Coloração de GRAM

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<p>Coloração de Gram</p><p>Apresentação</p><p>1. OBJETIVO</p><p>Neste experimento, você conhecerá os princípios do método coloração de Gram. Dessa forma,</p><p>você aprenderá a morfologia bacteriana e suas reações tintoriais do método de coloração de</p><p>Gram, além de aprender como reportar o resultado e entender/resolver prováveis alterações no</p><p>resultado da coloração.</p><p>Ao final deste experimento, você deverá ser capaz de:</p><p>preparar esfregaços de amostras para a confecção do Gram;•</p><p>identificar as diferentes morfologias das bactérias;•</p><p>identificar as diferentes reações tintoriais do método de Gram;•</p><p>identificar as possíveis alterações do método de coloração de Gram;•</p><p>realizar o controle de qualidade do método de coloração de Gram;•</p><p>reportar o resultado visualizado da coloração.•</p><p>2. ONDE UTILIZAR ESSES CONCEITOS?</p><p>Saber preparar e realizar a coloração de Gram é um pré-requisito para o desenvolvimento de</p><p>competências e habilidades experimentais que possibilitam o diagnóstico das infecções por</p><p>bactérias. Além disso, esse método de coloração auxilia a identificação do agente etiológico, já</p><p>que possibilita a visualização das características morfológicas e tintoriais desse micro-organismo.</p><p>3. O EXPERIMENTO</p><p>No experimento, alguns instrumentos e reagentes serão utilizados para reconhecer as diferentes</p><p>morfologias microscópicas leveduriformes e suas reações tintoriais no método de Gram.</p><p>Baseando-se na capacidade da parede celular dos micro-organismos reterem o corante violeta</p><p>genciana durante um tratamento com lugol (iodo).</p><p>4. SEGURANÇA</p><p>Nesta prática serão utilizados luvas, máscara e jaleco, também chamado de guarda pó. Apesar</p><p>da prática não gerar um risco para o aluno, esses três equipamentos de proteção são essencias</p><p>para o ambiente de laboratório. As luvas irão evitar algum possível corte ou contaminação com</p><p>agentes nocivos à pele, a máscara protege contra possíveis aerossóis e o jaleco protege o corpo</p><p>como um todo.</p><p>5. CENÁRIO</p><p>O ambiente do experimento apresenta um bico de bunsen em cima da bancada de trabalho,</p><p>assim como os insumos e instrumentos. Você deverá selecioná-los e utilizá-los de modo a</p><p>garantir a correta execução dos experimentos.</p><p>Bons estudos.</p><p>Sumário teórico</p><p>COLORAÇÃO DE GRAM</p><p>Uma etapa crucial no processo de identificação do agente etiológico é a caracterização</p><p>morfológica do micro-organismo. Etapa que embasa a escolha de quais procedimentos serão</p><p>adequados para a realização de provas bioquímicas e/ou a utilização de meios de cultura.</p><p>Entretanto, os micro-organismos são incolores por natureza, sendo necessários métodos de</p><p>coloração para auxiliar na visualização da morfologia bacteriana.</p><p>Devido à necessidade da visualização e diferenciação das bactérias, o método desenvolvido em</p><p>1884 pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, permitiu essa coloração (método</p><p>de Gram) que está sendo utilizada até os dias atuais como método básico de triagem e</p><p>confirmação desses micro-organismos.</p><p>A técnica de coloração de Gram é uma técnica de coloração diferencial, pois reage de maneira</p><p>diferente nos distintos tipos de bactérias, com base na estrutura da parede celular.</p><p>A parede celular das bactérias Gram positivas é composta por uma espessa camada de</p><p>peptideoglicanos (proteínas + carboidratos). Algumas também possuem uma camada de ácido</p><p>teicóico externa à camada de peptideoglicanos. O Lugol (iodo-iodeto de potássio), utilizado no</p><p>método de coloração de Gram, fixa o cristal violeta a este tipo de parede celular, corando as</p><p>bactérias em roxo.