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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA 2 DATA: 08/10/2021 VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA DOS ALIMENTOS – aula 2 DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Juliana Maria Falcão Ribeiro Fonseca MATRÍCULA: 01395403 CURSO: Nutrição POLO: Caruaru PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Silvia Marques ORIENTAÇÕES GERAIS: O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e concisa; O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; Espaçamento entre linhas: simples; Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). TEMA DE AULA: CONTAGEM DE COLIFORMES TOTAIS PELO MÉTODO DE NÚMERO MAIS PROVÁVEL (NMP): TESTE CONFIRMATÓRIO RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A professora durante a aula prática tenta detectar os coliformes fecais ou totais de uma amostra, explicando a importância dos coliformes. Esta bactéria faz parte de um grande grupo de bactérias (bactérias totais), e os coliformes possuem o poder de fermentar a partir de lactose no meio e com características de bactérias Gram negativas que comumente se multiplicam em temperatura de 35ºC, desenvolvem-se no intestino dos animais (todas as espécies). Ao ser encontrada fora deste ambiente, podemos considerar que houve a identificação de contaminação. Nesta aula a professora abordou como identificar os coliformes de modo geral (totais). Foi utilizado o meio estatístico número mais provável, demonstrando uma quantidade de microrganismos que foram positivados no decorrer da técnica, visualizando o quantitativo existente na amostra, para identificar se o alimento está viável para consumo. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA 2 DATA: 08/10/2021 VERSÃO:01 2. Elucidar a técnica de contagem N.M.P. para contagem em alimentos. Ao pegar o alimento (amostra) líquida ou sólida é pesado 0,25g ou ml e diluído em 225ml de água peptonada, obtendo uma diluição de 10 ̄ ¹, levando esse meio de cultura chamado LST, que contém lactose e outras substâncias que favorecem o crescimento das bactérias que estamos procurando. Posteriormente passado para o meio de cultura verde brilhante, que possuem estruturas que inibem o desenvolvimento de bactérias que não temos interesse para o estudo, como as bactérias Gram positivas que também conseguem fermentar na presença de lactose. O meio verde brilhante possui sais biliares que impedem o crescimento das bactérias Gram positivas, além de outras estruturas. A professora acendeu o bico de Bunsen, aqueceu a alça de alumínio e transferiu com a alça resfriada a amostra 10 ̄ ¹ para que sejam cultivadas no verde brilhante, fazendo isto para cada diluição (10 ̄ ¹, 10 ̄ ², 10 ̄³, etc.) fazendo uma repetição de 3 tubos. Os tubos de ensaio com o verde brilhante devem estar com o tubo de Durhan incluso neles, pois as bactérias que se multiplicarão no meio de cultura fermentarão a lactose, formando energia para suas atividades metabólicas, liberando gás, ficando preso no tubo de Durhan, que informa que a amostra está positiva para os coliformes totais. Se houver necessidade de identificar o tipo de bactéria, deve-se continuar com os tubos positivos fazendo a semeadura em placa de Petri, encubando em estufa, para desenvolvimento da bactéria e observação da morfologia, identificando o tipo de coliforme desenvolvido. Por fim, a professora apresentou como inserir os dados de números prováveis para o quantitativo de bactérias que podem estar se desenvolvendo TEMA DE AULA: CONTAGEM DE COLIFORMES TOTAIS PELO MÉTODO DE NÚMERO MAIS PROVÁVEL (NMP): TESTE PRESUNTIVO RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A professora informou que a fase presuntiva consiste em fazer a homogeneização e transferência das diluições da amostra para tubos de ensaio contendo, no fundo um tubo invertido para coleta de gás (Tubo de Durhan) em caldo lauril triptose. Todos os tubos são incubados a 35ºC, durante 24 a 48 horas e posterior identificação dos que tiveram crescimento positivo de coliformes totais. O resultado é identificado pela ocorrência de reação ácida (coloração amarelada) ou produção de gás (retirado do tubo de Durhan). 2. Elucidar a técnica de contagem N.M.P. para contagem em alimentos A professora pesou 25g (neste caso macerando em almofariz com pistilo) ou pipetou 25ml da amostra (neste caso amostra líquida), transferiu para o backer, adicionou 225ml de solução peptonada 0,1% e homogeneizou, formando uma solução de 10 ̄ ¹. Para preparar a segunda diluição (10 ̄ ²) transferindo assepticamente 1ml da diluição a 10 ̄ ¹ para um tubo de ensaio contendo 9ml de água peptonada. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA 2 DATA: 08/10/2021 VERSÃO:01 Logo em seguida a professora preparou uma terceira diluição (10 ̄ ³) transferindo assepticamente 1ml da diluição a 10 ̄ ² para um tubo de ensaio contendo 9ml de água peptonada. Após esse preparo, foi inoculado 1ml de cada diluição em tubos de ensaio preparados com caldo Lauril Sulfato triptose (LST) (10ml) e tubos de Durhan. Foi utilizado três tubos de ensaio para cada diluição e incubado a 35ºC por 48 horas para verificação da produção de gás.
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