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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE FORMAÇÃO DE PROFESSORES UNIDADE ACADÊMICA DE CIÊNCIAS DA VIDA CURSO DE BACHARELADO EM MEDICINA BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Prof. Dr. Anderson Angel Vieira Pinheiro, Ph.D. Cajazeiras – PB, 2023 • THE BIOMOLECULES OF LIFE: 1.INTRODUÇÃO BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR A informação é: ARMAZENADA ⇢ DECODIFICADA ⇢ EXECUTADA 1.INTRODUÇÃO BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR A informação é: ARMAZENADA ⇢ DECODIFICADA ⇢ EXECUTADA ⇢ ⇢ 1.INTRODUÇÃO BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS PROTEÍNASRNADNA • São moléculas centrais no metabolismo celular: - Participação na “transferência de energia”; - Reações enzimáticas; - Regulação da função celular. • DNA: repositório da informação genética: - Dirige sua própria replicação e transcrição do RNA; • RNA: alta diversidade funcional: - Codificar, decodificar, regular e sintetizar a “informação” como proteína; - “Executam”a informação genética: ribosimas; 1.INTRODUÇÃO BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS mRNA tRNA RNAisnRNArRNA 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Papel importante na transferência de ENERGIA e INFORMAÇÃO. 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • 8 tipos principais: 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • A ligação química de um nucleotídeo ao outro são conhecidas por LIGAÇÕES FOSFODIÉSTER; • Estão presentes tanto no DNA como no RNA; • Convenção: - Extremidade 5’ não apresenta um nucleotídeo na posição 5’. - Extremidade 3’ não apresenta um nucleotídeo na posição 3’. 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Sequências nucleotídicas dos ácidos nucleicos podem ser representadas por um segmento de DNA com cinco unidades nucleotídicas: 2.NUCLEOTÍDEOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS A sequência de uma fita simples de ácido nucleico é sempre escrita com a sua extremidade 5’ à esquerda e com a extremidade 3’ à direita: 5’⇢3’ • O início: descoberta da molécula do DNA 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Dra. Rosalind Elsie Franklin - Fotografia 51: § Técnica de difração de raios-X para estudar a estrutura do DNA, uma técnica que ela mesma aprimorou e desenvolveu ao longo dos anos; § A fotografia foi compartilhada sem sua autorização e levou Crick e Watson a chegarem à conclusão sobre a estrutura. • O início: descoberta da molécula do DNA 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Dra. Rosalind Elsie Franklin Fotografia 51 • O início: descoberta da molécula do DNA (1953): 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Dr. James Watson and Dr. Francis Crick • O início: descoberta da molécula do DNA (1953): 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Polímeros de nucleotídeos: - DNA - RNA • Ligação entre nucleotídeos: FOSFODIÉSTER; • Unidade variável: BASE NITROGENADA; • Fosfatos são ácidos ácidos nucleicos formam poliânions em pH fisiológico: - São pouco susceptíveis à ataques nucleofílicos. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Oligonucleotídeos: < 50 bases Polinucleotídeos: > 50 bases • O Açúcar-Fosfato forma a espinha dorsal ou esqueleto da cadeia: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Dados estruturais e químicos ⇢ Estrutura do DNA: - Regras de Chargaff (1950): composição das bases do DNA; - Variável de espécie para espécie; - Invariável na espécie, nos órgãos de um organismo, com a idade ou estado nutricional; - Conteúdo de C = G e de A = T em uma mesma molécula de DNA. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Regra de Chargaff: As purinas e pirimidinas estão em proporções equivalentes na molécula de DNA. • DNA como modelo de dupla hélice: - Duas Cadeias entorno de um eixo comum; - Fitas antiparalelas; - As bases estão no interior: o fosfato e a ribose estão no exterior; - Pares de bases estabilizados por ligações de hidrogênio intermoleculares T----A ou A----T C----G ou G----C - “Pareamento das bases complementares”: Regra de Chargaff. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • DNA como modelo de dupla hélice: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • DNA como modelo de dupla hélice: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • DNA como modelo de dupla hélice: “Molde para replicação ⇢ Sequência de DNA codifica a informação genética”: 1) O duplex de DNA deve ser aberto para expor a informação genética; 2) Síntese da cadeia complementar a partir de cada uma delas. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: - Síntese dirigida por complementariedade: § Semiconservativa; § Origem: bolha de replicação; § Crescimento da fita 5’⇢3’; § Fita contínua; § Fita descontínua (Fragmento de Okazaki); § Uni e bidirecional; § Revisão da Polimerase 3’⇢5’. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: § Semiconservativa: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: § Semiconservativa: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: § Síntese de DNA pelas DNA polimerase: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Replicação do DNA: § Atividade revisora exonuclease 3’→5’: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • O pareamento complementar: “As Ligações de hidrogênio” - Responsáveis pela especificidade da replicação; - Maior número em C + G; - Especificidade da dupla hélice; - Contribuem pouco para a estabilidade da dupla hélice pois competem com a água. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • O pareamento complementar: PALÍNDROMO x REPETIÇÕES INVERTIDAS 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Estrutura terciária do DNA: Superenrolamento da molécula ⇢ O DNA é flexível!!!! Síntese é assistida por proteínas que quebram o superenrolamento do DNA. Topoisomesases 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Estrutura terciária do DNA: Superenrolamento da molécula ⇢ Conta com a participação de proteínas. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • Estrutura terciária do DNA: Superenrolamento da molécula ⇢ Conta com a participação de proteínas. 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • DNA e RNA podem ser desnaturados: T > 80 graus C ⇢ ⇣ viscosidade 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • RNA: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • RNA: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • RNA: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS • RNA: 3.ÁCIDOS NUCLEICOS BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE FORMAÇÃO DE PROFESSORES UNIDADE ACADÊMICA DE CIÊNCIAS DA VIDA CURSO DE BACHARELADO EM MEDICINA BIOQUÍMICA DOS NUCLEOTÍDEOS E ÁCIDOS NUCLEICOS Prof. Dr. Anderson Angel Vieira Pinheiro, Ph.D. Cajazeiras – PB, 2023
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