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@Ellenmafra Ellen Mafra Fecundaca̧õ............................................................. F ecundaca̧õ: reconhecimento e contato de espécie especıf́ico entre espermatozóide e óvulo, por meio da ligaca̧õ do espermatozoide com a zona pelúcida do óvulo. Que ocorre na ampola da tuba uterina. Reconhecimento Na superfıćie do SPTZ tem proteıńas que reconhecem/se ligam em proteıńas da zona pelúcida, a ZP3 é a principal. Reaca̧õ Acrossomal Após essa ligaca̧õ precisa sofrer o processo acrossomal fazendo liberaca̧õ das enzimas, onde faz um buraco na zona pelúcida, entrando no espaco̧ perivitelıńico e realizar o bloqueio da poliespermia. Espermatozoide se liga a zona pelúcida do oócito → tem instabilidade da membrana acrossomal externa → Contato com a membrana plasmática → Fusaõ (vesıćula hibrida) → Entre elas surge um espaco̧ → Enzimas acrossomais extravasam (acrosina diretamente na zona pelúcida a degradando) + Motilidade → Penetraca̧õ → espaco̧ perivitelıńico Fecundaca̧õ e clıv́agem @Ellenmafra Ellen Mafra Pós reaca̧õ acrossomal surge as proteıńas de fusaõ, por meio delas o SPTZ vai se ligar em um membrana do oócito. Apenas um SPTZ reagido vai conseguir ser reconhecido pelo óvulo e ser internalizado, pós completa internalizaca̧õ forma o cordaõ de fertilizaca̧õ. Chega ao espaco̧ perivitelıńico → Surgimento de proteıńas de fusaõ → Ligaca̧õ e fusaõ com membrana vitelıńica do oócito → Internalizaca̧õ do espermatozóide - “Cone/cordaõ de fertilizaca̧õ” → Bloqueio da polispermia → Ativaca̧õ oocitária → Fusaõ do material genético dos pró núcleos feminino e masculino no interior do óvulo → Zigoto Penetraca̧õ da Zona Pelúcida Bloqueio da polispermia Vai correr a partir do momento em que o SPTZ entra no espaco̧ perivitelıńico. Bloqueio rápido → Quando o SPTZ entrar vai ocorrer a entrada de cálcio tendo alteraca̧õ na carga/polaridade da membrana. Alterando essa polaridade as proteıńas que estavam do lado externo vaõ para o lado interno da membrana, fazendo qual quer outro SPTZ que esteja grudado se soltar. Bloqueio lento → Após a ligaca̧õ do SPTZ, há liberaca̧õ dos grânulos corticais com proteases que digerem as proteıńas de reconhecimento Ativaca̧õ oocitária Quando o SPTZ faz todo o mecanismo de entrar e liberar o cálcio ele ativa a última meiose (II) para extrusaõ do último corpúsculo polar e a célula fica com o conteúdo de DNA haploide que por fim vai separar as cromátides. Ruptura da membrana nuclear do espermatozoide → Substituica̧õ de protaminas por histonas → Término da meiose II do pró núcleo feminino → Replicaca̧õ do DNA dos pró núcleos (mitoses) → Migraca̧õ para o centro do óvulo para singamia Protaminas: compactaca̧õ do material genético e antıd́oto para anticoagulantes. - sem̂en de salmaõ Histonas: organizaca̧õ da dupla fita de DNA. Desenvolvimento de um organismo multicelular através de divisoẽs mitóticas (mitose) após a fecundaca̧õ, sem crescimento de uma célula para outra. Replica seu DNA muito antes de ter o núcleo único, entaõ o pro núcleo masculino e feminino ainda estaõ separados e Clivagem @Ellenmafra Ellen Mafra conforme eles forem andando para o centro da célula para fazer a singamia eles já estaõ duplicando o DNA e vaõ duplicando até chegar ao centro, a vantagem é que assim que fundir já estaraõ multiplicados e depois é só se dividir. Pós este processo temos um embriaõ. Desenvolvimento embrionário Quando ele comeca̧ a se dividir vamos chamar pelo número de células que ele tem. Zigoto → quando ainda naõ tem divisaõ Embriaõ → 2 células Embriaõ → 4 células Embriaõ → 8 células Embriaõ → 16 células Mórula → quando comeca̧r a ficar difıćil de contar ás células Mórula compacta → ela comeca̧ a se compactar Quando comeca̧r a perder a definica̧õ e comeca̧r a surgir lıq́uido dentro dessa cavidade inicia os blastocistos. O lıq́uido da cavidade chamamos de blastocele. Blasto cisto inicial → cavidade com menos de 50% Blastocisto → cavidade passou de 50% Blastocisto em expansaõ → cavidade comeca̧ a expandir, nessa fase a zona pelúcida comeca̧ a ficar bem fininha. Blastocisto em eclosaõ → rompe a ZP e o conteúdo comeca̧ a sair. Blastomeros: nome das bolinhas do embriaõ de 2, 4, 8 e 16 células A partir de blastocisto surge a primeira