Hemograma completo

Prévia do material em texto

<p>UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS - UFG</p><p>INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - ICB</p><p>Ana Gabryela Rodrigues Silva</p><p>Karen Romagnoli Rodrigues de Freitas</p><p>Keven Sávio Rodrigues</p><p>Lucas Gabriel Freitas Soares</p><p>Hemograma completo</p><p>Goiânia</p><p>2023</p><p>Ana Gabryela Rodrigues Silva</p><p>Karen Romagnoli Rodrigues de Freitas</p><p>Keven Sávio Rodrigues</p><p>Lucas Gabriel Freitas Soares</p><p>Hemograma completo</p><p>Relatório encaminhado como critério de</p><p>avaliação para a disciplina Métodos</p><p>Analíticos em biomedicina da</p><p>Universidade Federal de Goiás.</p><p>Professor Renan Nunes Leles</p><p>Goiânia</p><p>Resumo</p><p>O hemograma é um exame de sangue crucial que avalia as células</p><p>sanguíneas, fornecendo informações essenciais sobre a saúde. Ele ajuda na</p><p>detecção e monitoramento de condições como anemias, infecções e doenças</p><p>hematológicas, sendo fundamental para diagnóstico precoce e acompanhamento de</p><p>doenças, contribuindo para a avaliação global da saúde do paciente. Portanto, este</p><p>relatório tem como objetivo descrever os procedimentos práticos realizados por</p><p>estudantes da disciplina de Métodos Analíticos em Biomedicina para obtenção do</p><p>resultado final do hemograma, com o objetivo de destacar experiências e</p><p>aprendizados individuais e coletivos nesse processo. O procedimento envolve os</p><p>processos de punção venosa, contagem de hemácias, dosagem de hemoglobina,</p><p>índices de hemantimétricos, contagem de leucócitos, contagem diferencial de</p><p>leucócitos, e contagem de plaquetas. A coloração das amostras são feitas com</p><p>corantes ácidos e básicos. A observação no microscópio inclui identificação de</p><p>características celulares através da câmara de Neubauer e esfregaço sanguíneo.</p><p>Foram obtidos no eritograma: Hemácias 6 milhões ų/l, hemoglobina: 14,36 g/dl,</p><p>hematócrito: 43%, V.C.M.: 71,6 fL, H.C.M.: 23,9 pg, C.H.C.M.: 33,3%. Leucograma:</p><p>leucócitos: 10.850 uL, neutrófilos: 5750,5 uL, eosinófilos: 325,5 uL, Basófilos: 0 uL,</p><p>linfócitos: 3,089 uL, monólitos: 0 uL. Plaquetograma: 815.000 uL (câmara de</p><p>Neubauer).</p><p>Sumário</p><p>1 Introdução............................................................................................................................ 4</p><p>2 Materiais e métodos............................................................................................................ 6</p><p>3 Resultados............................................................................................................................9</p><p>4 Considerações finais......................................................................................................... 11</p><p>Referências bibliográficas................................................................................................... 12</p><p>4</p><p>1 Introdução</p><p>Os exames laboratoriais são de grande importância na avaliação geral da</p><p>saúde, cujos resultados fornecem informações que permitem diagnóstico,</p><p>prognóstico e caracterização de risco para diversas patologias. O hemograma</p><p>completo é um dos exames mais solicitados pelos profissionais médicos. Este, por</p><p>sua vez, avalia regularmente o estado de saúde do indivíduo, fornecendo</p><p>informações vitais que podem ajudar a diagnosticar patologias como leucemia,</p><p>processos infecciosos e uma variedade de outros distúrbios hematológicos (HENRY,</p><p>2008).