5 - Células LE (Lúpus)

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5º Curso de pós-graduação lato sensu em 
Hematologia Clínica e Laboratorial
Universidade Federal de Pernambuco
Centro de Biociências
Pesquisa de Células LE
MARCOS ANDRÉ CAVALCANTI BEZERRA
Universidade Federal de Pernambuco
Centro de Biociências
Prof° Associado II da UFPE / Pesquisador HEMOPE
Centro de Biociências
LÚPUS ERITEMATOSO SISTÊMICO
•Doença auto imune de etiologia desconhecida, cuja alteração
primária é a inflamação e a degeneração do colágeno
(colagenoses).
•Pode manifestar-se em sua forma cutânea ou em sua forma
sistêmica que acomete várias regiões do organismo como as
articulações, pleura, cabelos, rins, SNC, etc.
•Também podemos ter o Lúpus induzido por drogas com
sintomatologia similar a forma sistêmica. Drogas envolvidas:
•procainamida
•hidralazina
•izoniazida
•clorpromazina
•alfa-metil-dopa
•contraceptivos
LÚPUS ERITEMATOSO SISTÊMICO
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LÚPUS ERITEMATOSO SISTÊMICO
•O fenômeno LE ou célula LE foi descrito por Hargraves, em
1948, sendo, por muitos anos, utilizado como um marcador
sorológico para o diagnóstico do lúpus eritematoso sistêmico
(LES).
•No entanto, a técnica é de baixa sensibilidade e especificidade,
trabalhosa, demorada e de interpretação subjetiva. Estes fatores
contribuíram para que o teste torna-se obsoleto.
•Hoje, a pesquisa de auto anticorpos antinucleares (FAN) no
soro do paciente, utilizando-se as técnicas de ELISA e
imunofluorescência indireta, aumentou a sensibilidade
diagnóstica não apenas para o LES bem como para outras
doenças auto-imunes, que acometem o tecido conjuntivo
(esclerose sistêmica, dermatomiosite, doença mista do tecido
conjuntivo [DMTC], entre outras).
FORMAÇÃO DA CÉLULA LE
•Autoanticorpos IgG interagem com proteínas nucleares e/ou
o dsDNA nos leucócitos;
•O leucócito é destruído e o material nuclear é fagocitado
predominantemente por neutrófilos e ocasionalmente por
monócitos;
•O material nuclear fagocitado, em geral, ocupa quase todo
citoplasma da célula fagocitária, fazendo com que o núcleo do
fagócito fique localizado na periferia junto a membrana
celular, cujo conjunto caracteriza a célula LE;
•Pode acontecer o englobamento de mais de um núcleo pelo
fagócito.
•Células LE são fagócitos que
contêm corpos de hematoxilina
intra-citoplasmáticos.
•Pensa-se que os corpos de
hematoxilina sejam formados pela
opsonização das células por auto-
anticorpos tipicamente encontrados
em pacientes com LES.
• Esses anticorpos levam à
desnaturação de células lesadas ou
mortas, formando corpúsculos de
formas ovais, que são chamados de
“corpos hematoxilínicos”, pois são
corados com o Wright-Giemsa,
Papanicolaou, hematoxilina e
eosina.
•Os corpúsculos de hematoxilina
são fagocitados por neutrófilos,
criando células LE.
FORMAÇÃO DA CÉLULA LE
TESTE CITOMORFOLÓGICO PARA CÉLULA LE
•Consiste em incubar os leucócitos com o soro suspeito de conter o FAN (fator anti-
nuclear).
•Baseia-se na reação entre os auto-anticorpos do soro do paciente e antígenos
nucleares dos seus próprios leucócitos, durante conservação in vitro, com
subsequente fagocitose por neutrófilos.
MATERIAIS
I. Material para punção venosa
2. Tubos sem anticoagulante para acondicionar o sangue
3. Tubos de hematócrito (Wintrobe)
4. Banho-macia a 37°c
5. Centrífuga
6. Lâminas para microscopia
7. Corantes de May-Grünwald eGiemsa ou Wright
8. Óleo para microscopia
9. Microscópio.
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PROCEDIMENTO
•Coletar 8ml de sangue em tubo sem anticoagulante (o tubo não pode
conter gel)
•Deixar coagular e incubar a 37°C por 30 minutos.
•Fragmentar o coágulo com um bastão de vidro e filtrar o material em
gaze (Tamização).
•Centrifugar o filtrado a 2.000 rpm durante 5 minutos.
•Aspirar o soro sobrenadante.
•O material restante é colocado em tubos de Wintrobe e centrifugado a
2.000 rpm - 5 minutos
•Desprezar o sobrenadante e realizar os estiraços com a porção celular,
especialmente os leucócitos.
•Corar pelo May Grünwald Giemsa
•Pesquisar a célula LE através de microscópio.
Labcen 2012
Labcen 2012 Labcen 2012
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RESULTADO
•O Teste de LE pode apresentar-se sob forma de corpos nucleares homogêneos e
livres, células LE (neutrófilos contendo inclusões citoplasmáticas violáceas,
homogêneas amorfas e rosetas (grupos de neutrófilos englobando material nuclear
amorfo).