diferenciaca̧õ celular na vida de um individuo, sendo diferente e naõ conseguindo voltar. As células que ficam do lado de fora e fazem as junco̧ẽs oclusivas e ficam achatadas vamos chamar de trofoblasto. O conjunto de células internas/massa celular interna vamos chamar de embrioblasto. @Ellenmafra Ellen Mafra O trofoblasto vai virar a placenta (tecido extraembrionário) e o emrbrioblasto vai virar o embriaõ. Embrioblasto Trofoblasto Conforme eles forem se desenvolvendo ele vai andando da tuba uterina até o útero. Chegando em estágio de mórula e blastocisto, rompendo/eclodindo dentro do útero, tendo uma funca̧õ importante da zona pelúcida durante esse desenvolvimento que é a proteca̧õ O embriaõ bovino vai chegar ao útero em torno de 6 a 7 dias. Sendo relativo em cada espécie. As células de fora (trofoblasto) vaõ virar placenta e formam as ligaco̧ẽs ocludentes (tigth juntions) As células de dentro (embrioblasto) vaõ virar o embriaõ e vaõ ter outro tipo de ligaca̧õ, que é para manter contato, terem o mesmo ambiente celular e se desenvolverem juntas, sendo Blastocele essas ligaco̧ẽs as GAP juntions Os trofoblastos vaõ comeca̧r a bombear sódio para o espaco̧ extracelular, puxando água do ambiente externo, onde vaõ comeca̧r a acumular lıq́uido nesse embriaõ formando uma cavidade de lıq́uido, que é a blastocele. O sódio sendo sal vai puxar a água, conforme as células vaõ bombeando sódio para o meio a água de fora comeca̧ a entrar, formando uma cavidade cheia de sódio (sendo a blastocele) que vai crescendo e esticando o embriaõ até que ele rompe e sai da zona pelúcida. Sendo a blastocele e o trofoblasto responsáveis pela ruptura da zona pelúcida. Utilizamos o DNA para transcrever e transformar em proteıńa. Nos primeiros dias o embriaõ naõ le ̂o próprio DNA (por conta da questaõ da meiose/mitose) quem deixa o RNA mensageiro pronto para ele é a maẽ. Quando ele comeca̧ a ler seu próprio DNA chamamos de ativaca̧õ do genoma embrionário. Em Bovino ativa com 8/16 células, variando de uma espécie para outra. Ativaca̧õ do genoma embrionário Transferen̂cia de embrioẽs @Ellenmafra Ellen Mafra → Se realizarmos IA em uma vaca em épocas muito quentes vamos ter muita perda embrionária, por que ocorre? Ocorre a desnaturaca̧õ das proteıńas como o embriaõ naõ le ̂o próprio DNA ele tem que ler o da maẽ, por mais que a maẽ deixa os DNA extras uma hora acaba e o embriaõ morre → Mas se voce ̂ pegar um embriaõ congelado da época fria e transfere ele sobrevive. Por que ele sobrevive? Porque ele é congelado em forma de blastocisto (que ele já teve ativaca̧õ do genoma). Basicamente ele sobrevive porque ele já está lendo seu DNA, se sua proteıńa se degradar ele vai conseguir ler e produzir outra no lugar. Resposta do embriaõ ao calor O calor desnatura as células e proteıńas. A célula naõ consegue soar e nem fazer vasodilataca̧õ entaõ ela tem que ter organismos moleculares para se proteger do calor Ela produz a proteıńa “chaperona”, onde ela fica em volta das outras proteıńas e vai impedir que ela se desnaturem, quando ela encontrar uma proteıńa torta/desnaturada ela corrige e renatura ela. Chaperona é sua funca̧õ, seu nome na verdade é HSP Hate Shock Protein (proteıńa de choque térmico). saõ proteıńas que vaõ ser produzidas quando a célula está passando por um choque térmico – ou muito frio ou muito calor. A receitadessa proteıńa protetora do calor está no DNA, a maẽ vai deixar cópias, o filho só vai conseguir sintetizar/produzir apenas quando ele tiver ativo. Por isso o embriaõ mais velho (o congelado) consegue sobreviver a esse estresse, por ele já está ativado e consegue produzir essas proteıńas HSP e mesmo se essa proteıńa naõ funcionar ele já consegue repor essa proteıńa pois já tem o genoma embrionário ativado. A desnaturaca̧õ das proteıńas ocorre dependendo da temperatura Eclosaõ Com o bombeamento de sódio vai formar a blastocele e isso vai se esticando até que ele consegue romper. O trofoblasto comeca̧ a produzir protease (como a estripsina), onde essas proteases degradam proteıńas, nesse caso vaõ degradas a zona pelúcida Com a zona pelúcida fragilizada pela degradaca̧õ + esticando por conta do blastocele, ela rompe e com isso o embriaõ consegue eclodir.
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