</p><p>Um organismo com contagem celular normal manterá então a quantidade e a</p><p>qualidade das células circulantes, podendo assim evitar a infecção por</p><p>microrganismos patogénicos e hemorragias, garantindo assim o fornecimento de</p><p>oxigénio suficiente às células. Visto que tais fatores podem estar envolvidos neste</p><p>mecanismo, como genética, nutrição e meio ambiente, dificultando a síntese de</p><p>hemoglobina, ocasionando o desenvolvimento de neoplasias hematológicas.</p><p>Portanto, são importantes indicadores de diferentes tipos de processos patológicos</p><p>(LEWIS et al., 2006).</p><p>Da mesma forma, nas últimas décadas, as técnicas laboratoriais foram</p><p>modernizadas. Portanto, exames como hemoglobina/hematócrito (Hb/Ht),</p><p>eritrograma, leucograma e contagem de plaquetas foram substituídos por</p><p>hemogramas completos automatizados com diferentes contagens de glóbulos</p><p>brancos em 5 tipos – neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos, e basófilos –</p><p>feitos em menos de tempo e mais eficiência graças aos analisadores hematológicos</p><p>automáticos (MATOS et al., 2012).</p><p>O eritrograma é um exame que verifica a série vermelha do sangue,</p><p>contabilizando os glóbulos vermelhos, as dosagens de hemoglobina e hematócrito,</p><p>além dos índices hematimétricos. Ademais, o leucograma analisa os glóbulos</p><p>brancos e desempenha um papel essencial no diagnóstico e acompanhamento de</p><p>processos infecciosos, inflamatórios e alérgicos (LORENZI, 2006).</p><p>A medição da hemoglobina é um dos parâmetros-chave para determinar se</p><p>uma pessoa tem anemia, doença caracterizada por baixos níveis de hemoglobina no</p><p>5</p><p>sangue. Por fim, a contagem de plaquetas pode ser realizada manualmente, por</p><p>meio de espectrofotômetro, ou por automação em contador hematológico. As</p><p>plaquetas são responsáveis por desencadear a formação de coágulos sanguíneos e</p><p>desempenham um papel importante no controle de sangramentos e na cicatrização</p><p>de feridas (LORENZI, 2006; OSHIRO, 2017).</p><p>Em contrapartida, os métodos utilizados possuem etapas para realizar</p><p>análises hematológicas, como esteiras, analisadores hematológicos e máquinas</p><p>para confecção e coloração de lâminas. Outros métodos, além da impedância</p><p>elétrica, são combinados com análises mais complexas, como coloração celular</p><p>química especial, análise celular por condutividade e dispersão a laser e, mais</p><p>recentemente, o uso de fluorocromos, como células corantes e conjugados de</p><p>anticorpos monoclonais, permite a imunofenotipagem (ROSENFELD, 2012).</p><p>Como resultado, parâmetros foram integrados e melhorados ao hemograma,</p><p>como o red cell volume distribution width (RDW), que é um índice de anisocitose,</p><p>indicando o grau de desvio da população de hemácias em relação a seu tamanho</p><p>médio. O aumento do RDW tem sido utilizado como um marcador precoce da</p><p>anemia, demonstrando a anisopoiquilocitose antes mesmo que o volume</p><p>corpuscular médio (VCM) se altere além dos intervalos de referência (ZAGO et al.,</p><p>2013).