Aula 1 e 2 Principios da microbiologia

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<p>uma nova forma</p><p>de avaliar.</p><p>Novo</p><p>semestre,</p><p>Como funciona o novo modelo</p><p>de avaliação?</p><p>• O aluno fará apenas 1 prova (AV) valendo até 10 pontos. Essa</p><p>prova contemplará todos os temas de aprendizagem da</p><p>disciplina.</p><p>• Ao longo do semestre, o aluno terá a oportunidade de garantir</p><p>com o “Avaliando o Aprendizado” até 2 pontos extras, que</p><p>serão somados à nota da AV, totalizando a nota final que deverá</p><p>ser de, no mínimo, 6.</p><p>• Caso não consiga obter a nota para aprovação ou faltar</p><p>a AV, o aluno poderá realizar o NOVA CHANCE AV.</p><p>Se ainda assim não obtiver a nota, poderá recuperar</p><p>a aprovação com a AVS.</p><p>• Obtendo nota igual ou superior a 6,0 na AV ou na AVS.</p><p>• Atingindo 75% de frequência nas aulas presenciais de acordo com o</p><p>calendário acadêmico.</p><p>Caso realize as duas provas (AV e AVS), será considerada para</p><p>aprovação na disciplina a maior nota obtida entre</p><p>as duas provas realizadas.</p><p>Como o aluno alcança a aprovação</p><p>com o novo modelo?</p><p>Importante! As mudanças são válidas para as</p><p>disciplinas presenciais e digitais.</p><p>Drº. Bruno Amando</p><p>brunorochabiomed@gmail.com</p><p>MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA</p><p>Princípios básicos de microbiologia</p><p>O que vem a sua mente quando pensa em</p><p>microbiologia?</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>Questionamentos</p><p>• Estamos em íntimo contato com eles.</p><p>• Relacionados a saúde e ao meio ambiente.</p><p>• Desempenham importante papel em muitos</p><p>alimentos e medicamentos</p><p>• Fornecem modelos úteis para muitos processos</p><p>vitais que todos os organismos realizam.</p><p>• Nota: Menos de 1% dos micro-organismos</p><p>causam doenças (patogênicos)</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>• Ajudam a manter o equilíbrio da natureza;</p><p>• Micro-organismos aquáticos – fotossíntese;</p><p>• Decomposição: organismos mortos, produtos de excreção dos</p><p>seres vivos e algumas espécies de resíduos industriais;</p><p>• Reações bioquímicas realizadas pelos micro-organismos -</p><p>aproveitadas na indústria de alimentos – iogurtes, aspartame;</p><p>• Reações de fermentação – fabricação de cervejas, vinhos,</p><p>pães;</p><p>• Capacidade de sintetizar antibióticos (substâncias derivadas de</p><p>um organismo que matam ou inibem o crescimento de outros</p><p>micro-organismos);</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>• Antonius Van Leeuwenhoek → 1º a observar micro-</p><p>organismos;</p><p>• Em 1683 o Holandês relatou o que</p><p>chamou de animálculos em seus dentes;</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>• Louis Pasteur (1822-1896) → 1º cientista a atribuir uma função</p><p>biológica para os micro-organismos;</p><p>• Fermentação microbiana;</p><p>• Vacina;</p><p>• Teoria da geração espontânea;</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>• Robert Kock (1843 – 1910) → Médico alemão - demonstrou o significado etiológico</p><p>das bactérias com agentes de doença infecciosa;</p><p>• Descobriu o agente causador da cólera: o Vibrio cholerae;</p><p>• Conseguiu isolar e descrever o Bacillus anthracis;</p><p>• Descobriu o bacilo causador da tuberculose</p><p>(Mycobacterium tuberculosis, ou bacilo-de-koch);</p><p>Por que estudar microbiologia?