Resumo Microbiologia Geral

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<p>Resumo P1 MBI100 Prática</p><p>Microbiologia Geral (Universidade Federal de Viçosa)</p><p>Digitalizar para abrir em Studocu</p><p>A Studocu não é patrocinada ou endossada por nenhuma faculdade ou universidade</p><p>Resumo P1 MBI100 Prática</p><p>Microbiologia Geral (Universidade Federal de Viçosa)</p><p>Digitalizar para abrir em Studocu</p><p>A Studocu não é patrocinada ou endossada por nenhuma faculdade ou universidade</p><p>Baixado por Lyvia Maria (depaulalyvia@gmail.com)</p><p>lOMoARcPSD|25010491</p><p>https://www.studocu.com/pt-br?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>https://www.studocu.com/pt-br/document/universidade-federal-de-vicosa/microbiologia-geral/resumo-p1-mbi100-pratica/4416655?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>https://www.studocu.com/pt-br/course/universidade-federal-de-vicosa/microbiologia-geral/3614944?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>https://www.studocu.com/pt-br?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>https://www.studocu.com/pt-br/document/universidade-federal-de-vicosa/microbiologia-geral/resumo-p1-mbi100-pratica/4416655?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>https://www.studocu.com/pt-br/course/universidade-federal-de-vicosa/microbiologia-geral/3614944?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>Resumo P1 MBI 100 P</p><p>Demonstração da presença de microrganismos no ambiente: formam colônias</p><p>Bactérias: brilhantes</p><p>Fungos: cotonosos e opacos, unicelulares e filamentosos</p><p>Evidência de crescimento de microrganismos: fica turvo</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Preparações à fresco:</p><p>- Meio líquido</p><p>- Examinados vivos</p><p>- Com ou sem corantes vitais</p><p>- Prós: observação da viabilidade e atividades celulares (motilidade, fissão binária) tamanho e</p><p>forma natural das células</p><p>- Contras: as células são pequenas e o índice de refração próximo à água (incolores)</p><p>Preparações fixadas:</p><p>- Preparo do esfregaço e fixação ocorre antes da coloração</p><p>- Pró: melhor visualização da célula</p><p>- Contras: provocam distorções na morfologia das células, devido à exposição a agentes de</p><p>fixação e ao efeito de substâncias químicas durante a coloração.</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Preparações microscópicas fixadas: Coloração simples</p><p>Corante:</p><p>- Utilizado para aumentar o contraste das células em relação ao meio</p><p>- É um sal: um dos íons é cromóforo (dá cor ao composto).</p><p>- Corante ácido: íon cromóforo - . Ex.: ácido pícrico.</p><p>- Corante básico: íon cromóforo + . Ex.: azul de metileno, cristal violeta, fucsina e safranina.</p><p>Muito usado para corar bactérias, por seus ácidos nucleicos e componentes da parede celular</p><p>possuírem carga líquida negativa.</p><p>Coloração simples: utiliza um único corante</p><p>- Esfregaço (espalha uma gota pela lâmina e aguarda secar)</p><p>- Fixação (breve calor)</p><p>- Coloração: UM ÚNICO CORANTE</p><p>- Visualizar a forma, arranjo e tamanho das células.</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Preparação Microscópicas fixadas: Coloração Diferencial de Gram</p><p>Etapas: quatro soluções após o esfregaço na lâmina</p><p>1) Cristal Violeta (CV): colore as células de roxo escuro</p><p>2) Solução de Iodo (I), Lugol: é um mordente, ou seja, aumenta a interação entre a célula e o</p><p>CV, formando um complexo insolúvel, Cristal Violeta-Iodo (CV-I)</p><p>3) Álcool - ETAPA CRÍTICA: é um descolorante, pois dissolve lipídios da membrana abrindo</p><p>poros.</p><p>- Gram negativas: possuem mais lipídios na membrana externa, e, por isso, abrem mais poros</p><p>por sua membrana, perdendo rapidamente o complexo CV-I e ficando INCOLORES</p><p>Baixado por Lyvia Maria (depaulalyvia@gmail.com)</p><p>lOMoARcPSD|25010491</p><p>https://www.studocu.com/pt-br?