</p><p>A análise automatizada permite, portanto, a detecção de células anormais</p><p>através de avisos sobre a presença de neutrófilos jovens do “desvio para a</p><p>esquerda”, linfócitos reativos atípicos, eritroblastos e outros blastos, determinando</p><p>assim a preparação de amostras para confirmação microscópica.</p><p>6</p><p>2 Materiais e métodos</p><p>Materiais para coleta de sangue:</p><p>● Algodão</p><p>● Álcool 70%</p><p>● Agulha (25x0,8)</p><p>● Seringa</p><p>● Garrote</p><p>● Lixo comum</p><p>● Lixo infectante</p><p>● Tubo de EDTA</p><p>● Descarpack</p><p>Equipamentos/vidraria em comum:</p><p>● Pipetas automáticas</p><p>● Béquer</p><p>● Tubo de ensaio</p><p>● Câmara de Neubauer</p><p>● Microscópio</p><p>● Lâmínulas</p><p>Materiais para contagem de hemácias:</p><p>● Solução salina</p><p>Materiais para dosagem de hemoglobina:</p><p>● Espectrofotômetro</p><p>● Cubeta</p><p>● Reagentes de cor</p><p>● Reagente padrão</p><p>● Centrífuga</p><p>Materiais para determinação de hematócrito e índices hematimétricos:</p><p>● Tubos de capilares para microhematócrito</p><p>● Massa de modelar</p><p>● Régua de hematócrito</p><p>Materiais para diluição na contagem total de leucócitos:</p><p>● Líquido de Turk</p><p>Materiais para contagem diferencial de leucócitos:</p><p>● Extensora</p><p>● Corante a base de triarilmetano 0,1%</p><p>7</p><p>● Corante a base de xantenos 0,1%</p><p>● Corante a base de tiazinas 0,1%</p><p>● Aplicativo contador de leucócitos</p><p>Materiais para diluição na contagem de plaquetas:</p><p>● Água destilada</p><p>● Oxalato de amônio</p><p>● Azul de metileno</p><p>Assim como nas aulas anteriores, precisou-se de amostra de sangue para</p><p>fazer o procedimento, então, primeiramente, um integrante do grupo realizou a</p><p>punção venosa e colocou o sangue no tubo de EDTA como de costume. Por ser uma</p><p>aula de hemograma completo, precisou-se dividir o grupo para fazer etapas</p><p>diferentes e o professor já deixara preparado todos os reagentes necessários para</p><p>cada contagem específica a fim de otimizar o tempo.</p><p>Dessa maneira, uma pessoa do grupo foi realizar a contagem de hemácias e</p><p>para isso pipetou-se 4 mL de solução salina em um</p><p>tubo de ensaio. Também</p><p>pipetou-se 20 microlitro de amostra de sangue nesse tubo e homogeneizou-se a</p><p>mistura, obtendo uma amostra de sangue diluída em 1:200. A contagem de</p><p>hemácias foi feito na Câmara de Neubauer, sendo realizada no quadrante central,</p><p>contando 5 quadrantes dentre os 25 mini quadrantes. A partir do momento que</p><p>coletara o resultado da quantidade de hemácias, realizou-se a conversão do que foi</p><p>encontrado para o volume desejado da seguinte maneira:</p><p>Quantidade de hemácias dos 5 quadrantes x 5 x 10 x 200 = hemácias/microlitro</p><p>Ao mesmo tempo em que as hemácias foram contadas, outras pessoas</p><p>realizara o esfregaço sanguíneo para que pudesse secar e realizar a contagem</p><p>diferencial de leucócitos. Todo o procedimento foi feito como foi ensinado nas aulas</p><p>antecedentes. Ao mesmo tempo em que se preparava o esfregaço, a câmara úmida</p><p>foi preparada também para contar as plaquetas e foi feita a dosagem de</p><p>hemoglobina em seguida. O espectrofotômetro foi calibrado e a leitura realizada foi</p><p>de 316 da padrão e 454 da amostra. Para o cálculo da dosagem de hemoglobina, é</p><p>preciso:</p><p>8</p><p>10 g/dL do padrão ------- 316</p><p>X g/dL da amostra -------- 454</p><p>Posteriormente, outra pessoa foi determinar as hemácias