Análise de Células, Moléculas e Sistemas

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Aná lise de Cé lulas, 
Molé culas e Sistemas 
Análise Bioquímica de Populações de 
Células: 
 Populações de células são analisadas 
bioquimicamente através da ruptura celular 
e fracionamento do conteúdo. 
 Isso permite o desenvolvimento de sistemas 
funcionais livres de células para a 
compreensão detalhada de processos 
celulares complexos. 
 A purificação extensiva de todas as 
proteínas e outros componentes 
envolvidos é necessária para o 
desenvolvimento desses sistemas. 
Purificação de Proteínas: 
 As proteínas nos extratos celulares solúveis 
são purificadas por colunas de 
cromatografia. 
 Dependendo do tipo de matriz da coluna, 
as proteínas podem ser separadas com base 
em sua massa molecular, hidrofobicidade, 
características de carga ou afinidade por 
outras moléculas. 
 Técnicas de DNA recombinante permitem a 
ligação de marcadores de remento 
especiais às proteínas, simplificando sua 
purificação. 
Identificação e Análise de Proteínas: 
 Diversos métodos são utilizados para 
identificar proteínas e analisar suas 
propriedades bioquímicas, estruturas e 
interações com outras proteínas. 
 Inibidores de pequenas moléculas permitem 
o estudo das funções das proteínas. 
 A atividade bioquímica de uma 
proteína pode ser predita 
pesquisando bancos de dados de 
proteínas caracterizadas com 
sequências de aminoácidos similares. 
Clonagem de DNA: 
 A clonagem de DNA permite a seleção e 
produção de cópias de sequências 
específicas de DNA ou RNA em quantidades 
ilimitadas e em forma pura. 
 A amplificação de sequências de DNA é 
realizada após clivagem do DNA 
cromossômico e inserção dos fragmentos 
resultantes em elementos genéticos de 
autorreplicação. 
 A PCR permite a clonagem direta de 
DNA, sem a necessidade de vetores 
de clonagem e células bacterianas. 
Hibridização de Ácidos Nucleicos e 
Sequenciamento de Genomas: 
 As reações de hibridização de ácidos 
nucleicos permitem a detecção sensível de 
sequências nucleotídicas específicas. 
 A hibridização do DNA é utilizada para 
amplificar qualquer parte de qualquer 
genoma após a determinação de sua 
sequência. 
 As técnicas de sequenciamento 
automatizado permitem a rápida 
determinação da sequência de 
nucleotídeos de qualquer genoma, 
facilitando a comparação entre diferentes 
organismos e a descoberta de novos genes. 
Genética e Engenharia Genética: 
 A mutagênese aleatória e o rastreamento 
de mutantes são utilizados na abordagem 
genética clássica para identificar genes 
responsáveis por processos biológicos. 
 A engenharia genética permite a alteração 
e reintrodução de genes em células, 
resultando na expressão de genes mutantes 
em organismos transgênicos. 
 Essas técnicas possibilitam a manipulação 
específica de células e organismos para 
investigar a função gênica em uma escala 
genômica. 
Tecnologias de Expressão Gênica: 
 Tecnologias como RNAseq e microarranjos 
de DNA permitem monitorar a expressão de 
milhares de genes simultaneamente, 
fornecendo insights sobre os padrões 
dinâmicos da expressão gênica em 
processos celulares complexos.