</p><p>As bactérias que possuem uma camada delgada de peptidoglicano (1 a 3 nm), seguida por uma</p><p>segunda camada denominada membrana externa (7 a 8 nm), não possuem a capacidade de reter</p><p>o complexo primário de cristal violeta/lugol após o tratamento com o álcool. Contudo, para a</p><p>visualização da morfologia bacteriana, essas bactérias com uma fina parede celular são</p><p>contrastadas com Safranina ou fucsina e são classificadas como bactérias Gram-negativas.</p><p>As colorações Gram-positiva e Gram-negativa de bactérias permitem a visualização da morfologia</p><p>geral das células bacterianas, promovendo a classificação desses micro-organismos em</p><p>bastonetes e em cocos, por exemplo. Essa classificação é importante para a taxonomia dos</p><p>micro-organismos, além de auxiliar na avaliação da pureza da cultura e no diagnóstico preliminar</p><p>de pacientes. Contudo, é importante salientar que alterações no procedimento (técnica e</p><p>reagentes) de coloração podem ocasionar prejuízo no resultado da microscopia.</p><p>http://srd.yahoo.com/S=2766679:WS1/R=2/K=hans%2Bgram%2Bbiography/TID=DEFL_12:testg/H=0/T=1049484443/F=a2d9f9f74d25486443817760c038466f/*http:/www.whonamedit.com/doctor.cfm/696.html</p><p>REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS</p><p>MOYES, RB; REYNOLDS, J; BREAKWELL, DP. Differential staining of bacteria: gram stain. Curr</p><p>Protoc Microbiol. 2009 Nov; Appendix 3:Appendix 3C.</p><p>OPLUSTIL, C. P., Microbiologia Clínica. SARVIER): São Paulo. 339p. 2004.</p><p>ANVISA, AGÊNCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA. Segurança e Controle de</p><p>Qualidade no Laboratório de Microbiologia Clínica, 2005, 37p.</p><p>KONNEMAN, E.W.; et al.  Diagnóstico Microbiológico, Texto e Atlas Colorido. Ed. Médica e</p><p>Científica: RJ. 1465p. 2001.</p><p>Roteiro</p><p>INSTRUÇÕES GERAIS</p><p>1. Neste experimento, você irá executar os procedimentos adequados para promover</p><p>experimentos de microbiologia. Dessa forma, você poderá analisar o resultado</p><p>encontrado,  podendo fazer a classificação da bactéria presente nesse experimento.</p><p>2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da experiência</p><p>virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do Laboratório Virtual.</p><p>3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial” presente neste</p><p>Roteiro.</p><p>4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as instruções para</p><p>realização desta prática na subseção “Procedimentos”.</p><p>5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação dos</p><p>Resultados”.</p><p>RECOMENDAÇÕES DE ACESSO</p><p>DICAS DE DESEMPENHO</p><p>Para otimizar a sua experiência no acesso aos laboratórios virtuais, siga as seguintes dicas de</p><p>desempenho:</p><p>Feche outros aplicativos e abas: Certifique-se de fechar quaisquer outros aplicativos ou</p><p>abas que possam estar consumindo recursos do seu computador, garantindo um</p><p>desempenho mais eficiente.</p><p>•</p><p>Navegador Mozilla Firefox: Recomendamos o uso do navegador    Mozilla Firefox,</p><p>conhecido por seu baixo consumo de recursos em comparação a outros navegadores,</p><p>proporcionando uma navegação mais fluida.</p><p>•</p><p>Aceleração de hardware: Experimente habilitar ou desabilitar a aceleração de hardware no</p><p>seu navegador para otimizar o desempenho durante o acesso aos laboratórios virtuais.</p><p>•</p><p>Requisitos mínimos do sistema: Certifique-se de que seu computador atenda aos</p><p>requisitos mínimos para acessar os laboratórios virtuais. Essa informação está disponível em</p><p>nossa Central de Suporte.</p><p>•</p><p>Monitoramento do sistema: Utilize o Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) para</p><p>verificar o uso do disco, memória e CPU. Se estiverem em 100%, considere fechar outros</p><p>aplicativos ou reiniciar a máquina para otimizar o desempenho.</p><p>•</p><p>Teste de velocidade de internet: Antes de acessar, realize um teste de velocidade de</p><p>internet para garantir uma conexão estável e rápida durante o uso dos laboratórios virtuais.