e os índices</p><p>hematimétricos. Para isso, preencheu 2/3 de um tubo capilar com sangue e vedou</p><p>sua extremidade com uma massinha de modelar para que não houvesse</p><p>extravasamento. Em seguida, colocou-se o capilar numa centrífuga a 10.500 rpm</p><p>durante 10 minutos. Depois, foi feita a leitura através da régua de hematócrito. As</p><p>fórmulas usadas na descoberta dos índices hematimétricos são:</p><p>VCM = Ht/Hc x 10</p><p>HCM = Hb/ Hc x 10</p><p>CHCM = Hb/Ht x 100</p><p>Após a secagem dos esfregaços feitos no começo da aula, foi-se, então,</p><p>realizar a contagem total e a diferencial dos leucócitos. Na contagem diferencial,</p><p>utilizou-se um aplicativo que armazenava as quantidades encontradas de cada tipo</p><p>de leucócito até chegar no número 100. A total foi feita na Câmara de Neubauer. A</p><p>suspensão dos leucócitos, que posteriormente foi colocado câmara para ser</p><p>contado, foi realizada com 380 microlitros do líquido de Turk em um tubo de ensaio</p><p>mais 20 microlitros de amostra de sangue. A contagem foi feita na parte superior da</p><p>câmara e contou-se os 4 quadrantes laterais.</p><p>Por fim, realizou-se a contagem de hemácias. Preparou-se uma mistura</p><p>contendo oxalato de amônio, azul de metileno e água destilada para diluir o sangue.</p><p>Posteriormente, pipetou-se 2 mL de oxalato de amônio ( o diluente) num tubo de</p><p>ensaio mais 20 microlitro de sangue e homogeneizou-se. Pegou-se a câmara de</p><p>neubauer que estava na câmara úmida e pipetou-se a mistura que foi feita para</p><p>contar os leucócitos. Contou-se apenas na parte inferior da câmara, focando no</p><p>quadrante central e contando 5 dos 25 mini quadrantes. Para chegar no resultado</p><p>final, é preciso calcular da seguinte forma:</p><p>Total de plaquetas contadas x 5 x 10 x 100</p><p>9</p><p>3 Resultados</p><p>Para a realização do hemograma foi feita através da contagem separadamente</p><p>cada um, usando em sua maioria a regra distributiva 3 como por exemplo na</p><p>contagem de plaquetas</p><p>X plaquetas/campo ------------ Y Hemácias por campo</p><p>Z plaquetas total --------------- H x 10 hemácias</p><p>Eritrograma Valores de referência</p><p>Hemácias (/μL) 6.010.000 μL 4,0 A 5,20 MILHÕES μL</p><p>Hemoglobina (g/dL) 14,36 g/dL 12 a 16G/dL</p><p>Hematócrito (%) 43 % 36 a 45%</p><p>V.C.M. (fL) 71,6 fL 80 a 99 fL</p><p>H.C.M. (pg) 33,9 pg 26 a 34 pg</p><p>C.H.C.M. (% ou g/L) 33,3 g/dL 32 a 36 g/dL</p><p>Leucograma Valores de referência</p><p>Relativo (%) Total (μL)</p><p>Leucócitos — 10.850μL 4.000 a 11.000 μL</p><p>Neutrófilos 53% 5.750,5μL 40 a 550 μL</p><p>Eusinófilos 3% 325,5μL 40 a 550 μL</p><p>Basófilos 0% 0μL 0 a 220 μL</p><p>Leucócitos 34% 3.089μL 800 a 4.450 μL</p><p>Monócitos 0% 0μL 40 a 770μL</p><p>Plaquetograma Valores de referência</p><p>Contagem de</p><p>plaquetas (/μL)</p><p>815.0000μL 150.0000 a 450.000μL</p><p>Metodologia utilizada:</p><p>CONTAGEM DE HEMÁCIAS: Diluição em solução fisiologia e contagem na</p><p>Câmara de Neubauer</p><p>DOSAGEM DE HEMOGLOBINA: Uso do reagente de Drubkin e determinação da</p><p>absorbância</p><p>10</p><p>ÍNDICES HEMANTIMETRICOS:</p><p>CONTAGEM DE LEUCÓCITOS: Suspensão no de Burk e contagem na câmara de</p><p>Neubauer</p><p>CONTAGEM DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS: Esfregaço sanguíneo</p><p>CONTAGEM PLAQUETAS: Diluição em oxalato amônio e contagem na câmara de</p><p>Neubauer</p><p>11</p><p>4 Considerações finais</p><p>Este relatório apresenta resultados do hemograma, mas é importante ressaltar</p><p>que eles podem não ser totalmente confiáveis devido a possíveis erros nas</p><p>contagens realizadas pelos estudantes nos esfregaços sanguíneos e na câmara de</p><p>Neubauer.