</p><p>• Agente etiológico deve ser encontrado em</p><p>todos os casos de doença;</p><p>• O microrganismo deve ser isolado do</p><p>hospedeiro e crescer em cultura pura;</p><p>• A cultura pura do microrganismo suspeito</p><p>deve reproduzir a doença específica após sua</p><p>inoculação em animal susceptível;</p><p>• O mesmo microrganismo deve ser isolado do</p><p>hospedeiro infectado.</p><p>Agentes infecciosos</p><p>Micróbios</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Vírus</p><p>Parasitas</p><p>Maior número de espécies</p><p>patogênicas</p><p>Unicelulares</p><p>Procariotos</p><p>DNA e RNA</p><p>Fissão binária</p><p>Unicelulares e pluricelulares</p><p>Eucariotos</p><p>Leveduras – germinação/fissão binária</p><p>Filamentosos – sexuados e assexuados</p><p>Dimórficos</p><p>Grupo numeroso e</p><p>complexo</p><p>Unicelulares </p><p>protozoários</p><p>Pluricelulares  órgãos e</p><p>tecidos bem definidos</p><p>Forma mais simples de agentes infecciosos</p><p>Intracelulares obrigatórios</p><p>DNA ou RNA</p><p>Replicação extensiva</p><p>• Mantém a resistência mecânica às diferenças de osmolaridade entre os meios intra e extracelular;</p><p>• Delimita a forma;</p><p>• Suporte sólido para estruturas de locomoção, como os flagelos;</p><p>• Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas;</p><p>Parede celular</p><p>Parede celular</p><p>Parede celular</p><p>Estrutura antigênica - Identificação</p><p>◦ Antígeno O (polissacarídio somático</p><p>LPS);</p><p>◦ Antígeno K (cápsula);</p><p>◦ Antígeno H (flagelos – flagelina);</p><p>Membrana citoplasmática</p><p>◦ Serve de barreira osmótica;</p><p>◦ Sistemas específicos de transporte para</p><p>nutrientes e íons;</p><p>◦ Onde encontram-se os mesossomos:</p><p>achados particulares da membrana</p><p>celular</p><p>Cápsula</p><p>◦ Presente em Gram + e -;</p><p>◦ Envoltório de mucopolissacarídeo;</p><p>◦ Considerada um fator de virulência;</p><p>◦ Pode ser produzida, mais ou menos</p><p>intensamente, na dependência do meio e</p><p>nutrientes em que este micro-organismo está</p><p>crescendo;</p><p>◦ Dois tipos:</p><p>1. Cápsulas frouxas - glicocálice;</p><p>2. Cápsulas mais densamente condensadas.</p><p>Flagelos</p><p>◦ Responsável pela motilidade</p><p>microbiana;</p><p>◦ Constituído por três estruturas;</p><p>◦ Quanto ao número de flagelos, as</p><p>células bacterianas podem ser</p><p>classificadas de diferentes formas;</p><p>Pili ou Fímbrias</p><p>◦ Constituídas de um ou vários tipos de</p><p>proteínas estruturais, denominadas pilinas;</p><p>◦ Se estende para fora da superfície externa</p><p>bacteriana em 0,2 a 2 μm;</p><p>◦ São divididos em pilis comuns ou pilis</p><p>sexuais;</p><p>Endósporo</p><p>◦ Uma das principais formas de resistência;</p><p>◦ Comuns em alguns gêneros bacterianos;</p><p>◦ Transformação da célula vegetativa em</p><p>endósporo, o qual é química e</p><p>morfologicamente diferente da célula mãe.</p><p>Morfologia bacteriana</p><p>As bactérias de importância médica são caracterizadas morfologicamente por:</p><p>•Tamanho</p><p>•Forma</p><p>•Arranjo</p><p>Morfologia bacteriana</p><p>• Bastonetes ou bacilos:</p><p>Bastonetes longos ou curtos com extremidade reta</p><p>ou de ponta arredondada, ou ainda curvos, em</p><p>forma de vírgula;</p><p>• Espirilos:</p><p>Forma de hélice, sacarrolha, ou espiralar;</p><p>• Cocos:</p><p>Podem ser esféricos, elípticos, em forma de ponta</p><p>de lança, riniformes, etc.