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17/12/2020 1 Líquidos biológicos Soro, plasma e saliva Flávia Soares Lassie 1 17/12/2020 2 • Unidade de Ensino: 1 • Competência da Unidade: Aprender os procedimentos para a coleta de sangue venoso. Diferenciar soro e plasma, identificar os interferentes pré-analíticos e as correlações clínicas das análises. Conhecer a composição da saliva, e análises que são realizadas. • Resumo: Procedimentos para a coleta de sangue venoso. Amostras de sangue: soro e plasma. Interferentes pré-analíticos e as correlações clínicas das análises. Composição da saliva, e análises do fluido salivar. • Palavras-chave: soro, plasma, coleta de sangue venoso, exame laboratorial, etapas dos exames laboratoriais, saliva. • Título da Teleaula: Soro, plasma e saliva • Teleaula nº: 1 2 17/12/2020 3 Contextualização da teleaula Etapas do exame laboratorial; Soro e plasma; Amostras de sangue: Análises e correlações clínicas; Amostras de soro: Análises e correlações clínicas; Análise do fluido salivar; Dosagens na saliva. 3 17/12/2020 4 Exame Laboratorial: Etapas 4 17/12/2020 5 Exame Laboratorial Funções: Diagnosticar doenças potenciais, não suspeitas; Estabelecer precocemente o diagnóstico de doenças suspeitas; Promover diagnóstico diferencial entre possíveis doenças; Fornecer prognóstico para o paciente com doença conhecida; Monitorar a eficiência de um tratamento instituído; Possibilitar o aconselhamento genético. Ferramenta da medicina moderna para se ter cada vez mais preciso diagnósticos. 70% das decisões médicas se baseiam em resultados de exames laboratoriais. 5 17/12/2020 6 Etapa Pré- analítica Etapa Analítica Etapa Pós- analítica Exame Laboratorial: Etapas 6 17/12/2020 7 Fase pré-analítica Fase que se inicia com a solicitação da análise, passando pela obtenção da amostra e finda ao se iniciar a análise propriamente dita. Fonte: https://binged.it/2JcxH2c acesso nov. 2020 Fonte: https://binged.it/3of71wB acesso nov. 2020 Recepção; Indicação e solicitação do exame; Instruções de preparo, identificação do paciente e anamnese completa; Preparação e coleta de amostras; Coleta, acondicionamento, transporte e preservação de amostras. 7 17/12/2020 8 Fase analítica Conjunto de operações, com descrição específica, utilizada na realização das análises de acordo com determinado método. Fonte: https://binged.it/38DEYzA acesso nov. 2020 Fonte: https://binged.it/38BmYpL acesso nov. 2020. 8 17/12/2020 9 Fase pós-analítica Fase que se inicia após a obtenção de resultados válidos das análises e finda com a emissão do laudo, para a interpretação pelo solicitante. Fonte: https://bit.ly/2HUYPly acesso nov. 2020 9 17/12/2020 10 Soro e Plasma 10 17/12/2020 11 Sangue É um tecido conjuntivo líquido que circula pelo sistema cardiovascular; A contração rítmica do coração bombeia o sangue através do sistema cardiovascular até os tecidos do corpo. Funções do sangue: Transporte: transporta O2 dos pulmões para as células do corpo e CO2 das células corporais para os pulmões; Regulação: o sangue circulante ajuda a manter a homeostasia de todos os líquidos corporais; Proteção: capaz de coagular, protegendo contra perdas excessivas do sistema circulatório depois de uma lesão. 11 17/12/2020 12 Composição do sangue Plasma sanguíneo: matriz extracelular aquosa que contém substâncias dissolvidas; 91, 5% de água e 8,5% de solutos (7% por peso de proteínas)- albumina, globulinas e fibrinogênio. Elementos figurados: células e nos fragmentos celulares; 3 componentes: hemácias, leucócitos e plaquetas Fonte: https://binged.it/3bBnuVA acesso nov. 2020 12 17/12/2020 13 Tipos de amostras sanguíneas SORO : É a parte líquida do sangue obtido quando coletado em TUBO SEM ADITIVO + centrifugação PLASMA: É a parte líquida do sangue obtido quando coletado em TUBO COM ANTICOAGULANTE + centrifugação SORO COÁGULO Fonte: https://binged.it/2KOaDqF acesso nov. 