</p><p>Durante o processo de contagem, diversos fatores podem afetar os resultados</p><p>obtidos. A contagem manual de células sanguíneas requer habilidade técnica e</p><p>atenção cuidadosa para identificá-las, pode ser difícil. Além disso, as amostras</p><p>utilizadas podem conter componentes que dificultam a contagem precisa.</p><p>Nesse relatório, a contagem foi realizada por alunos em treinamento, o que</p><p>pode aumentar a taxa de erro. Estudantes inexperientes muitas vezes têm</p><p>dificuldade em identificar e contar plaquetas com precisão, especialmente em</p><p>comparação com profissionais experientes. Portanto, a curva de aprendizado e a</p><p>falta de familiaridade do aluno com o processo devem ser levadas em consideração.</p><p>Ademais, outro fator que pode afetar a confiabilidade dos resultados é a</p><p>contagem na câmara de Neubauer e no esfregaço sanguíneo. Estes métodos</p><p>requerem precisão e cuidado na aplicação das amostras, além da capacidade de</p><p>contar células com precisão. Qualquer desvio neste processo pode afetar</p><p>diretamente o resultado final. Com estas considerações em mente, é essencial</p><p>enfatizar a importância da educação continuada e da supervisão adequada dos</p><p>alunos que aprendem técnicas de contagem de células.</p><p>Em resumo, embora os resultados apresentados neste relatório forneçam uma</p><p>estimativa aproximada do hemograma completo, é importante ressaltar que eles</p><p>podem conter erros devido a erros que podem ocorrer durante o processamento da</p><p>contagem de estudantes. Portanto, deve-se ter extremo cuidado ao interpretar esses</p><p>resultados e deve-se considerar a repetição das contagens ou o uso de métodos</p><p>mais confiáveis para obter dados mais precisos.</p><p>12</p><p>Referências bibliográficas</p><p>HENRY, J. B. Diagnósticos clínicos e tratamento por métodos laboratoriais. 20.</p><p>ed. Barueri: Manole, 2008</p><p>Leles, R. N. Roteiro de Aulas práticas de Métodos Analíticos em Biomedicina,</p><p>Goiânia, 2023. Acesso em: 20/12/2023</p><p>LEWIS, S. M.; BAIN, B. J.; BATES, I. Hematologia prática de Dacie e Lewis. 9. ed.</p><p>Porto Alegre: Artmed, 2006.</p><p>LORENZI, Therezinha Ferreira. Atlas de Hematologia: Clínica Hematológica</p><p>Ilustrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006. p.674.</p><p>MATOS, J. F. et al. O hemograma nas anemias microcíticas e hipocrômicas:</p><p>aspectos diferenciais. JBPML, v. 48, n. 4, p. 255-8, 2012.</p><p>OSHIRO, Jéssica Abatzoglou Magno; Karen Miguita; Marilena. Métodos</p><p>alternativos para avaliar a concentração de Hemoglobina livre no plasma.</p><p>Centro de Patologia-Núcleo de Hematologia e Bioquímica - Instituto Adolfo Lutz, São</p><p>Paulo, v. 5, n. 8, p. 27-30, 14 nov. 2017.</p><p>ROSENFELD, Ricardo. Hemograma. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina</p><p>Laboratorial, [S.L.], v. 48, n. 4, p. 244-244, ago. 2012. FapUNIFESP (SciELO).</p><p>http://dx.doi.org/10.1590/s1676-24442012000400001.</p><p>ZAGO Marco Antonio; FALCÃO Roberto Passeto; PASQUINI Ricardo. Tratado de</p><p>Hematologia. São Paulo: Editora Atheneu, 2013.</p>