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Métodos de Controle Microbiano Eliminar??? Reduzir ???? C o n tr o le d e M ic ro - o rg an is m o s Esterilização: morte ou remoção de todas as formas viáveis de micro-organismos Desinfecção: eliminação ou redução de formas vegetativas Padrão de Morte Microbiana Padrão de Morte Microbiana Padrão de Morte Microbiana • Quando as populações bacterianas são submetidas à tratamento de controle (físico ou químico), elas são geralmente eliminadas em uma taxa constante Cinética da Inativação Microbiana • Quando uma população homogênea de micro-organismos é exposta a processo letal, a perda de viabilidade ocorre de maneira regular, sendo a velocidade de inativação diretamente proporcional ao seu número, em cada tempo determinado. Fatores que interferem no padrão de morte microbiana • Tamanho da população • Concentração ou intensidade do agente So b re vi ve n te s/ m L Escherichia coli exposta a várias concentrações de fenol a 35°C. Fatores que interferem no padrão de morte microbiana • Temperatura Escherichia coli exposta ao fenol (4,62g/L) em temperaturas de30 a 42°C Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Natureza da população microbiana Biofilmes Tempo de exposição ao agente Condições ambientais Mecanismo de ação dos agentes de controle microbiano Membrana Ácidos nucleicos e enzimas Métodos de Controle Microbiano FÍSICOS QUÍMICOS Calor Radiação Filtração Pressão Osmótica Desinfetantes Antissépticos Antimicrobianos In vivo Seleção de Método de Controle Objetivo: esterilização??? redução de micro- organismos?? Natureza do material: alimentos, medicamentos, vitaminas, instrumentos cirúrgicos, salas Terminologia Métodos Físicos de Controle de Micro- organismos Calor Ponto de Morte Térmica Temperatura mais baixa que elimina todos os micro-organismos de uma amostra em 10 minutos. Tempo de Morte Térmica Menor tempo que mata todos os micro-organismos em uma amostra a uma determinada temperatura. Tempo de Redução Decimal Tempo em minutos no qual uma população microbiana é reduzida em 90% em uma temperatura determinada. Ponto de morte térmica 50°C 65°C 90°C 100°C 120°C Tempo de morte térmica 1mim 5mim 10mim 15mim 120°C 20mim Tempo de Redução Decimal (Valor D) Tempo de Redução Decimal Micro-organismo Temperatura (°C) Valor D (min.) Mesofílicos 65,5 0,1-2,0 Endósporos de mesófilos aeróbios 100 0,1-11 Endósporos de mesófilos anaeróbios 100 0,1-20 Endósporos de termófilos aeróbios 120 0,1-5,0 Endósporos de termófilos anaeróbios 120 2,0 – 4,0 Métodos Físicos - Calor Úmido • Desnaturação de proteínas • Alto poder de penetração Seco • Oxidação Calor Úmido Método Mecanismo de Ação Observações Utilização Preferencial Fervura (100°C) Desnaturação de Proteínas (oxidação) Não eficaz para eliminação de endósporos Caseira Autoclavação (aquecimento sob pressão) Desnaturação de Proteínas (coagulação) Método de maior eficácia Laboratorial, Hospitalar Pasteurização Desnaturação de Proteínas Mata bactérias patogênicas do leite. Reduz o n° de todos os micro- organismos Alimentos Autoclavação Autoclavação Autoclavação • Ideal para: meios de cultura, instrumentos, vestimentas, equipamentos intravenosos, soluções, seringas, equipamentos de transfusão • Para que ocorra a esterilização o vapor deve entrar em contato com toda a superfície (recipientes vazios podem aprisionar ar frio em seu interior) Indicadores de esterilização: autoclavação Pasteurização 72°C – 15 seg Calor Seco Método Mecanismo de Ação Utilização Preferencial Flambagem Oxidação do material até a formação de cinzas Alça e Fio de Platina Incineração Oxidação do material até a formação de cinzas Carcaças de animais, lixo hospitalar Fornos Oxidação Vidraria e materiais resistentes à temperatura Filtração • Remoção mecânica de micro-organismos • Utilizado em soluções, líquidos e gases termo- lábeis • A seleção do filtro depende do