</p><p>Fatores de virulência</p><p>◦ Cápsula;</p><p>◦ Sistema de Secreção (Bombas de</p><p>efluxo);</p><p>◦ Variação antigênica;</p><p>◦ Endotoxina (lipídio A – LPS);</p><p>◦ Imunidade inata;</p><p>◦ IL-1, TNF-α, C3a e C5a;</p><p>Fatores de virulência</p><p>Fatores de virulência</p><p>• Captação de ferro (enterobactina e aerobactina);</p><p>• Enzimas:</p><p>(Coagulase/ Cinase/ Hialuronidase/ Colagenase/ Protease IgA)</p><p>• Adesinas:</p><p>(Proteínas de membrana, fímbrias, carboidratos de superfície)</p><p>• Biofilmes</p><p>Fatores de virulência</p><p>Fatores de virulência</p><p>Características bioquímicas</p><p>Teste da</p><p>catalase</p><p>Prova de hemólise</p><p>SIM test Teste da</p><p>coagulase</p><p>TSI agar</p><p>✔Intrínseca;</p><p>✔Adquirida;</p><p>1. Mutações;</p><p>2. Processos de recombinação genética</p><p>(Conjugação, Transformação e Transdução);</p><p>✔Transposição (Transposons)</p><p>Resistência bacteriana</p><p>✔Enzima</p><p>✔Alteração do alvo;</p><p>✔Bomba de efluxo;</p><p>✔Permeabilidade de membrana.</p><p>Principais mecanismos de resistência</p><p>bacteriana</p><p>✔Inibição enzimática: (mais comum).</p><p>Principais mecanismos de resistência</p><p>bacteriana</p><p>✔Permeabilidade de membrana.</p><p>1. Perda ou alteração de porinas</p><p>específicas (Gram -)</p><p>2. Redução do influxo de drogas;</p><p>3. Pseudomonas aeruginosa;</p><p>Principais mecanismos de resistência</p><p>bacteriana</p><p>✔Alteração do sítio de ação.</p><p>Principais mecanismos de resistência</p><p>bacteriana</p><p>✔Bombas de efluxo.</p><p>Principais mecanismos de resistência</p><p>bacteriana</p><p>Drº. Bruno Amando</p><p>brunorochabiomed@gmail.com</p><p>MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA</p><p>Princípios básicos de microbiologia</p><p>Cultivo de micro-</p><p>organismos</p><p>Exigências</p><p>nutricionais</p><p>Fatores</p><p>físicos/ambientais</p><p>Definição material nutriente preparado no laboratório para o</p><p>crescimento de microrganismos.</p><p>Objetivo fornecer as condições nutricionais mínimas para o</p><p>cultivo artificial de microrganismos.</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>Meios de cultura</p><p>Nutrientes corretos (C, N, vitaminas e outros)</p><p>Devem conter pH ajustado</p><p>Oxigênio (ou sua ausência)</p><p>Água e sais inorgânicos</p><p>Certos microrganismos crescem...</p><p>Na maioria dos meios (Escherichia coli)</p><p>Meios especiais (Streptococcus sp.)</p><p>Nenhum meio (Treponema pallidum)</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.f</p><p>am</p><p>.b</p><p>r</p><p>E. coli</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.m</p><p>ic</p><p>ro</p><p>b</p><p>el</p><p>ib</p><p>ra</p><p>ry</p><p>.o</p><p>rg</p><p>S. mutans</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.c</p><p>o</p><p>.h</p><p>en</p><p>n</p><p>ep</p><p>in</p><p>.m</p><p>n</p><p>.u</p><p>s</p><p>T.</p><p>pallidum</p><p>Meios de cultura</p><p>Finalidades:</p><p>- Promover o crescimento e isolamento;</p><p>- Pesquisar as características bioquímicas;</p><p>- Conhecer as necessidades nutritivas;</p><p>- Estudar as morfologias das colônias;</p><p>- Pesquisar o perfil de sensibilidade às drogas</p><p>antimicrobianas;</p><p>- Utilização na biotecnologia.</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.b</p><p>io</p><p>sy</p><p>st</p><p>em</p><p>s.</p><p>co</p><p>m</p><p>.b</p><p>r</p><p>Meio líquido</p><p>Meio sólido</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.b</p><p>io</p><p>sy</p><p>st</p><p>em</p><p>s.</p><p>co</p><p>m</p><p>.b</p><p>r</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>s:</p><p>//</p><p>w</p><p>w</p><p>w</p><p>.l</p><p>ec</p><p>tu</p><p>ri</p><p>o</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>Sensibilidade às drogas</p><p>Meios de cultura</p><p>Consistência</p><p>Líquidos Semi-sólidos Sólidos</p><p>O que os diferenciam?