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CAMILA MEDEIROS Técnicas de Biologia Molecular Aplicadas ao Diagnóstico 1. A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) revolucionou o diagnóstico molecular por sua alta sensibilidade e especificidade. Qual é o principal objetivo da PCR em diagnósticos clínicos? a) Identificar proteínas específicas em amostras biológicas. b) Amplificar fragmentos específicos de DNA. c) Sequenciar o genoma completo de organismos. d) Avaliar a expressão de RNA mensageiro. e) Produzir proteínas recombinantes em larga escala. Resposta correta: b. A PCR amplifica segmentos de DNA, permitindo a detecção de patógenos ou mutações genéticas específicas. 2. A transcriptase reversa PCR (RTPCR) é amplamente utilizada para a detecção de vírus de RNA, como o SARSCoV2. Qual é a etapa adicional que diferencia o RTPCR do PCR convencional? a) A utilização de primers específicos. b) A síntese de DNA complementar (cDNA) a partir de RNA. c) O uso de uma enzima de restrição para cortar o DNA. d) A separação dos fragmentos em gel de agarose. e) A inclusão de marcadores fluorescentes na reação. Resposta correta: b. O RTPCR utiliza a transcriptase reversa para converter RNA em cDNA antes da amplificação. 3. Em testes moleculares de DNA, o Southern blot é uma técnica clássica. Para que é geralmente utilizada essa técnica? a) Detectar mutações em proteínas específicas. b) Identificar sequências específicas de DNA em uma amostra. c) Analisar a expressão de RNA em diferentes tecidos. d) Separar fragmentos de DNA com base em seu peso molecular. e) Quantificar moléculas de RNA presentes em uma célula. Resposta correta: b. O Southern blot é usado para identificar sequências de DNA específicas após separação por eletroforese. 4. A técnica de eletroforese em gel é fundamental na biologia molecular. Que propriedade dos fragmentos de DNA permite sua separação no gel de agarose? a) O conteúdo de nucleotídeos adenina e timina. b) O tamanho dos fragmentos de DNA. c) A quantidade de proteínas associadas ao DNA. d) A presença de pontes de hidrogênio nas bases nitrogenadas. e) A carga positiva nas moléculas de DNA. Resposta correta: b. A eletroforese separa os fragmentos de DNA de acordo com seu tamanho, movendoos em um campo elétrico. 5. A técnica de microarray é usada para análise de expressão gênica em larga escala. Qual é a principal aplicação clínica dessa técnica? a) Diagnóstico de doenças genéticas específicas. b) Avaliação simultânea da expressão de milhares de genes. c) Detecção de vírus em fluidos biológicos. d) Sequenciamento completo de exomas. e) Identificação de proteínas estruturais celulares. Resposta correta: b. O microarray permite avaliar a expressão de milhares de genes em diferentes condições ou tecidos. CAMILA MEDEIROS 6. A técnica de CRISPRCas9 trouxe avanços significativos para a edição genética. Qual é a principal vantagem dessa técnica em relação às anteriores? a) Uso de enzimas inespecíficas para cortar DNA. b) Capacidade de editar genes com alta precisão e especificidade. c) Amplificação rápida de fragmentos de RNA. d) Detecção imediata de mutações somáticas. e) Produção de proteínas recombinantes diretamente em células. Resposta correta: b. O CRISPRCas9 permite a edição precisa de sequências específicas de DNA com grande eficiência. 7. A hibridização in situ é uma técnica usada para localizar sequências específicas de DNA ou RNA em tecidos. Em qual situação essa técnica é particularmente útil? a) Identificação de bactérias em culturas microbiológicas. b) Localização de genes em cromossomos em cortes histológicos. c) Amplificação de ácidos nucleicos em amostras líquidas. d) Sequenciamento rápido de genomas virais. e) Avaliação quantitativa de proteínas no plasma sanguíneo. Resposta correta: b. A hibridização in situ é usada para visualizar genes ou RNA em cortes de tecido, auxiliando em diagnósticos. 8. A técnica de Northern blot é análoga ao Southern blot, mas foca em moléculas de RNA. Qual informação clínica essa técnica pode oferecer? a) O tamanho e a presença de sequências específicas de RNA. b) A quantidade de DNA genômico em uma célula. c) A expressão proteica de genes específicos. d) A mutação em regiões codificantes do DNA. e) A estabilidade de proteínas no citoplasma. Resposta correta: a. O Northern blot detecta moléculas de RNA, permitindo a análise de expressão gênica. 9. A espectrometria de massa aplicada à biologia molecular auxilia no diagnóstico de diversas condições. Qual é uma das principais aplicações dessa técnica? a) Identificar mutações cromossômicas em exames citogenéticos. b) Detectar e quantificar pequenas moléculas, como metabólitos. c) Separar fragmentos de DNA por tamanho. d) Amplificar sequências genômicas de interesse. e) Avaliar a expressão gênica em células tumorais. Resposta correta: b. A espectrometria de massa é usada para detectar e quantificar pequenas moléculas, como ácidos nucleicos e metabólitos. 10. A clonagem molecular é uma técnica básica na biologia molecular. Qual é o objetivo principal dessa técnica no diagnóstico clínico? a) Gerar cópias idênticas de organismos. b) Produzir cópias específicas de genes para estudo. c) Identificar polimorfismos em sequências genéticas. d) Avaliar a expressão de proteínas recombinantes em tecidos. e) Sequenciar exomas para detecção de mutações. Resposta correta: b. A clonagem molecular permite a replicação de genes específicos para análise ou produção de proteínas recombinantes.