</p><p>•</p><p>Atualizações do navegador e sistema operacional: Mantenha seu navegador e sistema</p><p>operacional atualizados para garantir compatibilidade e segurança durante o acesso aos</p><p>laboratórios.</p><p>•</p><p>PRECISA DE AJUDA?</p><p>Em caso de dúvidas ou dificuldades técnicas, visite nossa Central de Suporte para encontrar</p><p>artigos de ajuda e informações para usuários. Acesse a Central de Suporte através do link:</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br</p><p>Se preferir, utilize os QR Codes abaixo para entrar em contato via WhatsApp ou ser direcionado</p><p>para a Central de Suporte. Estamos aqui para ajudar! Conte conosco!</p><p>https://www.mozilla.org/pt-BR/firefox/new/</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br/</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br/</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br/</p><p>https://suporte-contato.algetec.com.br/</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br/</p><p>DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO</p><p>MATERIAIS NECESSÁRIOS</p><p>·    Acendedor;</p><p>·    Inoculadora;</p><p>·    Álcool Etílico;</p><p>·    Bico de Bunsen;</p><p>·    Fucsina;</p><p>·    Lâminas;</p><p>·    Lugol;</p><p>·    Microscópio;</p><p>·    Óleo de imersão;</p><p>·    Placa de cultura;</p><p>·    Pinça metálica;</p><p>·    Pissetas;</p><p>·   Soro fisiológico.</p><p>PROCEDIMENTOS</p><p>https://suporte-contato.algetec.com.br/</p><p>https://suporte-virtual.algetec.com.br/</p><p>1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO</p><p>Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. Nesse</p><p>experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas, óculos de proteção e máscara.</p><p>2. PREPARANDO A AMOSTRA</p><p>Goteje o soro fisiológico na lâmina. Feito isso, ligue o bico de Bunsen abrindo a válvula de gás e,</p><p>com o acendedor, acenda a chama e ajuste até que se torne azul. Utilizando a alça inoculadora,</p><p>perto ao bico de Bunsen, retire uma pequena porção da amostra biológica que será examinada e</p><p>coloque-a na lâmina. Depois, passe a lâmina sob a chama para fixar o material.</p><p>3. CORANDO A LÂMINA</p><p>Mova a lâmina para a pia. Em seguida, cubra a lâmina com violeta de genciana por 1 minuto.</p><p>Depois, enxague em água corrente. Cubra a lâmina com lugol, também por 1 minuto e, em</p><p>seguida, lave a lâmina em água corrente. Molhe a lâmina com álcool por aproximadamente 10</p><p>segundos e enxague em água corrente. Por fim, cubra a lâmina com fucsina por 30 segundos e</p><p>lave em água corrente.</p><p>4. REALIZANDO A LEITURA</p><p>Mova a lâmina para o microscópio. Execute todos os ajustes necessários para visualização.</p><p>Selecione a objetiva de 100x e goteje o óleo de imersão sobre a lâmina. Observe o resultado</p><p>através da lente ocular.</p><p>Anote as suas observações. Retire a lâmina do microscópio e desligue.</p><p>5. REPETINDO A LEITURA</p><p>Realize os procedimentos anteriores para as lâminas 2.</p><p>6. AVALIANDO OS RESULTADOS</p><p>Siga para a seção “Avaliação dos Resultados” e responda de acordo com o que foi observado</p><p>nos experimentos, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.</p><p>AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS</p><p>1.     Analisando a coloração obtida na primeira e na segunda lâmina, é possível determinar se</p><p>o resultado é Gram positivo ou negativo? Caso seja possível, classifique justificando a</p><p>resposta.</p><p>2.     Qual objetivo de realizar o experimento em 2 lâminas? O que se espera observar?</p><p>TUTORIAL</p><p>1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO</p><p>Visualize os equipamentos de proteção individual clicando com o botão esquerdo do mouse na</p><p>câmera com o nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto</p><p>superior esquerdo da tela.</p><p>Abra o armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas.</p><p>Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do</p><p>mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas, óculos de proteção e</p><p>máscara.