2020 PLASMA Fonte: https://binged.it/3mnk7r3 acesso nov. 2020 COLETA DE SANGUE VENOSO 13 17/12/2020 14 SANGUE TOTAL: o sangue permanece nas suas características próximas a normalidade quando coletados em TUBO COM ANTICOAGULANTE, não sofre processo de centrifugação Tipos de amostras sanguíneas Fonte: https://binged.it/37Bpehd acesso nov. 2020 14 17/12/2020 15 Coleta de sangue venoso Venopunção Veia é puncionada com uma agulha e o sangue é coletado para uma seringa ou tubo à vácuo. Sistema aberto; Sistema fechado. Fonte: https://binged.it/37qeFgR acesso nov. 2020 Fonte: OLIVEIRA, R.B. Líquidos biológicos. 1.ed. Paraná: Londrina, 2017 (pág. 18). 15 17/12/2020 16 Amostras de sangue: Análises e correlações clínicas 16 17/12/2020 17 Tubos de coleta Hemocultura: pesquisa de bacteremia; Citrato de sódio: exames de coagulação (TT, TTPA, TP), fibrinogênio; Vermelho e/ou Amarelo: tubo sem aditivo exames sorológicos, bioquímicos e hormonais: - Ex: ácido úrico, ácido fólico, ácido valpróico, amilase, anticorpos anti-HIV, bilirrubina total e frações, cálcio, cloreto, perfil lipídico, cortisol, creatinina, CK-MB, CK total, LDH, estradiol, ferritina, ferro sérico, fosfatase alcalina, GH, imunoglobulinas....... Heparina de lítio/ sódio: Pb, Na, K, gasometria; EDTA (EtilenoDiaminoTetrAcético): hematologia, carga viral (HIV), CD4+/CD8+, genotipagem e citologia; Fluoreto de sódio/EDTA: glicose e lactato. Fonte: https://binged.it/3lse6YG acesso nov.2020 Fonte: https://binged.it/39wPYBQ acesso nov. 2020 17 17/12/2020 18 Análises laboratoriais: Amostra plasma Glicose: dosagem de glicemia Diabetes mellitus- doença metabólica crônica nível de glicose (hiperglicemia); - Ação hipoglicemiante (insulina), ação hiperglicemiante (glucagon, adrenalina); TP e TTPA: avaliar os fatores de coagulação (coagulograma) teste de coagulação, Tempo de Protrombina (TP), Tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), dosagem de fibrinogênio: - TP: avalia via extrínseca e a via comum (fatores VII, X, V e II) e o fibrinogênio estará aumentado: deficiência dos fatores VII, X, V, II e o fibrinogênio, em pacientes que usam anticoagulantes, nas doenças hepáticas e deficiência de vit.K.; - TTPA: avalia a via intrínseca (XII, XI, IX e VII) e via comum (X, V, II e fibrinogênio) estará aumentado: hemofilia A e B, doenças hepáticas, uso de anticoagulante, deficiência de vit. K. 18 17/12/2020 19 Análises laboratoriais: Sangue total Hemograma: aspectos qualitativos e quantitativos dos eritrócitos, leucócitos e plaquetas: - Eritrograma: exames da série vermelha do sangue periférico ( Contagem de Hemácias (He), dosagem de hemoglobina (Hb), hematócrito (Ht), índices hematimétricos (VCM, HCM e CHCM, RDW), avaliação morfológica dos eritrócitos; - Leucograma: exames da série branca do sangue periférico ( Contagem global e diferencial de leucócitos, análise das alterações morfológicas do sangue); - Plaquetograma: contagem total de plaquetas, avaliação da morfologia. Fonte: ROSS, M.H.; PAWLINA, W. Ross Histologia- Texto e atlas. 7. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2016 (pág. 276). 19 17/12/2020 20 Fatores que podem interferir nos resultados dos exames laboratoriais? Hemólise: Liberação dos constituintes intracelulares para o plasma ou soro quando ocorre ruptura das células do sangue: Fatores que propiciam: tapinhas, calor ou frio, garroteamento prolongado, agulhas finas, inserir agulha da seringa na tampa dos tubos. Lipemia: Grande quantidade de lipídios no sangue Fatores que causam: ausência de jejum para realização da análise - Exames que utilizam metodologias colorimétricas ou turbidimétricas. Diferentes graus de hemólise Fonte: https://binged.it/2JdKBwT acesso nov. 2020 Lipemia Fonte: https://binged.it/3fW0mo6 acesso nov. 2020 20 17/12/2020 21 Exames laboratoriais 21 17/12/2020 22Quais são as implicações da anamnese incompleta para os exames solicitados? O