contaminante Filtro HEPA (high-efficiency particulate air) Membrana Filtrante Polímeros que suportam altas pressões Radiação Ionizante Não - Ionizante Radiação Tipo Mecanismo de Ação Observações Uso preferencial Ionizante Formação de radicais reativos Método eficaz de custo elevado Produtos cirúrgicos Não ionizante Alteração no DNA – Dímeros de Timina Baixo poder de penetração Lâmpadas germicidas Radiação D10, ou dose de redução decimal (Gy) Produtos médicos e laboratoriais esterilizados por radiação Métodos Químicos de Controle Microbiano Agentes Químicos de Controle Microbiano • Esterilizantes: Destroem todas as formas viáveis de micro-organismos • Desinfetantes: Matam formas vegetativas e são utilizados em objetos inanimados • Sanitizantes: Reduzem o número de micro- organismos a níveis seguros • Antissépticos e germicidas: Matam ou reduzem o número de micro-organismos e são utilizados em tecidos vivos Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Célula totais: visualizadas ao microscópio Células viáveis: aquelas com capacidade de se dividir (ou crescer) Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Célula totais: visualizadas ao microscópio Células viáveis: aquelas com capacidade de se dividir (ou crescer) Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Célula totais: visualizadas ao microscópio Células viáveis: aquelas com capacidade de se dividir (ou crescer) Fatores que interferem na eficiência • Concentração • Temperatura • Matéria orgânica • Biofilmes • População microbiana Avaliação da eficiência de um Agente Químico de Controle Microbiano • CIM: Concentração Inibitória Mínima • Método de Disco-Difusão • Métodos de Disco-Difusão Antissépticos Etanol Metais pesados • Ação oligodinâmica Câmara de esterilização – Óxido de Etileno Armazenamento do gás: ambiente separado Slide 1: Métodos de Controle Microbiano Slide 2 Slide 3: Controle de Micro-organismos Slide 4 Slide 5 Slide 6: Padrão de Morte Microbiana Slide 7: Padrão de Morte Microbiana Slide 8: Padrão de Morte Microbiana Slide 9: Cinética da Inativação Microbiana Slide 10 Slide 11: Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Slide 12: Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Slide 13: Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Slide 14: Fatores que interferem no padrão de morte microbiana Slide 15: Mecanismo de ação dos agentes de controle microbiano Slide 16: Métodos de Controle Microbiano Slide 17: Seleção de Método de Controle Slide 18: Terminologia Slide 19: Métodos Físicos de Controle de Micro-organismos Slide 20: Calor Slide 21: Ponto de morte térmica Slide 22: Tempo de morte térmica Slide 23: Tempo de Redução Decimal (Valor D) Slide 24: Tempo de Redução Decimal Slide 25: Métodos Físicos - Calor Slide 26: Calor Úmido Slide 27: Autoclavação Slide 28 Slide 29 Slide 30 Slide 31 Slide 32 Slide 33 Slide 34: Autoclavação Slide 35 Slide 36: Autoclavação Slide 37: Indicadores de esterilização: autoclavação Slide 38: Pasteurização Slide 39 Slide 40: Calor Seco Slide 41: Filtração Slide 42 Slide 43: Filtro HEPA (high-efficiency particulate air) Slide 44: Membrana Filtrante Slide 45: Radiação Slide 46: Radiação Slide 47 Slide 48: Radiação Slide 49 Slide 50: Produtos médicos e laboratoriais esterilizados por radiação Slide 51: Métodos Químicos de Controle Microbiano Slide 52: Agentes Químicos de Controle Microbiano Slide 53: Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Slide 54: Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Slide 55: Efeitos dos agentes químicos de controle na célula bacteriana Slide 56: Fatores que interferem na eficiência Slide57: Avaliação da eficiência de um Agente Químico de Controle Microbiano Slide 58 Slide 59 Slide 60 Slide 61: Antissépticos Slide 62: Etanol Slide 63 Slide 64: Metais pesados Slide 65: Câmara de esterilização – Óxido de Etileno Slide 66 Slide 67 Slide 68 Slide 69 Slide 70 Slide 71