</p><p>Feche as portas do armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as abas da porta.</p><p>Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Geral” ou</p><p>através do atalho do teclado “Alt+1”.</p><p>2. PREPARANDO A AMOSTRA</p><p>Goteje o soro fisiológico na lâmina clicando com o botão direito do mouse sobre o contagotas e</p><p>selecione a opção “Lâmina 1”.</p><p>Goteje o soro fisiológico na lâmina clicando com o botão direito do mouse sobre o contagotas e</p><p>selecione a opção “Lâmina 2”.</p><p>Ligue o bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse na válvula.</p><p>Ajuste o bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse no bico de Bunsen.</p><p>Configure a intensidade da chama clicando com o botão esquerdo do mouse sobre os parâmetros</p><p>exibidos no menu inferior esquerdo da tela.</p><p>Acenda o bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse no acendedor.</p><p>Esterilize a alça inoculadora clicando com o botão direito do mouse sobre a inoculadora e</p><p>selecione a opção “Esterilizar”.</p><p>Colete a amostra biológica clicando com o botão direito do mouse sobre a alça inoculadora e</p><p>selecione a opção “Colocar amostra na lâmina 1".</p><p>Esterilize a alça inoculadora clicando com o botão direito do mouse na alça e selecione a opção</p><p>“Esterilizar”.</p><p>Colete a amostra biológica clicando com o botão direito do mouse sobre a alça inoculadora e</p><p>selecione a opção “Colocar amostra na lâmina 2".</p><p>Esterilize a alça inoculadora clicando com o botão direito do mouse na alça e selecione a opção</p><p>“Esterilizar”.</p><p>Realize a fixação da amostra na lâmina 1 clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina 1</p><p>e selecione a opção “Mover para o bico de Bunsen".</p><p>Realize a fixação da amostra na lâmina 2 clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina 2</p><p>e selecione a opção “Mover para o bico de Bunsen".</p><p>Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Geral”.</p><p>Desligue o bico de bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse na válvula.</p><p>Visualize as lâminas clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome</p><p>“Lâminas”.</p><p>Mova a lâmina 1 para a pia clicando com o botão direito do mouse sobre ela e selecione a opção</p><p>“Colocar no suporte”.</p><p>3. CORANDO A LÂMINA</p><p>Mova a pisseta com o cristal violeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta</p><p>contendo o corante violenta-de-genciana.</p><p>Despeje a violeta-de-genciana pressionando o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta.</p><p>Aguarde a fixação do corante na lâmina por 1 minuto. O cronômetro aparecerá na tela para</p><p>auxiliar o processo. Avance a escala de tempo para acelerar o processo pressionando e</p><p>arrastando com o botão esquerdo do mouse sobre o local indicado.</p><p>Lave a lâmina com água corrente clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e</p><p>selecione a opção “Lavar em água corrente”.</p><p>Mova a pisseta com o lugol clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta contendo o</p><p>lugol.</p><p>Despeje o lugol pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta.</p><p>Aguarde a fixação do corante na lâmina por 1 minuto. Avance a escala de tempo para acelerar o</p><p>processo pressionando e arrastando com o botão esquerdo do mouse sobre o local indicado.</p><p>Lave a lâmina com água corrente clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e</p><p>selecione a opção “Lavar em água corrente”.</p><p>Mova a pisseta com o álcool clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta.</p><p>Despeje o álcool na lâmina pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta.</p><p>Lave a lâmina com água corrente clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e</p><p>selecione a opção “Lavar em água corrente”.</p><p>Mova a pisseta com a fucsina clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta contendo</p><p>o corante.