que o garroteamento por mais de um minuto pode acarretar nos resultados laboratoriais? A ordem dos tubos utilizadas por Ana Luíza está correta? A troca na ordem dos tubos pode trazer algum problema para as análises? A antissepsia foi feita de forma correta? Ana Luiza começou a trabalhar recentemente em um LAC e não tinha muita experiência com coleta de material biológico. Para iniciar a coleta de sangue venoso Ana Luiza realizou a anamnese na paciente e se esqueceu de perguntar se a paciente praticava exercícios físicos e como havia sido a sua alimentação nos dias anteriores à coleta. Ana Luiza não trocou as luvas que usou no paciente anterior, garroteou o braço direito de Joice para analisar o local que faria a punção e ficou com o garrote por mais de cinco minutos. Verificou os exames solicitados e separou os tubos na seguinte ordem um roxo, dois vermelhos, dois azuis. Fez a assepsia do local de cima para baixo e conseguiu puncionar a veia basílica mediana direita de Joice com sucesso, após cada coleta homogeneizou os tubos. 22 17/12/2020 23 Anamnese: questionar se o paciente cumpriu as exigências necessárias para a realização do exame. Faz a prática de atividades físicas? É fumante? Realizou o jejum solicitado para o exame? Faz o uso de medicação de rotina? Qual a data da última menstruação? 23 17/12/2020 24 COLETA DE SANGUE VENOSO Fonte: https://binged.it/34i0G92 acesso nov. 2020.Antissepsia: local da punção deve ser limpo com álcool 70% e gaze ou algodão estéril em movimentos circulares do centro para fora ou de baixo para cima (sentido do cotovelo ao bíceps) Garroteamento: O garrote não pode ser deixado apertado por mais de 1 a 2 minutos, pois pode provocar a hemólise ou hemoconcentração da amostra. Fonte: https://binged.it/2JdKBwT acesso nov. 2020 24 17/12/2020 25 SEQUÊNCIA CORRETA DOS TUBOS 25 17/12/2020 26 Amostras de soro: Análises e correlações clínicas 26 17/12/2020 27 Analises laboratoriais: Amostra Soro Perfil lipídico: dosagem de CT, HDL-c, TG e cálculo da estimativa do VLDL-c e do LDL-c; Lipoproteínas: transportam todo o colesterol e os lipídios esterificados o sangue (4 classes separadas em 2 grupos) - Ricas em TGmaiores e menos densas (Quilomícrons e VLDL- lipoproteína de densidade muito baixa); - Ricas em colesterol: LDL (lipoproteína de baixa densidade) e HDL (lipoproteína de alta densidade); - Auxilia no diagnóstico de dislipidemia, risco de doenças cardiovasculares e aterosclerose. Fonte: Lacerda, Resende (2014) disponível em: https://bit.ly/2JgS7qO acesso nov. 2020 27 17/12/2020 28 Ácido úrico: produto final do metabolismo das purinas diagnóstico de gota (aumento de ácido úrico e acúmulo de cristais de monourato de sódio nas articulações; Ureia: catabolismo das proteínas (principal forma de excreção de N2) formada no fígado através de grupos NH2 liberados pela desaminação dos aa avaliação da função renal - Valores plasmáticos: sofrem influência da dieta, desidratação, aumento no catabolismo proteico, hemorragia gastrointestinal; Creatinina: proveniente do catabolismo do fosfato de creatina da contração muscular (a quantidade produzida é proporcional à massa muscular) avaliação da função renal; - Produzida em uma taxa cte e os níveis plasmáticos se mantêm em uma faixa estreita clearance de creatinina (indicador da taxa de filtração glomerular); - Se eleva mais tardiamente e tem maior valor prognóstico. 