1 - ESFREGAÇO SANGUINEO - Obrigatorio

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ESFREGAÇO SANGUÍNEO
Apresentação
1. OBJETIVO
Esta técnica permite a obtenção de uma fina camada de sangue sobre uma lâmina de vidro, que 
posteriormente será corada e observada ao microscópio óptico.
 
Ao final deste experimento, você deverá ser capaz de:
confeccionar uma distensão hematológica;•
utilizar corretamente os instrumentos para confecção da distensão hematológica;•
reconhecer o erro na execução, se houver, que deu origem a uma distensão inadequada.•
 
2. ONDE UTILIZAR ESSES CONCEITOS?
Dominar a confecção do esfregaço sanguíneo, ou distensão hematológica, é um dos primeiros e 
passos para execução de experimentos em hematologia, pois a citologia hematologia é parte das 
etapas iniciais de um conjunto de exames da rotina diagnóstica. Este procedimento é uma das 
etapas da realização do hemograma ou análise qualitativa das células sanguíneas. Este é um método 
rápido e barato de investigação de doenças relacionadas diretamente a células hematológicas, ou 
condições clínicas que são refletidas nas células que compõem o sistema imunológico, como em 
infecções e inflamações.
 
3. O EXPERIMENTO
Este experimento consiste em confeccionar uma distensão hematológica. Para isso, serão 
necessários alguns insumos, tais como: lâminas para microscopia; lâmina de extensora; micropipeta; 
tubo de coleta contendo amostra de sangue.
 
4. SEGURANÇA
Nesta prática serão utlizados luvas de procedimento e jaleco, também chamado de guarda pó. 
Apesar da prática não gerar um risco para o aluno, esses equipamentos de proteção são essencias 
para o ambiente de laboratório. As luvas evitarão algum possível corte ou contaminação com o 
sangue e o jaleco protege de respingos de sangue no corpo.
 
5. CENÁRIO
O ambiente do experimento apresenta uma bancada de laboratório com lâminas de microscopia 
limpas, secas e desengorduradas com a parte fosca para identificação, uma lâmina extensora e uma 
micropipeta. Você deverá selecioná-los e utilizá-los de modo a garantir a correta execução do 
experimento.
Bons estudos.
Sumário teórico
Acesse o sumário:
 
 
1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO 
CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 
E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br 
 
LABORATÓRIO DE HEMATOLOGIA 
ESFREGAÇO SANGUÍNEO 
 
ESFREGAÇO SANGUÍNEO 
 
 
 
O esfregaço de sangue também é conhecido como distensão sanguínea ou 
hematológica ou esfregaço hematológico. Este procedimento é realizado para 
observação microscópica dos componentes sanguíneos no exame hemograma e para 
investigação qualitativa e quantitativa das células do sangue. Neste procedimento a 
extensão de uma fina camada de sangue sobre uma lâmina de vidro será analisada ao 
microscópio após coloração específica. 
Seu objetivo principal é analisar a morfologia das células sanguíneas e, 
adicionalmente, fornecer informações sobre a estimativa do número de leucócitos e 
eritrócitos, classificação dos tipos leucocitários, análise morfológica dos eritrócitos e 
aspectos das plaquetas, auxiliando na investigação de disfunções hematológicas. A 
distensão hematológica pode fornecer informações importantes sobre o paciente, 
auxiliando o médico no diagnóstico de doenças relacionadas ao sangue, por exemplo, 
as anemias, ou reflexos de distúrbios sistêmicos em outras condições médicas, tais 
como, infecções. 
 
 
Figura 1 – Comparação entre o sangue de uma pessoa saudável e uma pessoa anêmica. 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE HEMATOLOGIA 
ESFREGAÇO SANGUÍNEO 
Apesar dos avanços tecnológicos de automação em hematologia, a observação 
microscópica dos elementos que compõem o sangue ainda é indispensável em muitos 
casos, sendo necessário, para obtenção de resultados confiáveis, que represente de 
forma fidedigna as condições in vivo da confecção de um esfregaço, empregando 
corretamente a técnica. 
 
 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
 
 
OLIVEIRA LIMA , A., GRECO, J.B., BENJAMIN SOARES, J., CANÇADO J. R., GALIZZI, 
J. Métodos de Laboratório Aplicados a Clínica: Técnica e Interpretação. págs 21-10 a 
21-11. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2001, 8ª edição. 
 
MELO, C. P. A., FRANCO, J. M., GARCIA, T. F. P., NEVES, P. A., Manual Roca Técnicas de 
Laboratório Sangue. São Paulo: Editora Roca Ltda. editora integrante do GEN | Grupo 
Editorial Nacional, 2011. 
 
