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Citometria de fluxo Dra. Giselle Fagundes giselle.fagundes@unigranrio.edu.br 2 Prof. Dr. Paulo Cirino de Carvalho Filho 3 CITÔMETRO DE FLUXO 4 CITOMETRIA DE FLUXO 5 A citometria pode ser utilizada para separar as células 6 7 Representação gráfica 1. Histogramas 8 Representação gráfica 2. Plots A) Dot Plot 9 Representação gráfica 2. Plots A) Dot Plot 10 Representação gráfica 2. Plots B) Countour plot e Density plots “ 11 Citoplasma “ 12 13 14 Side scatter Forward scatter 15 FSC x SSC Volume celular 16 17 Intensidade de Fluorescência 18 Cluster de diferenciação (CD) Estágios de maturação das células B com exemplos de marcadores imunofenotípicos expressos no desenvolvimento normal destas células 19 Etapas da citometria de fluxo 20 Aplicações da citometria de fluxo 21 Aplicações da citometria de fluxo 22 Aplicações da citometria de fluxo Viabilidade Celular 23 Aplicações da citometria de fluxo Detecção de cistos de Giardia lamblia em água e fezes 24 Aplicações da citometria de fluxo Interação patógeno-hospedeiro Monócitos humanos infectados in vitro pelo vírus da Dengue-2 Detecção da interação entre macrófagos e L. amazonensis Citometria de Fluxo – Carvalho; Ferraz; Ribeiro & Bertho 25 Responda.... A imagem demonstra um gráfico obtido através da citometria de fluxo, que permite a quantificação de linfócitos TCD4 e TCD8. 1) Em qual quadrante existem células só CD4+? 2) Em qual quadrante existem células só CD8+? 3) Em qual quadrante existem células CD4+CD8+? 4) Em qual quadrante existem células CD4-CD8-? 26 27 TESTE SURPRESA 28 Um paciente, VFF, 34 anos, branco, cólicas abdominais, urina escura e icterícia. VFF observou o surgimento de uma lesão na sua genitália cerca de vinte dias após uma relação sexual desprotegida. Assim, 5 dias após o aparecimento da lesão, VFF procurou atendimento médico. Diante do ocorrido, o médico solicitou que fossem realizados o FTA-ABS e o VDRL. Os resultados foram os seguintes : FTA-ABS negativos, VDRL : ½ (VR: acima de ¼). O diagnóstico de sífilis não foi confirmado e o paciente voltou pra casa com alguns medicamentos para tratar a injúria no pênis. Dois meses depois, o mesmo paciente retornou ao consultório com manifestações como essa ao lado. Foi repetido o FTA-ABS e o VDRL e surpreendentemente observou-se um FTA-ABS positivo e um VDRL de 1/1064. A) Por que o diagnóstico de sífilis não aconteceu na primeira consulta? (0,5 ponto) B) Além de uma possível sífilis, o médico observou que o paciente apresentava uma acentuada icterícia, o que fez com que o médico levantasse a hipótese de um segundo diagnóstico. Neste caso, foram realizados alguns exames laboratoriais. A principal suspeita era que o paciente apresentasse hepatite B. Analise os exames laboratoriais abaixo e diga se o paciente de fato apresenta hepatite B e em que fase da doença ele se encontra: (0,5 ponto) HBSAg – REAGENTE HBeAg – REAGENTE Anti- HBc IgM – REAGENTE Anti – Hbe – NÃO REAGENTE Anti-HBc IgG - NÃO REAGENTE Anti-HBs – NÃO REAGENTE Slide 1: Citometria de fluxo Slide 2 Slide 3 Slide 4 Slide 5 Slide 6 Slide 7 Slide 8 Slide 9 Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15 Slide 16 Slide 17 Slide 18 Slide 19 Slide 20 Slide 21 Slide 22 Slide 23 Slide 24 Slide 25 Slide 26 Slide 27 Slide 28