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FACULDADE DE TECNOLOGIA DE SINOP 1º SEMESTRE – AGRONOMIA EVELYN MARIA CAROLAINE LIMA JOANIZIO ZAHN JUNIOR TAYNARA TAISE VITÓRIA KARINE S. ROLL RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIO: OBSERVAÇÃO DAS FASES DA MITOSE EM RAIZ DE CEBOLA Sinop, MT 2024 OBJETIVO GERAL · Observar as fases da mitose; · Identificar e caracterizar os diferentes estágios da mitose. MATERIAIS UTILIZADOS 1. Cebola; 2. Raízes de cebola; 3. Palito de dente; 4. Erlenmeyer; 5. Ácido de álcool; 6. Álcool 70%; 7. Ácido clorídrico; 8. Lâmina e lamínula; 9. Bisturi; 10. Pinça anatômica; 11. Orceína acética (Não utilizamos); 12. Vidro de relógio; 13. Microscópio óptico; 14. Papel toalha; INTRODUÇÃO Mitose é um processo de divisão celular através do qual uma célula eucariótica mãe origina duas células-filhas idênticas a ela, que contêm todas as informações genéticas necessárias à sua vida. Ao longo da mitose, células observadas ao microscópio exibem aparências características, sendo possível reconhecer estágios marcantes, os quais foram escolhidos pelos cientistas para dividir o processo mitótico em fases: Prófase - início da condensação dos cromossomos. A carioteca (envoltório nuclear) desintegra-se e, no momento que os cromossomos, já bastante condensados, espalham-se na região central do citoplasma, os centros celulares vão se afastando, dando origem a um complexo conjunto de fibras denominado fuso acromático. Metáfase - cada cromossomo liga-se a fibras do fuso provenientes de pólos opostos (fibras cromossômicas) pela região do centrômero. A tensão nas fibras de pólos opostos faz com que os cromossomos permaneçam temporariamente estacionados na região equatorial da célula, formando a placa metafásica em grau máximo de condensação. Anáfase - os centrômeros se dividem e as cromátides irmãs se separam; há o encurtamento gradual das fibras cromossômicas que arrastam as cromátides-irmãs em sentidos opostos até os polos do fuso acromático. Telófase - os cromossomos, já nos polos opostos da célula, descondensam-se e voltam a produzir nucléolos. Cada conjunto cromossômico é envolvido por uma nova carioteca; surgem, assim, dois núcleos filhos com conjuntos idênticos de cromossomos. Após a formação dos núcleos filhos (cariocinese), ocorre a divisão do citoplasma, denominada citocinese. A cebola é um modelo experimental muito utilizado para análise de mitose, pois apresenta um crescimento rápido e fácil. PROCEDIMENTO 1. Colocar um bulbo de cebola em um recipiente com água de torneira, de maneira que o bulbo fique suspenso na borda do recipiente e apenas sua base entre em contato com a água; 2. Antes disso, retirar com uma gilete as raízes secas, cortando inclusive parte do eixo da cebola, e esperar até que as raízes dela fiquem com um ou dois centímetros de comprimento; 3. Quando as raízes estiverem com um ou dois centímetros de comprimento, retirá-las (Meristema apical) com uma pinça e colocá-las em um Vidro de relógio, acrescentar Álcool Acético até cobrir as raízes e deixar por 30 (trinta minutos); 4. Após esse tempo, retirar do álcool e lavar em água corrente, retornar a raiz para o Vidro de Relógio e acrescentar Ácido Clorídrico e descansar por 1 min. Lavar em água corrente e devolvê-lo no Vidro; 5. Pingar Fuscina ou Azul de Metileno e aguardar por 15 minutos; 6. Retirar a raiz do Vidro de Relógio, seccionar a região mais distal da raiz e colocá-la em uma lâmina de microscopia, acrescentar 1 gota de água e a lamínula; 7. Levar ao microscópio e, no aumento de 40x, procurar o material corado; 8. Logo após, passar para o aumento de 100x e procurar as fases; RESULTADOS A descrição do processo mitótico é indireta, baseando-se na observação de células mortas, convenientemente preparadas, mas a mitose tem duração variável de uma há algumas horas dependendo da espécie da célula e das condições do ambiente, podendo chegar mesmo a 24 horas de duração. Sendo que a temperatura ambiental pode acelerar, retardar ou mesmo bloquear o processo mitótico. A mitose caracteriza-se por: modificações nucleares (cariodierése) e por alternações citoplasmáticas (citodierése) (que ocorrem simultaneamente). A mitose em células animais é astral (há centríolos) e nos vegetais superiores é anastral (não se observa centríolos). Em tecidos que estão em crescimento verificam-se mitoses sucessivas. Ao analisarmos a preparação definitiva com células do meristema da cebola (Allium cepa) não foi possível observar os diversos eventos ocorridos na mitose. CONCLUSÃO A partir desta prática experimental, infelizmente não foi possível identificar as diferentes fases da mitose das células eucarióticas, que é um processo de extrema importância para os vegetais e animais, uma vez que lhe possibilita o seu crescimento e desenvolvimento. Repetindo-se desde o aparecimento da primeira célula eucariótica, e que permite a continuidade da vida na Terra, garantindo a estabilidade quantitativa e qualitativa do código genético dos eucariontes. De uma forma geral, podemos concluir que a mitose é um processo de divisão celular em que uma célula dá origem a duas células-filhas, geneticamente idênticas, que recebem o mesmo número e tipo de cromossomos devido ao processo de replicação semiconservativa do DNA que ocorre durante a interfase e as demais fases da mitose. Em relação à nossa expectativa quanto à planta analisada, gostaríamos de ter observado que o meristema é de fato uma zona celular com uma invulgar frequência de divisões celulares, visto que é uma zona de intenso crescimento da planta.