 
Roteiro
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INSTRUÇÕES GERAIS 
 
 
1. Neste experimento, você aprimorará seus conhecimentos sobre esfregaço 
sanguíneo. Esta técnica permite a obtenção de uma fina camada de sangue sobre 
a lâmina de vidro, que posteriormente será corada e observada ao microscópio. 
 
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da 
experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do 
VirtuaLab. 
 
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial 
VirtuaLab” presente neste Roteiro. 
 
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as 
instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 
 
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação 
de Resultados”. 
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RECOMENDAÇÕES DE ACESSO 
 
PARA ACESSAR O VIRTUALAB 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 
4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 
5. Realize teste de velocidade da internet. 
 
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos 
Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção 
de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ 
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com 
nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por 
Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! 
ATENÇÃO: 
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER 
ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. 
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. 
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO 
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE 
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 
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PERGUNTAS FREQUENTES 
 
 
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentospodem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. 
 
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> 
“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o 
computador. 
 
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2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente 
novamente. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Verifique se o navegador está atualizado. 
 
 
 
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DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
 
• Lâmina extensora; 
• Lâmina; 
• Micropipeta; 
• Tubo de coleta com amostra. 
 
 
PROCEDIMENTOS 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. Nesse 
experimento é obrigatório o uso de jaleco e luvas. 
 
2. LIMPANDO A LÂMINA 
 
Limpe a lâmina que futuramente depositará a amostra. Isso garantirá uma maior qualidade de 
visualização e evitará descontinuidades. 
 
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3. DEPOSITANDO A AMOSTRA NA LÂMINA 
 
Mova a micropipeta para o tubo contendo a amostra. Em seguida colete a amostra, retire a 
micropipeta do interior do tubo e transfira o conteúdo coletado para a lâmina. 
 
4. REALIZANDO O ESFREGAÇO 
 
Posicione a lâmina extensora sobre a lâmina contendo a amostra. Em seguida, escolha a 
inclinação. Realize o procedimento 3 vezes para notar a diferença de cada esfregaço. 
 
5. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 07 deste roteiro, e 
responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com os 
conhecimentos aprendidos sobre o tema. 
 
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AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 
 
 
 
1. Qual a principal implicação de realizar o procedimento sem antes limpar a 
lâmina? 
 
 
 
2. Qual o malefício de depositar na lâmina uma amostra de sangue superior ao 
recomendado? 
 
 
 
 
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TUTORIAL VIRTUALAB 
 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Visualize os equipamentos de proteção individual clicando com o botão esquerdo do 
mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de 
visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir, utilize o atalho do teclado 
“Alt+6”. 
 
 
 
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Abra o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 
 
 
 
Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo 
do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco e luvas. 
 
 
 
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Feche as portas do armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas. 
 
 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+1”. 
 
 
 
 
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2. LIMPANDO A LÂMINA 
 
Limpe a lâmina clicando com o botão direito do mouse sobre ela e selecione a opção 
“Limpar”. 
 
 
 
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3. DEPOSITANDO A AMOSTRA NA LÂMINA 
 
Mova a micropipeta para o tubo contendo a amostra clicando com o botão direito do 
mouse sobre ela e selecione a opção “Colocar sobre o tubo de coleta”. 
 
 
 
Ative o primeiro estágio da pipeta pressionando o botão esquerdo do mouse sobre o 
êmbolo. 
 
 
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Mova a micropipeta para dentro do tubo clicando com o botão direito do mouse sobre 
ela e selecione a opção “Colocar dentro do tubo de coleta”. 
 
 
 
Aspire o sangue clicando com o botão direito do mouse sobre o êmbolo. 
 
 
 
 
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Retire a micropipeta de dentro do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse 
sobre micropipeta e selecione a opção “Remover do tubo de coleta”. 
 
 
 
Mova a micropipeta para a lâmina clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecione a opção “Colocar sobre a lâmina”. 
 
 
 
 
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Deposite a gota de sangue sobre a lâmina clicando duas vezes com o botão esquerdo do 
mouse no êmbolo da micropipeta 
 
 
 
Retorne a micropipeta para o suporte clicando com o botão direito do mouse sobre ela 
e selecione a opção “Retornar ao suporte”. 
 
 
 
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4. REALIZANDO O ESFREGAÇO 
 
Mova a lâmina extensora clicando com o botão direito do mouse sobre ela e selecione 
a opção “Colocar sobre a lâmina”. 
 
