01 Pos Teste - Preparo de Esfregaco e Coloracao de Gram

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Pós Teste  Preparo de Esfregaço e Coloração de Gram 1
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Pós Teste - Preparo de Esfregaço e 
Coloração de Gram
1. A coloração de Gram diferencia as bactérias pelas propriedades químicas e físicas de 
suas paredes celulares. As bactérias Gram-positivas têm uma camada espessa de 
peptideoglicano na parede celular que retém a coloração primária (cristal violeta). As 
bactérias Gram-negativas têm uma camada mais fina de peptideoglicano que permite que 
o cristal violeta seja removido com a adição de etanol.
Com base na sua aprendizagem prática no laboratório virtual, assine a alternativa que 
responda corretamente qual etapa deve ser realizada antes da adição do etanol.
A. Após a coloração com cristal violeta, a próxima etapa é a adição de lugol com a 
função de se ligar ao cristal violeta, aumentando sua afinidade pela parede celular e 
formando um complexo insolúvel (CV-I);
O lugol age como mordente e agente de aprisionamento, para reter o corante na parede 
celular bacteriana por meio da formação de um complexo formado entre cristal violeta e 
iodo.
B. A adição do lugol após a primeira coloração é importante para formar um complexo 
insolúvel (CV-I) e aprisioná-lo na parede celular de bactérias Gram-positivas e Gram-
negativas. No entanto, apenas as bactérias Gram-positivas permanecem com a coloração 
roxa/violeta;
C. Logo após a coloração com cristal violeta, utiliza-se o álcool. O álcool age diluindo a 
membrana lipídica externa de bactérias Gram-negativas, permitindo que a coloração 
roxa/violeta seja perdida e que apenas as Gram-positivas apresentem essa cor.
Logo após a coloração com cristal violeta, utiliza-se o lugol. Apenas depois que é utilizado o 
álcool.
2. Você foi responsável por analisar, por meio da metodologia de Gram, duas amostras 
recebidas no laboratório. Logo após a realização dos procedimentos, você observou as 
seguintes imagens:
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De acordo com seu conhecimento adquirido por meio do laboratório virtual, marque a 
alternativa que representa o seu diagnóstico preliminar desse teste.
A. A primeira imagem representa, com certeza, a presença de S. aureus, uma vez que ela é 
Gram-positiva e está corretamente corada em roxo/violeta por meio do cristal violeta;
B. A imagem corada em roxo/violeta representa a presença de bactérias Gram-positivas na 
amostra analisada. Por sua vez, a imagem corada em vermelho/rosa representa a presença fiel 
da bactéria E. coli, pertencente ao grupo das bactérias Gram-negativas;
Em um diagnóstico preliminar, não se pode garantir a presença de uma linhagem específica 
utilizando-se apenas a metodologia de Gram.
C. As amostras recebidas em laboratório passaram por quatro etapas – coloração 
primária, adição de lugol, descoloração com álcool e contracoloração – até se chegar à 
obtenção dessas imagens. A cor roxa/violeta representa a presença de bactérias Gram-
positivas na amostra, enquanto a cor vermelha/rosa representa a presença de bactérias 
Gram-negativas.
Após as quatro etapas da coloração de Gram, o diagnóstico preliminar obtido é de que a cor 
roxa/ violeta representa o grupo de bactérias Gram-positivas, e a cor vermelha/ rosa, Gram-
negativas.
3. Antes de utilizar os reagentes para a metodologia de Gram com a finalidade de corar as 
bactérias, há a necessidade de primeiro fixar a amostra por meio do calor. Esse 
procedimento é realizado passando a lâmina por cima da chama azul em um bico de 
Bunsen algumas vezes.
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No laboratório virtual você realizou esse procedimento. Mas, afinal, por que você faz 
isso?
A. Para que ocorra alteração na morfologia bacteriana;
Esta opção está incorreta porque o objetivo não é alterar a morfologia bacteriana, mas sim 
fixar as bactérias à lâmina para evitar que sejam eliminadas durante as etapas de coloração. 
O processo de fixação pelo calor não deve causar alterações significativas na morfologia das 
bactérias.
B. Para que a bactéria reaja à coloração com mais facilidade;
Essa opção também está incorreta. A fixação pelo calor não tem como objetivo fazer com que 
as bactérias reajam à coloração com mais facilidade. A fixação é apenas para garantir que 
as bactérias permaneçam aderidas à lâmina durante todo o processo de coloração, não 
afetando diretamente a reação das bactérias à coloração.
C. Para que as bactérias não sejam eliminadas durante as etapas de coloração.
Ao passar a lâmina por cima da chama azul em um bico de Bunsen, o objetivo é fixar as 
bactérias à lâmina. Isso evita que elas se soltem ou sejam eliminadas durante as etapas 
subsequentes de coloração, permitindo uma análise mais precisa e confiável. O calor age 
coagulando as proteínas presentes nas bactérias, tornando-as aderentes à lâmina de vidro.
4. A coloração de Gram apresenta diversas etapas, que se iniciam com o esfregaço. Após a 
amostra estar fixada na lâmina, iniciam-se as etapas de coloração primária, adição de 
lugol, descoloração e contracoloração. Todo o procedimento é finalizado com a 
visualização da lâmina com o auxílio de um microscópio óptico.
No experimento realizado no laboratório virtual, você percorreu todas as etapas. Levando 
em consideração o seu conhecimento prático e teórico adquirido, qual etapa é crucial na 
coloração de Gram?
A. O esfregaço bacteriano;
O esfregaço é a primeira etapa; se não for realizado de forma correta, não terá como 
realizar as demais etapas e obter um diagnóstico preliminar correto.
B. A adição do lugol;
A adição de lugol é extremamente importante, mas apenas poderá ser realizada caso já se 
tenha feito o esfregaço e a coloração primária com o cristal violeta.
C. A coloração primária com cristal violeta.
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5. Cada reagente utilizado na coloração de Gram apresenta uma função definida. O cristal 
violeta age como um corante primário, corando todas as bactérias. O iodo (presente no 
lugol) age formando um complexo com o cristal violeta, prendendo-o no interior das 
bactérias. O álcool age diluindo a membrana lipídica de bactérias Gram-negativas, 
liberando o cristal violeta para fora delas. A contracoloração com safranina age corando 
as bactérias Gram-negativas de vermelho/rosa.
Após a realização desse procedimento experimental no laboratório virtual, qual a função 
do mordente na reação de Gram?
A. Fixar o corante primário (cristal violeta) na parede celular de bactérias Gram-
positivas e Gram-negativas;
O lugol age como um agente mordente e aprisionador. Isso ocorre com a formação de um 
complexo insolúvel entre iodo e crista violeta, ficando retido na parede celular das bactérias.
B. Fixar o contracorante safranina nas bactérias Gram-negativas;
A safranina fixa-se na parede das bactérias Gram-negativas sem a presença/ necessidade de 
um agente mordente.
C. O agente mordente é o álcool, o qual promove a remoção do corante primário de bactérias 
Gram-negativas pela diluição da membrana lipídica externa. Por sua vez, não promove a 
remoção do corante primário de bactérias Gram-positivas.
Embora o álcool promova a descoloração de bactérias Gram-negativas, e não de Gram-
positivas, ele não é considerado um agente mordente, e sim um agente descolorante.