</p><p>Agar</p><p>Polissacarídeo complexo obtido a partir de algas marinhas</p><p>0 – 0,5% de agar 0,5 - 1,4% de agar 1,5 - 2% de agar</p><p>Meios de cultura</p><p>QUIMICAMENTE</p><p>DEFINIDO</p><p>COMPLEXO</p><p>Componente Quantidade</p><p>Glicose 5,0 g</p><p>Fosfato de amônia monobásico 1,0 g</p><p>Cloreto de sódio 5,0 g</p><p>Sulfato de magnésio 0,2 g</p><p>Fosfato de potássio dibásico 1,0 g</p><p>Água 1 litro</p><p>Componente Quantidade</p><p>Peptona 5,0 g</p><p>Extrato de carne 3,0 g</p><p>Cloreto de sódio 8,0 g</p><p>Ágar 15,0 g</p><p>Água 1 litro</p><p>Composição</p><p>Meios de cultura</p><p>FunçãoSeletivos Não seletivos</p><p>Diferenciais</p><p>Enriquecimento</p><p>Cromogênico</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio enriquecimento:</p><p>Caldo BHI</p><p>(Brain Heart</p><p>Infusion)</p><p>- Recuperação de microrganismos incluindo bactérias e fungos</p><p>- Deriva dos componentes da infusão de cérebro-coração, da peptona e glicose</p><p>- São fontes de nitrogênio orgânico, carbono, enxofre e vitaminas</p><p>- Glicose utilizada para fermentação</p><p>- Não utilizado como meio de isolamento primário</p><p>Interpretação</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=9103</p><p>+-</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/w</p><p>w</p><p>w</p><p>.b</p><p>io</p><p>sy</p><p>st</p><p>em</p><p>s.</p><p>co</p><p>m</p><p>.b</p><p>r</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio diferencial:</p><p>Agar CLED</p><p>(cistina lactose</p><p>deficiente de eletrólitos)</p><p>- Meio altamente nutritivo utilizado para isolamento e diferenciação de</p><p>bactérias presente na urina.</p><p>- Evita a proliferação do véu do Proteus spp. Devido a deficiência de eletrólitos.</p><p>- A lactose permite a diferenciação de fermentadoras das não fermentadoras</p><p>- Azul de bromotimol como indicador de pH</p><p>- Permite a determinação quantitativa de agentes patogênicos urinários quando</p><p>usadas alças calibradas</p><p>Interpretação</p><p>- Cor original do meio: verde</p><p>- Fermentadores: meio e colônias</p><p>amarelas</p><p>- Não fermentadores: meio e colônias</p><p>verde</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>KONEMAN, E.W. et al. 2008.</p><p>https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=9062</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/l</p><p>ab</p><p>o</p><p>ra</p><p>to</p><p>ry</p><p>in</p><p>fo</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>/c</p><p>le</p><p>d</p><p>-a</p><p>g</p><p>ar</p><p>/</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio diferencial:</p><p>Agar cromogênico</p><p>- Meio altamente nutritivo utilizado para isolamento e diferenciação de</p><p>bactérias em geral;</p><p>- Evita a proliferação do véu do Proteus spp. Devido a deficiência de</p><p>eletrólitos;</p><p>- Possui componentes que permitem o crescimento de cada patógeno em uma</p><p>cor diferenciada;</p><p>- Permite a determinação quantitativa de agentes patogênicos urinários quando</p><p>usadas alças calibradas</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/l</p><p>ab</p><p>o</p><p>ra</p><p>to</p><p>ry</p><p>in</p><p>fo</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>/c</p><p>le</p><p>d</p><p>-a</p><p>g</p><p>ar</p><p>/</p><p>Meios de cultura</p><p>E. coli</p><p>S. saprophyticus</p><p>Meio não seletivo:</p><p>Agar Columbia</p><p>5% de sangue de</p><p>carneiro</p><p>- Meio base rico oferecendo ótimas condições de crescimento para maioria dos</p><p>microrganismos</p><p>- As hemácias