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>- Gram positivas: mais resistentes à descoloração, mantém a cor violeta do CV-I.</p><p>4) Safranina/Fucsina: Corante de contraste.</p><p>- Gram negativas: rosa-avermelhado</p><p>- Gram positivas: não alteram sua cor, mantendo a cor original CV-I.</p><p>Fatores que afetam a Coloração Diferencial:</p><p>- Tempo excessivo na etapa de descoloração (álcool) leva a um falso gram negativo.</p><p>- Culturas de muita idade vão para fase estacionária (deficiência nutricional que afeta a</p><p>estrutura da membrana) -> Gramabilidade.</p><p>- Tempo excessivo na fixação por calor da lâmina.</p><p>- Número muito alto (densidade) de células no esfregaço.</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Preparo e esterilização de Meios de Cultura</p><p>Tipos de meios de cultura:</p><p> Quanto a composição do meio:</p><p>- Meios complexos ou naturais: composição química não é completamente conhecida</p><p>- Meios sintéticos: componentes químicos puros, inorgânicos e orgânicos em</p><p>quantidades definidas</p><p> Quanto a sua função ou composição:</p><p>- Meio mínimo: somente os nutrientes essenciais ao desenvolvimento.</p><p>- Meios diferenciais: diferencia microrganismos com base em características</p><p>fenotípicas</p><p>- Meio de enriquecimento: favorece o crescimento de uma espécie de microrganismo</p><p>em relação a outras espécies que possam estar presentes.</p><p>- Meio seletivo: inibe o crescimento de algumas espécies, permitindo apenas o</p><p>crescimento da população desejada.</p><p> Quanto à consistência:</p><p>- Meios líquidos: grande número de indivíduos, para estudos de crescimento,</p><p>processos de fermentação e produção de biomassa microbiana.</p><p>- Meios sólidos: número menor de indivíduos, para contagem, isolamento e</p><p>manutenção de culturas de microrganismos.</p><p>- Meios semi-sólidos: detecção de placas de lise e estudo de microrganismos</p><p>microaerófilos.</p><p>Agente solidificante – Ágar: polissacarídeo derivado de algas.</p><p>- Funde a 96°C e Solidifica à 45°C</p><p>- Suporta altas temperaturas de incubação</p><p>Tipos de microrganismos:</p><p>- Autotróficos: desenvolvem-se até mesmo em meios de cultura inteiramente minerais</p><p>- Heterotróficos: requerem compostos orgânicos como fonte de carbono.</p><p>Baixado por Lyvia Maria (depaulalyvia@gmail.com)</p><p>lOMoARcPSD|25010491</p><p>Fatores que interferem no crescimento microbiano:</p><p>- Requerimentos nutricionais</p><p>- Temperatura</p><p>- pH</p><p>- Presença de Oxigênio</p><p>- Atmosfera de incubação</p><p>- Salinidade</p><p>Métodos de esterilização: eliminam todas as formas vivas presentes em material ou ambiente.</p><p>O método varia pelo tipo de material, tempo, custo, segurança e equipamentos disponíveis</p><p>- Autoclave: calor úmido (meio de cultura)</p><p>- Estufa: calor seco</p><p>- Filtração (para termolábeis)</p><p>- Bico de Bunsen</p><p>- Cabine de segurança microbiológica/capela de fluxo laminar: Luz UV, esteriliza apenas quando</p><p>a luz uv está sobre a superfície e apenas objetos expostos a luz e o ar</p><p>Componentes do caldo nutriente (meio de cultura líquido):</p><p>- Na2HPO4: fornece íons, tamponante (H+)</p><p>- NaCl: balanço osmótico, fornece íons</p><p>Extrato de carne: fornece aminoácidos, vitaminas, carbono e nitrogênio</p><p>Peptona: fornece aminoácidos, vitaminas, carbono e nitrogênio</p><p>Água destilada: é um solvente</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Isolamento e enumeração de microrganismos em cultura pura</p><p>- O estudo das características de uma espécie só pode ser realizado com culturas puras.</p><p>- Transfere-se uma porção representativa para um meio de cultura sólido em placas de Petri,</p><p>imobiliza-se pontos discretos da superfície, multiplicação -> Colônia, cultura pura</p><p>- Colônia: agregado de células idênticas proveniente de uma única célula microbiana</p><p>- Estrias simples e compostas pelo método de esgotamento do inóculo em superfície de meio</p><p>sólido. Na composta é mais fácil de se obter colônias isoladas.