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Morfologia dos fungos Fungos São organismos eucariontes, podem ser unicelulares ou pluricelulares e pertencem ao Reino Fungi. LEVEDURAS ◼ São unicelulares, não filamentosas apresentam em média 1 a 5 µm de diâmetro e de 5 a 30 µm de comprimento. ◼ Não possuem flagelos, são imóveis ◼ São ovais, podendo apresentar morfologia alongada ou esférica. Podem apresentar várias formas como: Ovais Esféricas Alongadas FUNGOS FILAMENTOSOS • São organismos pluricelulares ou multicelulares apresentam filamentos, aspecto aveludado ou cotonoso (algodão). O conjunto de hifas que formam o corpo ou a colônia do fungo filamentosos é chamado de micélio. hifas MEMBRANA PLASMÁTICA Localizada abaixo da parede celular. Composição química: Glicoproteínas Lipídios Ergosterol FUNÇÃO: - Entrada seletiva de nutrientes - Proteção da perda de pequenas moléculas PAREDE CELULAR Responsável pela forma da levedura. • Proteínas • Lipídeos • Quitina • As paredes rígidas das hifas são formadas de quitosana, celulose e glicanas. ESTRUTURAS CITOPLASMÁTICAS ◼ CITOPLASMA ◼ Enzimas, carboidratos de reserva (glicogênio e trealose). ◼ Grandes quantidades de ribossomos e polifosfato. ◼ NÚCLEO ◼ Bem definido, pequeno e esférico, circundado por uma membrana semipermeável. ◼ leveduras (unicelulares) ◼ Fungos filamentosos (multicelulares) ◼ Funções: Metabólicas e reprodutivas. ◼ Apresentam uma gama de organelas presentes no citoplasma (mitocôndrias, RE, Complexo de golgi) FATORES NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO DOS MICRO-ORGANISMOS NUTRIÇÃO MICROBIANA Os fatores necessários para o crescimento dos micro- organismos podem ser divididos em duas categorias: FATORES QUÍMICOS CARBONO • Carbono junto com a água é um dos elementos mais importantes para o crescimento microbiano. • Fornecem energia para o crescimento da célula e para manter a viabilidade celular. Carbono Fontes de carbono Carboidratos: ◼ glicose • Frutas - uva, laranja, jabuticaba, etc. • Malte - cevada, trigo, milho, etc. • Melaço - subproduto da fabricação da cana de açúcar • Licor sulfítico - subproduto da fabricação do papel Nitrogênio Para a síntese de material celular dos micro-organismos é necessária além do carbono, a presença de outros nutrientes. Fontes de nitrogênio Inorgânico: NH4Cl, (NH4)2SO4 , NH4NO3, etc. Orgânica: Líquido de maceração de milho – subproduto do amido Farinha de soja - subproduto da fabricação de óleo Extrato de levedura - preço elevado Peptonas - preço elevado ÍONS INORGÂNICOS ESSENCIAIS Macronutrientes Fósforo – síntese de DNA, RNA e ATP. São utilizados na forma de fosfato. Enxofre – síntese de aminoácidos e de vitaminas como biotina e tiamina. Potássio – ativador de enzimas e regula a pressão osmótica. Magnésio – ativador das enzimas extracelulares e fator importante na esporulação. Ferro – síntese de pigmentos. MICRONUTRIENTES Também são necessários mas normalmente em quantidades extremamente pequena. Cobre Cobalto Zinco Manganês Sódio Boro CLASSIFICAÇÃO NUTRICIONAL DOS MICRO- ORGANISMOS De acordo com a fonte de energia e de carbono os organismos são classificados Com base na temperatura de crescimento, são classificados 3 grupos de micro-organismo • Psicrófilos: crescem em baixas temperaturas (-10 a 15 °C) • Mesófilos: crescem em temperaturas moderadas (10 a 50 °C) • Termófilos: crescem em altas temperaturas (40 a 70 °C) Termófilos extremos (68 a 110 °C) FATORES FÍSICOS PARA O CULTIVO DE MICRO-ORGANISMOS TEMPERATURA Figura 1- Curvas