</p><p>Despeje a fuccina pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre a pisseta.</p><p>Aguarde a fixação do corante na lâmina por 20 segundos. Avance a escala de tempo para</p><p>acelerar o processo pressionando e arrastando com o botão esquerdo do mouse sobre o local</p><p>indicado.</p><p>Lave a lâmina com água corrente clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e</p><p>selecione a opção “Lavar em água corrente”.</p><p>Mova a lâmina para a mesa clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e selecione a</p><p>opção “Colocar na mesa”.</p><p>Realize os procedimentos anteriores da lâmina 1, agora na lâmina 2.</p><p>4. REALIZANDO A LEITURA</p><p>Mova a lâmina 1 clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina 1 e selecione a opção</p><p>“Mover para o microscópio".</p><p>Ligue o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse no interruptor localizado na base</p><p>do equipamento.</p><p>Se preferir, manuseie o microscópio usando as setas, clique com o  botão esquerdo do mouse no</p><p>canto inferior esquerdo em  "Usar microscópio com as setas".</p><p>Para visualizar as partes do microscópio com os nomes, clique com o botão esquerdo do mouse</p><p>no canto inferior esquerdo em "Habilitar nomes".</p><p>Goteje o óleo de imersão clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o conta gotas.</p><p>Movimente as lentes objetivas pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o revólver e</p><p>movimentando o cursor à direita ou à esquerda. Visualize a lâmina na objetiva de 100x.</p><p>Visualize a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o ícone “Ver ocular” no canto</p><p>superior direito da tela.</p><p>Realize o ajuste do foco pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o parafuso</p><p>macrométrico e movimentando o cursor à direita ou à esquerda.</p><p>Se for necessário um ajuste mais apurado do foco, gire o botão micrométrico pressionando o</p><p>botão esquerdo do mouse sobre ele e movimentando o cursor à direita ou à esquerda.</p><p>Para movimentar a lâmina à frente ou para trás, gire a peça superior do charriot pressionando</p><p>com o botão esquerdo do mouse sobre o charriot e movimentando o cursor à direita ou à</p><p>esquerda.</p><p>Se necessário, efetua as configurações de posicionamento. Lembre-se que, para movimentação,</p><p>deve-se clicar com o botão esquerdo do mouse sobre a área desejada e movimentar o cursor do</p><p>mouse para direita ou esquerda.</p><p>Retire a lâmina do microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina de vidro.</p><p>5. REPETINDO A LEITURA</p><p>Realize os processos realizados anteriormente com a lâmina 2.</p><p>Visualize o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome</p><p>“Microscópio”.</p><p>Desligue o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse no interruptor localizado na</p><p>base do equipamento.</p><p>6. AVALIANDO OS RESULTADOS</p><p>Siga para a seção “Avaliação dos Resultados” e responda de acordo com o que foi observado</p><p>nos experimentos, associando também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema.</p><p>Pré Teste</p><p>1)</p><p>Qual a diferença entre as bactérias Gram positivas das Gram negativas?</p><p>A) Presença do lipopolissacarídeo (LPS) em sua composição estrutural;</p><p>B) Presença de uma camada espessa de peptideoglicano;</p><p>C) Presença de LPS e peptídeoglicano em sua composição estrutural.</p><p>2)</p><p>Quais são os componentes utilizados pelo método de Gram?</p><p>A) Azul de metileno e fucsina fenicada;</p><p>B) Violeta genciana, lugol, álcool cetona e Safranina;</p><p>C) Azul de metileno, lugol, álcool cetona e fucsina.</p><p>3)</p><p>As bactérias são transparentes, sendo frequente o uso de corantes para a visualização da</p><p>forma e do tipo de arranjo desses microrganismos. Sobre o termo “Gram”, muito utilizado</p><p>neste método, marque a assertiva que indica a sua origem.