íntegras favorecem a formação de halos de hemólise nítidos</p><p>- Adição de amido de milho para absorver os subprodutos tóxicos da amostra</p><p>- A hemólise do sangue fornece o fator X(heme) necessários para o crescimento</p><p>de muitas espécies patogênicas</p><p>- Não há crescimento de Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae,</p><p>Mycobacterium e Legionella</p><p>Interpretação</p><p>- O número de espécies que se desenvolvem</p><p>nesse meio é elevado</p><p>- Beta hemólise: lise total de eritrócitos</p><p>- Alfa hemólise: lise parcial dos heritrócitos</p><p>- Gama hemólise: eritrócitos íntegros</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>KONEMAN, E.W. et al. 2008.</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/s</p><p>li</p><p>d</p><p>ep</p><p>la</p><p>y</p><p>er</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>.b</p><p>r/</p><p>sl</p><p>id</p><p>e/</p><p>8</p><p>4</p><p>0</p><p>2</p><p>8</p><p>/</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio não seletivo:</p><p>Agar Chocolate</p><p>- Meio enriquecido e não seletivo para cultivo de bactérias delicadas e</p><p>exigentes.</p><p>- As hemácias são lisadas para liberar hemina, NAD e hematina que dão a</p><p>coloração marrom característica e servem como nutrientes para os</p><p>microrganismos.</p><p>- Permite o crescimento de Haemophilus sp., Neisseria sp. e Moraxella sp.</p><p>Interpretação</p><p>Não havendo crescimento bacteriano, constata-se</p><p>amostra isenta de bactérias patogênicas. Havendo</p><p>crescimento, realizar a partir de colônias</p><p>suspeitas, coloração de Gram e proceder à testes</p><p>complementares (provas bioquímicas, provas</p><p>sorológicas, etc).</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>KONEMAN, E.W. et al. 2008.</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>:/</p><p>/s</p><p>li</p><p>d</p><p>ep</p><p>la</p><p>y</p><p>er</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>.b</p><p>r/</p><p>sl</p><p>id</p><p>e/</p><p>8</p><p>4</p><p>0</p><p>2</p><p>8</p><p>/</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio seletivo:</p><p>Agar MacConkey</p><p>- Meio seletivo e diferencial para Enterobacteriaceae e não fermentadores</p><p>- Contém sais biliares e cristal violeta que inibe Gram +</p><p>- A diferenciação é feita pela combinação da lactose com o vermelho neutro</p><p>Interpretação</p><p>- Fermentadores de lactose produzem colônias</p><p>vermelhas. Ex: E. coli, Klebsiela spp.</p><p>- Não fermentadores produzem colônias cremes.</p><p>Ex: Pseudomonas spp.</p><p>- Gram + são inibidas</p><p>TORTORA, FUNKE e CASE, 2012.</p><p>KONEMAN, E.W. et al. 2008.</p><p>h</p><p>tt</p><p>p</p><p>s:</p><p>//</p><p>w</p><p>w</p><p>w</p><p>.c</p><p>ar</p><p>lr</p><p>o</p><p>th</p><p>.c</p><p>o</p><p>m</p><p>Meios de cultura</p><p>Meio EMB (eosina azul de metileno)</p><p>Meio Hektoen</p><p>• Características de incubação</p><p>• Anaerobiose</p><p>• Preservação do material (Resfriamento; Congelamento; Liofilização)</p><p>Importante Lembrar!Ei!</p><p>Tecidos ou fluidos</p><p>Análises microbiológicas,</p><p>imunológicas e de biomol</p><p>Amostras para análise</p><p>Sangue, urina, fezes, escarro, líquido cefalorraquidiano, exsudado vaginal/uretral, exsudado</p><p>ocular / auricular/ nasofaringe, expectoração, raspados, biopsias ...