TEMPLATE PI PRüTICA RELATôRIO PARA ALUNO bruno 3

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Projeto Integrador – Farmácia e Biomedicina 
Bruno Cesar Cezario de Jesus
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COLORAÇÃO DE GRAM
OBJETIVO
Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina da microbiologia. 
Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática demonstrativa através da realização de atividades teórico-prática.
METODOLOGIA
Passo 1: Coleta do material e Preparo do esfregaço
Obter material coletado com swab (amostra de orofaringe) para confecção do esfregaço. 
Os esfregaços devem ser preparados rodando o swab suavemente pela lâmina limpa;
Antes de realizar a coloração o esfregaço deverá estar seco. 
O esfregaço foi fixado na lâmina com calor brando (50ºC), passando a lâmina 3 vezes através da chama da lamparina de vidro. 
 
Passo 2: Coloração de Gram
Cobrir a área com a solução de cristal-violeta e deixar agir por 1 minuto.
Decantar o cristal-violeta e lavar suavemente com a própria solução de iodo ou água da torneira. 
Cobrir a área do esfregaço com a solução de iodo durante cerca de um minuto.
Descorar a lâmina com a mistura álcool-acetona (1:1), até que o solvente escorra incolor. Alternar com água corrente (jato fraco). O tempo usualmente utilizado nesta etapa é de cerca de 10 segundos. 
Observação: Lavagem excessiva nesta etapa pode causar a retirada do cristal violeta das células Gram-positivas, assim como, a pouca descoloração pode resultar em pouca retirada do cristal violeta, ocasionando uma tonalidade azulada nas bactérias Gram-negativas. 
 Cobrir o esfregaço com a solução de safranina ou Fucsina básica 0.1% a 0.2%), por 30 segundos.
Lavar com água corrente. 
Deixar secar ao ar, em temperatura branda (50ºC). 
Após secagem da lâmina efetuar a leitura microscópica em objetiva de 40X e 100X com óleo de imersão.
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COLORAÇÃO DE GRAM
METODOLOGIA
Figura 1 - Esquematização da coloração de Gram
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COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 1 – Microscópico Óptico
Figura 2 – Lamparina de vidro
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COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 3 – Lâminas de vidro limpas e desengorduradas 7,5 cm x 2,5 cm 
Figura 4 – Swab Estéril 
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COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 5 – Cronômetro 
Figura 6 – Pinça de madeira para tubo de Ensaio
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COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 7 – Salina estéril 0,9% 
Figura 8 – Óleo de imersão 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 9 – Kit para coloração de Gram 
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COLORAÇÃO DE GRAM
Descreva a diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. 
As Bactérias Gram-Positivas : possuem uma parede celular composta por uma espessa camada de Peptidoglicano. As bactérias de gram-positivo são classificadas pela cor que adquire após a aplicação do processo químico Azul de metileno. Onde sua coloração fica Azul.
As Bactérias de Gram-Negativo: Possuem uma parede celular composta por uma camada fina de Peptidoglicano. Após a aplicação da composição química de Gram Positiva –Gram Negativa. As bactérias negativas ficam com a coloração Vermelha devido a reação química,
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COLORAÇÃO DE GRAM
RESULTADOS E DISCUSSÃO
2) Esquematize a sequência da técnica de coloração de Gram. 
Observação para correção: O aluno pode fazer o esquema utilizando as ferramentas do word/power point ou adicionar imagem disponível na internet.
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COLORAÇÃO DE GRAM
Atividade Proposta
3) Reporte os resultados encontrados em sua lâmina. Sua coloração representa a existência de bactérias Gram-positiva ou Gram-negativa. Os alunos deverão arquivar uma foto da lâmina preparada.
Realizamos o esfregaço do material coletado da garganta de uma aluna que tinha acabado um dia anterior de fazer o tratamento com antibiótico, onde conseguimos observar como o tratamento foi correto. Por esse motivo a lâmina foi de bactérias Gram-Negativa.
 Nessa lâmina observamos bactérias Gram-Negativa. 
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COLORAÇÃO DE GRAM
Atividade Proposta
3) Reporte os resultados encontrados em sua lâmina. Sua coloração representa a existência de bactérias Gram-positiva ou Gram-negativa. Os alunos deverão arquivar uma foto da lâmina preparada.
Realizamos dois esfregaços de dois alunos em circunstâncias diferentes um tinha acabado de terminar uma terapia medicamentosa com antibiótico Amoxicilina+ Clavulanato de Pótassio com potencializado.
E observamos outra Lâmina de outra garganta que o aluno não estava fazendo uso de medicamento de antibiótico.
A diferença das duas lâminas ficaram claras.
 Nesta Lâmina Observamos bactérias Gram-positiva.
 O aluno estava reclamando de dor de garganta.
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COLORAÇÃO DE GRAM
CONCLUSÕES