</p><p>A) O termo Gram se origina do nome Christian Gram, pesquisador dinamarquês que, em 1884,</p><p>desenvolveu o método de coloração que passou a dividir as bactérias em dois grandes</p><p>grupos: Gram positivas e Gram negativas;</p><p>B) O termo surgiu com a pesquisa do bacteriologista alemão, Robert Koch, sobre métodos de</p><p>fixação e de coloração de bactérias e suas respectivas identificações e classificações através</p><p>do microscópio;</p><p>C) O termo Gram surgiu após uma modificação do método de Ziehl Neelsen, classificando as</p><p>bactérias em dois grandes grupos: bactérias álcool-ácido resistentes e não álcool-ácido</p><p>resistentes.</p><p>4)</p><p>Considerando o Gram uma etapa crucial no processo de identificação do agente etiológico,</p><p>marque a assertiva correta.</p><p>A) Esse método de coloração nos permite visualizar a morfologia bacteriana, auxiliando a escolha</p><p>correta das provas bioquímicas utilizadas na identificação do microrganismo;</p><p>B) As bactérias apresentam pigmentos em suas estruturas, o que facilita sua visualização através</p><p>da microscopia;</p><p>C) O lipopolissacarídeo permite a classificação das bactérias como Gram positivas por ter a</p><p>capacidade de absorver a violeta genciana.</p><p>5)</p><p>Em relação aos conhecimentos adquiridos sobre o método de coloração de Gram, marque a</p><p>assertiva correta.</p><p>A) Uma bactéria Gram positiva, após a coloração por esse método, apresenta uma coloração</p><p>rosada;</p><p>B) As bactérias apresentam pigmentos azuis em suas estruturas, o que facilita a visualização de</p><p>bactérias Gram positivas;</p><p>C) Uma bactéria Gram negativa, após a coloração por esse método, apresenta uma coloração</p><p>rosada.</p><p>Experimento</p><p>* Este laboratório também está disponível para dispositivos Android.</p><p>Conteúdo interativo disponível na plataforma de ensino!</p><p>Pós Teste</p><p>1) Quais são as etapas para uma correta coloração de Gram?</p><p>A) Confecção do esfregaço com a bactéria a ser analisada; fixação do esfregaço; cobrir a lâmina</p><p>com violeta de genciana por 1 minuto; lavar; cobrir a lâmina com lugol por 1 minuto; lavar;</p><p>lavar com álcool rapidamente (10 segundos); lavar; lâmina com fucsina por 30 segundos;</p><p>lavar;</p><p>B) Confecção do esfregaço com a bactéria a ser analisada; fixação do esfregaço; cobrir a lâmina</p><p>com violeta de genciana por 2 minutos; lavar; cobrir a lâmina com lugol por 2 minutos; lavar;</p><p>lavar com álcool rapidamente (10 segundos); lavar; lâmina com fucsina por 30 segundos;</p><p>lavar;</p><p>C) Confecção do esfregaço com a bactéria a ser analisada; fixação do esfregaço; cobrir a lâmina</p><p>com violeta de genciana por 1 minuto; lavar; lavar com álcool rapidamente (10 segundos);</p><p>lavar; lâmina com fucsina por 30 segundos; lavar.</p><p>2) Em relação as etapas do método de coloração de Gram, marque a assertiva correta.</p><p>A) Durante o processo da coloração de Gram, podemos suprimir a etapa da fixação sem que</p><p>ocorra uma redução da qualidade da microscopia;</p><p>B) Durante a etapa de descoloração, é necessário deixar o álcool cetona agir no esfregaço por 1</p><p>minuto;</p><p>C) A etapa da Safranina ou fucsina pode ser suprimida no método de coloração de Gram.</p><p>3) Qual afirmativa não interfere diretamente na visualização das estruturas bacterianas após a</p><p>coloração de Gram?</p><p>A) Realizar um esfregaço bem concentrado de material bacteriano;</p><p>B) Esperar secar a suspensão de salina / material bacteriano para fixar o material na lâmina;</p><p>C) Realizar um esfregaço com uma quantidade extremamente baixa do material bacteriano.</p><p>A imagem abaixo do Gram corresponde a:4)</p><p>A) cocos Gram negativos;</p><p>B) bacilos ou bastonetes Gram negativos;</p><p>C) bacilos os bastonetes Gram positivos.</p><p>A imagem abaixo do Gram corresponde a:5)</p><p>A) bastonetes Gram negativos;</p><p>B) cocos Gram positivos;</p><p>C) bacilos ou bastonetes Gram positivos.</p><p>Atividade</p><p>Responda as questões da seção “Avaliação dos Resultados” do “Roteiro” e anexe aqui o seu</p><p>relatório.</p>