</p><p>- Avaliação</p><p>da densidade de células viáveis pela contagem de colônias em placa (IDEAL: de 25 à</p><p>300. Se for muito diluída há muita chance de erro, e se for pouco, há excesso de células),</p><p>diluições seriadas e plaqueamento em mistura (“pour plate”, semeadura em profundidade)</p><p>UFC: média do nº de colônias por placa x fator de diluição / volume da alíquota</p><p>Fator de diluição: 1/número de diluições</p><p>_____________________________________________________________________________</p><p>Identificação de bactérias</p><p>Observa-se características morfológicas, culturais, fisiológicas e genéticas</p><p>Presença de enzimas auxilia na identificação:</p><p>- Enzimas extracelulares ou ligadas à parede: ação catalítica fora da célula. Transformam</p><p>substratos complexos em simples e capazes de atravessar a membrana</p><p>- Enzimas intracelulares: síntese de estruturas celulares e produção de energia. Produtos</p><p>excretados pela bactéria no meio de cultura.</p><p>Baixado por Lyvia Maria (depaulalyvia@gmail.com)</p><p>lOMoARcPSD|25010491</p><p>https://www.studocu.com/pt-br?utm_campaign=shared-document&utm_source=studocu-document&utm_medium=social_sharing&utm_content=resumo-p1-mbi100-pratica</p><p>Testes bioquímicos</p><p>a) IMViC = Indol, Vermelho de Metila, Voges-Proskauer i Citrato</p><p>-> Indol: Triptofanases sobre triptofano gera Indol detectado pelo reativo de Kovacs</p><p>Resultado positivo: presença de triptofanases, cor vermelha</p><p>Resultado negativo: ausência de triptofanases, ausência de coloração vermelha.</p><p>-> Vermelho de Metila: Produção de ácidos fórmico, acético, láctico, succínico, etc. durante</p><p>fermentação de glicose detectada pela diminuição do pH evidenciada pelo vermelho de metila.</p><p>Resultado positivo: produz ácido, pH cai, cor vermelha.</p><p>Resultado negativo: não produz ácido, pH alto, cor amarela.</p><p>-> Voges-Proskauer: Produção de ácido acético na fermentação da glicose, que se transforma</p><p>em acetoína, e reage com o reagente de Barrit (alfa-naftol 5%) e solução de KOH 40%.</p><p>Resultado positivo: presença de acetoína, oxidada a diacetil e creatina (cor rósea-</p><p>avermelhada)</p><p>Resultado negativo: ausência de acetoína, sem alteração na cor.</p><p>-> Citrato: Produção de CO2 pelo metabolismo do citrato (citrato permeasse e citrase). Em</p><p>meio Ágar Citrato de Simmons (citrato de sódio) forma-se carbonato de sódio elevando o pH</p><p>que será detectado pelo azul de bromotimol (indicador de pH)</p><p>Resultado positivo: possui citrato, pH sobe, cor azul.</p><p>Resultado negativo: sem citrato, pH não se altera, cor não se altera.</p><p>b) Fermentação de açúcares: Produção de ácido com ou sem formação de gás pela</p><p>fermentação de mono e dissacarídeos, alterando o pH.</p><p>Resultado positivo: produz ácido, pH cai, cor amarela</p><p>Resultado negativo: não produz ácido, pH não se altera, cor vermelha</p><p>Produção ou não de gás nos pequenos tubos invertidos</p><p>c) Catalase: Produção de toxinas (H2O2 e O2-) implica na presença das enzimas superóxido</p><p>dismutase e catalase, detectada pela adição de H2O2 (peróxido de hidrogênio).</p><p>Resultado positivo: presença de catalase, formação de bolhas</p><p>Resultado negativo: ausência de catalase, ausência de bolhas</p><p>d) Hidrólise de amido: Ausência de amido em bactérias que possuem amilase (hidrolisa amido).</p><p>Em meio contendo amido, o iodo reage com ele dando cor azul.</p><p>Resultado positivo: Ausência de amido por presença da amilase, zonas claras ao redor das</p><p>colônias de bactérias</p><p>Resultado negativo: Presença de amido pela ausência da amilase, apenas cor azul do iodo.</p><p>Baixado por Lyvia Maria (depaulalyvia@gmail.com)</p><p>lOMoARcPSD|25010491</p>