</p><p>Isolamento</p><p>• Meios enriquecidos ou diferenciais ou seletivos</p><p>• Cultura pura</p><p>• Métodos de isolamento</p><p>✔Semeadura por esgotamento</p><p>✔Semeadura quantitativa</p><p>✔Semeadura em profundidade em meios semisólidos</p><p>✔Diluição líquida</p><p>(TORTORA, 2017)</p><p>1º</p><p>2º</p><p>3º</p><p>4º</p><p>Técnicas de semeio</p><p>Esgotamento Quantitativo</p><p>1º</p><p>2º</p><p>Meios de Cultivo</p><p>1. Sem coloração – vivas, evidênciar a motilidade</p><p>2. Com coloração – Corados após serem mortos</p><p>Coloração</p><p>✔ Coram com derivados de anilina (Azul de metileno; Fucsina, Cristal violeta ...)</p><p>✔ Corantes possuem afinidade com o citoplasma</p><p>✔ SIMPLES: Apenas 1 corante (azul de metileno, carbolfucsina, cristal violeta, safranina)</p><p>✔ DIFERENCIAL: Geralmente 2 corantes;</p><p>✔ ESPECIAL: evidencia partes do microrganismo;</p><p>Métodos de Gram (1884) e de Ziehl-Neelsen (1882)</p><p>• Desenvolvida no século XIX;</p><p>• Técnica mais utilizada em laboratório;</p><p>• O princípio ou fundamento da técnica se baseia na</p><p>diferença da composição química da parede celular das</p><p>bactérias e na ação do álcool sobre esta parede;</p><p>• Existem duas teorias para explicar o processo;</p><p>• Possui variações;</p><p>Técnica de Gram</p><p>• Preparação do esfregaço e fixação da amostra para coloração</p><p>✔Lápis;</p><p>✔Amostras diversas;</p><p>✔Microrganismos em excesso – diluir em solução estéril (gota);</p><p>✔Lâmina deverá ser fixada – CALOR;</p><p>✔Realiza-se a técnica de coloração;</p><p>Coloração</p><p>Coloração</p><p>• Colorações Especiais</p><p>Coloração</p><p>• Coloração negativa para cápsulas</p><p>✔Coloração da cápsula é mais difícil do que outros procedimentos de coloração 🡪 cápsulas são</p><p>solúveis em agua;</p><p>✔Podem ser removidos durante a lavagem rigorosa;</p><p>✔Tinta da Índia ou nigrosina - Fornecer um fundo contrastante ;</p><p>✔Usa-se, então, coloração simples 🡪 Safranina</p><p>Coloração</p><p>• Coloração para endósporos (esporos)</p><p>✔Coloração de endósporos de Schaeffer-Fulton;</p><p>✔Verde malaquita (coloração primaria) 🡪 Aplicado a um esfregaço fixado com calor e</p><p>aquecido em vapor (5 minutos);</p><p>✔Lavagem (30 segundos) com agua;</p><p>✔Safranina (Contracorante)</p><p>✔Endosporos - aparecem verde dentro de células vermelhas ou rosadas.</p><p>Coloração</p><p>• Apesar de todo avanço tecnológico,</p><p>ela ainda é necessária,</p><p>pois fornece um laudo rápido e com baixo custo. Porém, o uso de</p><p>medicamentos prejudica a técnica;</p><p>1. Auxilia na escolha dos meios de cultura;</p><p>2. Orientam o médico na escolha da antibioticoterapia empírica</p><p>racional;</p><p>3. Pode ser utilizada para avaliar a qualidade da amostra clínica de</p><p>qualquer material clínico sujeito à contaminação com a</p><p>microbiota normal dos sítios anatômicos;</p><p>4. A avaliação da celularidade podem auxiliar na interpretação da</p><p>resposta inflamatória;</p><p>Importância clínico-laboratorial da</p><p>coloração de Gram</p><p>5. Pode-se avaliar a quantidade de micro-organismos presentes na</p><p>amostra para monitorar se o crescimento subsequente na cultura</p><p>é compatível com o observado;</p><p>6. A coloração de Gram de urina não centrifugada fornece uma</p><p>avaliação aproximada do número de bactérias na urina (1 célula</p><p>= ≥ 105 ufc/ml);</p><p>7. Pode auxiliar na pesquisa de patógenos entéricos específicos;</p><p>8. Pela rapidez do resultado, o teste se mostra muito importante em</p><p>determinadas situações clínicas, como no diagnóstico de angina</p><p>de Vincent;</p><p>Importância clínico-laboratorial da</p><p>coloração de Gram</p><p>Drº. Bruno Amando</p><p>brunorochabiomed@gmail.com</p><p>MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA</p><p>Princípios básicos de microbiologia</p>