28 17/12/2020 29 Proteínas plasmáticas: presentes nos fluídos corporais e exercem muitas funções fisiológicas: transporte, imunidade, manutenção da PO, enzimas, tampões, inibidores de protease; - Albumina: proteína + abundante no plasma produzida no fígado HIPOALBUMINEMIA (diminuição da albumina). TGO (AST) e TGP (ALT): aminotransferases, isoenzimas que estão no interior das células indicadoras sensíveis de dano hepático principalmente em lesão aguda (hepatite aguda): TGO: distribuída nos tecidos orgânicos (coração, fígado, músculos esqueléticos e rins); - Muito menos específica para lesão hepática; - Elevada em doenças cardíacas: infarto do miocárdio TGP: encontrada principalmente no fígado; - Mais específica para lesão hepática; - Nas lesões hepáticas ambas se elevam (sendo que TGP > TGO se a lesão for puramente hepática) 29 17/12/2020 30 CK-total: creatina fosfoquinase está presente em grandes [ ] tecido muscular estriado esquelético e cardíaco e no tecido cerebral; - Útil no diagnóstico do infarto do miocárdio ( aumento precoce de 4 a 6 horas após); - CK-MB: fração específica do músculo cardíaco (aparece de 4 a 8 hras após a dor do infarto e atinge um pico em 24 hras); Na+: eletrólito que constitui o líquido extracelular hiponatremia ou hipernatremia (desidratação, desequilíbrios eletrolíticos); K +: hipocalemia ou hipercalemia; Ca 2+: hipocalcemia ou hipercalcemia; P -: hipofosfatemia ou hiperfosfatemia; 30 17/12/2020 31 Regulação da função tireoidiana (T3, T4 e TSH): Hipotálamo Hormônio Liberador do TSH (TRH) Hipófise TSH Tiroxina (T4) e Triiodotironina (T3) Aumenta o metabolismo Tireoide: • Produção de T3 (forma mais ativa) e T4; • T4 T3 (ao perder um I) • Iodo (I) limitante para produção de T4T3 • Função do T4T3: aumentar o metabolismo celular • Controlado pelo TRH e TSH; • Feedback negativo de T3 e T4; Hipotireoidismo Hipertireoidismo Produção de T4T3 31 17/12/2020 32 Análise do fluído salivar 32 17/12/2020 33 Glândulas salivares Compõem alguns dos órgãos anexos do sistema digestório; Grupo de glândulas exócrinas situadas adjacentes à cavidade oral seus ductos se abrem interiormente; Liberam saliva na cavidade oral; Glândulas são formadas por elementos parenquimatosos revestidos e sustentados por tecido conjuntivo o parênquima é formado pelos ácinos e um sistema de ductos; Maior parte da saliva é secretada pelas glândulas salivares maiores ( glândulas parótidas, submandibulares e sublinguais). Fonte: OLIVEIRA, R.B. Líquidos biológicos. 1.ed. Paraná: Londrina, 2017 (pág. 36). 33 17/12/2020 34 Saliva São produzidas 2 tipos de saliva: secreção serosa (alfa amilase salivar) e secreção mucosa (lubrificação e proteção da cavidade bucal); Glândulas parótidas: secreção serosa; Glândulas submandibulares: 2 tipos; Glândulas sublinguais: apenas a secreção mucosa; Salivação ocorre o tempo todo: em situações basais produzidas em respostas a estímulos mecânicos, gustatórios, olfatórios e farmacológicos (Indivíduos saudáveis produzem de 0,4 a 0,5 mL/min. em situações basais e estimulada de 1 a 3 mL/min.) Processo controlado pelo SN; Colabora na proteção dos tecidos da boca controle do crescimento de bactérias (infecções orais, cáries dentárias e úlceras. 34 17/12/2020 35 Saliva Fluído transparente aquoso e hipotônico: 99 % H2O e 1% mol. orgânicas (proteínas imunológicas) e mol. inorgânicas ( Cl-, Na+, K+, Ca²+, PO4 3-, I-, F-), subst. das secreções glandulares, fluídos gengivais, cels. epiteliais, leucócitos, eritrócitos, m.o e resíduos alimentares. Funções: Proteção dos tecidos orais e peri-orais; Facilitar a fala e o ato de comer; Controle hídrico corporal. Fonte: https://binged.it/37nhpeN acesso nov. 2020 35 17/12/2020 36 Análise salivar Níveis de drogas; Hormônios; Moléculas imunológicas; Fonte: OLIVEIRA, R.B. Líquidos biológicos. 1.ed. Paraná: Londrina, 2017 (pág. 39). 36 17/12/2020 37 Métodos de coleta da saliva Expectoração ou “método do cuspe”; Sucção aberta; Sucção fechada; Drenagem; Papel de filtro; Cones endodônticos de papel absorvente; Esfregaço; “Salivette” “Eyespears”; “Ultrafiltration Probe” Fonte: https://binged.it/3mo8Eay acesso nov. 2020 37 17/12/2020 38 Dosagens na saliva 38 17/12/2020 39 Análises na saliva Teste de DNA (paternidade); Drogas de abuso; Teste rápido vírus HIV-1 e HIV-2; Epstein-Barr (EBV); Zika vírus; Análise de DNA com interesse forense; Detecção de fragmentos solúveis de oncogenes; Infecção por Helicobacter pylori; Intolerâncias alimentares e alergias (intolerância a lactose); Dosagens hormonais. 