Na técnica de Gram, Coletamos o material salivar de um aluno, colocamos o material na lâmina para fixar passamos 3 vezes na lamparina de vidro. Com o material seco cobrimos a lâmina com o cristal de violeta por 1 min depois tiramos o excesso. Após esse processo lavamos a lâmina e em seguida aplicamos na lâmina o Lugol e ficou por 1 minuto depois descartamos o excesso fixando o cristal violeta. Nessa etapa as bactérias gram-positiva e gram-negativa permanecem com a coloração violeta. Após 1 minuto lavamos com descolorante de Gram. Essa solução age como descolorante, retira o cristal violeta das bactérias gram-negativas e deixando-as incolores. Depois cobrimos a lâmina com fucsina ou safranina e deixamos por 30 segundos. Depois lavamos novamente a lâmina. Após a última lavagem tiramos o excesso de água secando com o papel toalha e levamos para o microscópio.
Todos os Objetivos foram Alcançados.
EXAME A FRESCO
OBJETIVO
Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina laboratorial. 
 Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática demonstrativa através da realização de atividades teórico-prática.
METODOLOGIA
Identificar a lâmina com um lápis de cera;
Colocar duas a três gotas de salina a 0,9% em uma lâmina de vidro.
Tocar com a ponta de um palito em vários pontos das fezes, transferindo uma pequena porção para a lâmina de microscopia. 
Espalhar as fezes, fazendo um esfregaço e examinar ao microscópio. 
A espessura do esfregaço não deve impedir a passagem de luz. 
Coloque uma lamínula sobre a amostra, tomando o cuidado para não formar bolhas de ar;
 Percorra todos os campos da lâmina como mostra a imagem, iniciando a microscopia na objetiva de 10X com aumento progressivo para a objetiva de 40X.
Figura 1 – Técnica leitura microscópica
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EXAME A FRESCO
Figura 2 – Caneta para vidro ou lápis de cera
Figura 1 – Microscópico Óptico
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EXAME A FRESCO
Figura 3 – Lâminas de vidro limpas e desengorduradas 7,5 cm x 2,5 cm 
Figura 4 – Lamínulas
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EXAME A FRESCO
Figura 5 – Bastão de vidro 
Figura 6 – Salina estéril 0,9% 
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EXAME A FRESCO
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Não foi encontrado a presença de nenhum trofozoíto.
Imagem pega pela internet
https://parasitologiaclinica.ufsc.br/index.php/info/conteudo/fotografias/cistos-ecoli/
EXAME A FRESCO
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Descreva quais são as parasitoses que apresentam trofozoítos como forma evolutiva parasitária. 
São:
Etamoeba sp: Parasito Causador da amebíase.
Giardia sp: Parasito Causador da Giardíase.
Toxoplasma Gondii: Parasito Causador da Toxoplasmose
Descrever se os achados encontrados na sua lâmina são referentes a presença de trofozoítos.
Não foi encontrado nenhum trofozoíto.
EXAME A FRESCO
CONCLUSÕES
O exame direto fresco é um método indicado principalmente para a pesquisa de tropozoítos e protozoários em fezes diarreicas recém emitidas( no máximo 30 minutos após a coleta).outras formas de parasitas podem ser encontrados. A identificação macroscópica é útil no diagnóstico das diversas infestações parasitárias.
Todos os objetivos foram alcançados.
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
OBJETIVO
Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina laboratorial. 
 Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática demonstrativa através da realização de atividades teórico-prática.
METODOLOGIA
Procedimento: Técnica de sedimentação espontânea (Hoffman, Lutz, Pons e Janer)Usar luvas descartáveis durante a execução do procedimento.
Em um bécker, homogeneizar, com auxílio de bastão de vidro ou palito de madeira, cerca de 2 – 4 g de fezes em 20 mL de água;
Filtrar a suspensão por meio de gaze dobrada 4 vezes, em cálice de fundo cônico apropriado, com capacidade de 125 mL;
Completar o volume com água e deixar em repouso por no mínimo 1 horas para que ocorra sedimentação espontânea;
Após, com auxílio de uma pipeta de Pasteur, recolher do fundo do cálice amostra da porção inferior do sedimento, depositar sobre lâmina, adicionar 1 gota de lugol, cobrir com lamínula e proceder a leitura microscópica.
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EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
Figura 1 – Peneira/parasitofiltro
Figura 2 – Cálice de sedimentação 
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
Figura 3 – Bécker 
Figura 4 – Gaze 
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
Figura 5 – Pipeta de Pasteur
 
Figura 6 - Lâmina e Lamínula 
 
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
Figura 6 – Lugol parasotológico 
 
Figura 6 – Microscópico Óptico
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Atividade Proposta
Descreva a finalidade da técnica da sedimentação espontânea, mencionando as formas parasitárias que podem ser observadas através desta técnica.
Após a execução da atividade prática o alunos deverão responder a atividade proposta utilizando o material complementar para auxiliá-los.
Figura 2 – Sequência da técnica Sedimentação espontânea 
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
CONCLUSÕES
O método apresenta como fundamento a lei gravitacional, isto é, quando uma porção da amostra é homogeneizada em água destilada até que a dissolução seja obtida.O conteúdo filtrado é transferido para um cálice completando o volume do recipiente, com água até 1 cm da borda e mantendo em repouso por uma hora a 24 horas até que se obtenha o sedimento. Os ovos,larvas,cistos ou oocistos,por serem mais densos quando comparados aos detritos e a água, vão acumular-se no fundo do recipiente.
 Todos os objetivos foram alcançados.
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
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