 
 
Realize a extensão da lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse na opção 
“Contínuo”. 
 
 
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Substitua a lâmina clicando com o botão direito do mouse sobre ela e selecione a opção 
“Substituir por outra lâmina”. 
 
 
 
Repita o procedimento mais duas vezes alterandoo movimento da lâmina extensora: 
“Rápido” e “Intermitente” e observe as alterações dos resultados. 
 
 
 
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5. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada na página 07 deste roteiro, e 
responda de acordo com o que foi observado no experimento, associando também com 
os conhecimentos aprendidos sobre o tema. 
Pré Teste
1) 
A técnica de confecção do esfregaço sanguíneo ou distensão sanguínea permite:
A) obtenção de uma amostra de sangue, que posteriormente será analisada por equipamento 
hematológico;
B) investigação de índices hematimétricos como hematócrito e volume corpuscular médio, pela 
observação ao microscópio óptico;
C) obtenção de uma fina camada de sangue sobre uma lâmina de vidro, que posteriormente será 
corada e observada ao microscópio óptico. 
2) 
O experimento de confecção de esfregaço sanguíneo utilizará os seguintes insumos: 
A) lâminas limpas e desengorduras, lâmina extensora, material para punção de amostra de 
sangue fresco;
B) lâminas limpas e desengorduras, câmara de Neubauer e hemoglobinômetro de Sahli; 
C) lâminas limpas e esterilizadas, lâmina extensora, câmara de Neubauer e descarte de material 
perfurocortante.
3) 
Qual dentre os EPIs (Equipamentos de Proteção Individual) listados abaixo é indispensável 
para confecção de esfregaço sanguíneo (distensão hematológica)? 
A) Luvas de procedimento;
B) Face shield; 
C) Máscara N95.
4) 
Qual a quantidade ideal de sangue que deve ser colocada na lâmina de microscopia para a 
confecção de uma boa distensão sanguínea?
A) Aproximadamente 100 microlitros;
B) Aproximadamente 50 microlitros; 
C) Aproximadamente 10 microlitros. 
5) 
Qual a angulação recomendada da lâmina extensora sobre a lâmina de microscopia, na qual 
será executado a distensão sanguínea? 
A) É recomendado ângulo de 30 graus da lâmina extensora; 
B) É recomendado ângulo de 45 graus da lâmina extensora;
C) É recomendado ângulo de 60 graus da lâmina extensora. 
Experimento
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Pós Teste
1) O esfregaço satisfatório deve ser fino e homogêneo, de margens livres, pois só os que 
reúnem essas características apresentam leucócitos, eritrócitos e plaquetas sem 
deformações e convenientemente distribuídos. Assinale a alternativa abaixo na qual consta 
a ação durante o procedimento de distensão sanguínea que deixa o esfregaço mais espesso 
(grosso).
A) Fazer pouca pressão ou pressão desigual da lâmina extensora sobre a lâmina do esfregaço;
B) O ângulo menor que 300 entre a lâmina extensora e a lâmina do esfregaço;
C) A gota de sangue ≤ 10μL de sangue.
2) Para ter um esfregaço satisfatório, é indispensável que alguns cuidados sejam observados. 
São fatores que influenciam na qualidade do esfregaço, EXCETO:
A) a concentração de hemoglobina na hemácia;
B) o volume de sangue ou o tamanho da gota;
C) a velocidade da execução do movimento.
3) Sobre os erros mais comuns na confecção do esfregaço sanguíneo, observe a imagem abaixo e 
assinale a alternativa correta. 
A) O esfregaço do tipo A é decorrente de pausas ao mover a lâmina extensora;
B) O erro do tipo F é decorrente de sujeira ou gordura na lâmina ou amostra lipêmica;
C) O erro do tipo D é decorrente de pressão desigual na lâmina extensora.
4) Para ter um esfregaço satisfatório, as lâminas devem estar perfeitamente limpas e isentas de 
gordura. Para isso, alguns procedimentos devem ser feitos, EXCETO:
A) lavá-las com água e detergente;
B) lavá-las com ácido acético;
C) colocá-las em álcool 95%.
5) Sobre o procedimento de confecção do esfregaço sanguíneo ou distensão sanguínea, analise as 
afirmativas listadas abaixo e assinale a alternativa que enumera a sequência correta das ações: 
A) 1 – 2 – 4 – 5 – 3 – 6 – 7;
B) 1 – 2 – 4 – 6 – 5 – 3 – 7;
C) 1 – 2 – 6 – 3 – 5 – 4 – 7.