de crescimento características de diferentes micro- organismos em resposta a variação na temperatura Termófilo extremo OXIGÊNIO De acordo com a resposta ao oxigênio os micro-organismos são classificados: pH: - Refere-se a acidez ou a alcalinidade de uma solução; - Maioria dos micro-organismos cresce melhor perto da neutralidade (pH 6,5 – 7,5); - Poucas bactérias são capazes de crescer em pH ácido (como pH 4,0) Bactérias: faixa entre pH 7,0 Exceções: - Bactérias acidófilas: alto grau de tolerância à acidez (Thiobacillus de 0,5 a 6,0 com ótimo entre 2 e 3,5) - Bactérias alcalifílicas: (Bacillus e Archaea) (pH 10 – 11). pH Neutro (~7,0): maioria dos micro-rganismos pH Ácido (~ 4,5): bolores, leveduras e bactérias acidotolerantes pH Muito Ácido (< 3,0): bolores, leveduras e bactérias acidófilas PRESSÃO OSMÓTICA: • Os micro-organismos retiram da água a maioria dos nutrientes solúveis (conteúdo celular 80 – 90 % de água) Pressão osmótica: retira a H2O dentro da célula Reação Hipertônica: perda de H2O do meio intracelular para o extracelular, através da membrana plasmática (meio com aumento da concentração de sais). Plasmólise: diminuição da membrana plasmática da célula devido a perda de H2O por osmose. • Muitos destes fatores são vitaminas, em especial do complexo B e aminoácidos. • As necessidades dos micro-oganismos são variadas. Quando um micro-organismo exige um certo fator, seu crescimento será limitado pela quantidade do fator presente no meio. FATOR DE CRESCIMENTO • São os compostos orgânicos indispensáveis a um determinado micro-organismo, mas que ele não consegue sintetizar. CRESCIMENTO CELULAR Fase Lag (adaptação) •Fase de adaptação metabólica ao novo ambiente; •Síntese de enzimas requeridas para o crescimento nas novas condições ambientais encontradas pelas células. •O número de indivíduos não aumenta nesta fase, podendo até mesmo decrescer. Fase exponencial (fase logarítmica): • Fase na qual o número de células da população dobra a cada geração. •Após um determinado período de crescimento exponencial, as condições ambientais tornam-se desfavoráveis pela escassez de nutrientes essenciais, acúmulo de metabólitos tóxicos e limitação de espaço. Fase estacionária: •fase em que a taxa de crescimento diminui significativamente devido às condições limitantes do meio. Fase de declínio ou morte: •fase de declínio exponencial do número de células viáveis: O número de células viáveis entra em declínio progressivo até a completa extinção da população. Métodos de quantificar o crescimento microbiano QUANTIFICAÇÃO DIRETA: CONTAGEM DIRETA AO MICROSCÓPIO - um volume conhecido de suspensão bacteriana é colocado em uma área definida da lâmina de microscópio. - a amostra pode ser corada ou analisada a fresco. - utilizam câmaras de contagem DESVANTAGENS: - não separa células mortas e vivas - pode haver erros de contagem - difícil contagem para bactérias móveis Câmara de Neubauer Métodos de contagem de células viáveis/ ou Contagem em Placa Diluição antes do Plaqueamento Método bastante usado • Analisar contaminações • Sensível • Medir a quantidade de células de um organismo específico proveniente de uma amostra mista – selecionando o meio de cultura na placa de petri Contagem é feita “unidade formadora de colônia - UFC” D.O – medida de turbidez QUANTIFICAÇÃO INDIRETA: PESO SECO - principalmente para fungos filamentosos a) fungo é removido do meio por filtração b) seco em dessecador c) posterior pesagem.
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