detecção de Escherichia Coli.
Nos 5 tubos da diluição 1:1 = 5 tubos positivos
Nos 5 tubos da diluição 1:10 = 2 tubos positivos
Nos 5 tubos da diluição 1:100 = 3 tubos positivos
Resultando na combinação 5-2-3 que corresponde a 120 NMP, sendo assim o resultado segundo a tabela de Hoskins é 120 NMP x 100 = 1200 (Escherichia coli).
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
CARVALHO, Luis. Coliformes termotolerantes em alimentos. Prof.Dr.Luis Carlos Figueira de Carvalho, ©2023. Disponivel em: https://profluiscarloscarvalho.comunidades.net/coliformes-termotolerantes-em-alimentos. Acesso em: 24 out. 23.
JAHNEL, MC; CARDOSO, EJBN; DIAS, CTS. Determinação do número mais provável de microrganismos do solo pelo método de plaqueamento por gotas. Revista Brasileira de Ciência do Solo , v. 3, pág. 553–559, jul. 1999.
OLIVEIRA LEAL¹, R. V. Controle de qualidade microbiológico da água potável para o consumo humano: uma revisão bibliográfica. Revista Movimenta, v. 4298, 1984.
SANTOS, Priscila Ramos dos. Aspectos epidemiológicos e microbiológicos na distribuição da água potável em comunidade de João Pessoa-PB. 2014.
SONGY, Allan; SILVA, Arthur Siqueira da; OLIVEIRA, Mário dos Santos. Diagnóstico dos parâmetros físico-químicos e microbiológicos: qualidade da água dos bebedouros e torneiras do campus Darcy Ribeiro na Universidade de Brasília-DF. 2018.
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