39 17/12/2020 40 Dosagens hormonais na saliva Cortisol: glicocorticoide sintetizado a partir do colesterol (produção estimulada pelo hormônio adrenocorticotrópico (ACTH) no córtex adrenal controlada pelo fator de liberação de corticotropina (CRF); Coleta: antes das 10:00 da manhã e preferencialmente às 08:00 Variação do ritmo circadiano; Níveis : Doença de Cushing, tumores nas glândulas suprarrenais e após 2hras de exercício físico intenso; Níveis : doença de Addison e deficiência de ACTH; Interferentes: medicamentos Prednisona e dexametasona. Fonte: https://binged.it/2JwqGci acesso nov. 2020 40 17/12/2020 41 Estrona (E1): hormônio estrogênico e um dos principais circulantes após a menopausa. Avalia o hipogonadismo, puberdade precoce (completa ou parcial), diagnóstico de tumores feminilizantes e acompanhamento de mulheres que fazem reposição hormonal na menopausa; Estradiol (E2) ou 17-Beta Estradiol- E2: principal estrogênio produzido nos ovários e testículos e em pequenas quantidades são produzidos na glândula adrenal e em alguns tecidos. Avalia a fertilidade, irregularidade menstrual, investigação de ginecomastia e para avaliação do desenvolvimento folicular. - Níveis baixos: hipogonadismo 1º e 2º; - Níveis elevados: tumores ovarianos, terapia androgênica, reposição estrogênica, puberdade precoce feminina, hipertireoidismo. Dosagens hormonais na saliva 41 17/12/2020 42 Estriol (E3): estrógeno mais importante durante a gestação e tem origem feto-placentária. Avalia o risco fetal. - Níveis baixos: hipertensão gestacional, gestações de fetos pequenos para a idade gestacional, anormalidades fetais cromossômicas, perdas fetais, casos de anencefalia; Progesterona (P4): produzido pelo corpo lúteo em consequência da ovulação e sua funcionalidade. Utilizado para acompanhar desordens no 1º trimestre de gestação e infertilidade. - Níveis aumentados: durante a fase lútea do ciclo ovariano, indicando a ovulação e nas 1ªs semanas de gestação; - Níveis diminuídos: casos de amenorreia. Testosterona: andrógeno mais abundante. : desenvolvimento das genitálias e características sexuais 1ª e 2ª e precursor estrogênico. 42 17/12/2020 43 Exame laboratorial 43 17/12/2020 44 Jovem de 25 anos, comparece ao nutricionista pois realiza atividades de musculação e pretende aumentar sua massa muscular. Durante a consulta o nutricionista solicita diversos exames laboratoriais como: hemograma completo, dosagens de: creatinina, ácido úrico, glicemia de jejum, lipidograma completo, TGO e TGP, ureia, estradiol E2, FSH, LH, Triiodotironina (T3) e Tiroxina (T4). O jovem se esqueceu que no dia seguinte iria realizar a coleta dos exames e acabou fazendo um churrasco com os amigos e ingeriu uma grande quantidade de álcool. Após a análise dos exames laboratoriais verificou-se uma alteração nos níveis de TGO e TGP. Oque pode ter levado a essa alteração? Em qual etapa do exame laboratorial pode ter ocorrido a falha para gerar essa alteração? 44 17/12/2020 45 Fonte: autora 45 17/12/2020 46 Fase pré-analítica: Fase que se inicia com a solicitação da análise, passando pela obtenção da amostra e finda ao se iniciar a análise propriamente dita. Recepção. Indicação e solicitação de exames. Anamnese e preparo do paciente. Coleta, acondicionamento, transporte e preservação de amostras. Anamnese do paciente: Realizou o jejum solicitado para o exame???? Jejum e a dieta em semanas anteriores à coleta podem interferir na dosagem de perfil lipídico e outras dosagens bioquímicas. 46 17/12/2020 47 Recapitulando...... Etapas do exame laboratorial; Soro e plasma; Amostras de sangue: Análises e correlações clínicas; Amostras de soro: Análises e correlações clínicas; Análise do fluido salivar; Dosagens na saliva. 47 17/12/2020 48 48
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