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Material de Estudo 52: Biologia Molecular – Engenharia Genética e Biotecnologia 1. O que é a técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase)? a) Uma técnica para sequenciar DNA. b) Uma técnica para amplificar (produzir muitas cópias) de um fragmento específico de DNA in vitro. c) Uma técnica para inserir genes em células. d) Uma técnica para cortar DNA em pontos específicos. e) Uma técnica para separar fragmentos de DNA por eletroforese Resposta: b) Justificativa: A PCR é uma técnica muito utilizada em biologia molecular para amplificar (multiplicar exponencialmente) um fragmento específico de DNA, utilizando ciclos de aquecimento e resfriamento, DNA polimerase termoestável e primers (oligonucleotídeos iniciadores). 2. Qual é a função das enzimas de restrição (endonucleases de restrição) em biologia molecular? a) Amplificar DNA. b) Cortar DNA em sequências específicas. c) Ligar fragmentos de DNA. d) Transcrever RNA em DNA. e) Traduzir RNA em Proteína Resposta: b) Justificativa: Enzimas de restrição reconhecem sequências específicas de DNA (sítios de restrição) e cortam a dupla fita de DNA nesses pontos, gerando fragmentos de restrição. 3. O que é um vetor de clonagem? a) Uma enzima de restrição. b) Uma molécula de DNA (ex: plasmídeo, bacteriófago) utilizada para transportar e replicar um fragmento de DNA de interesse em uma célula hospedeira. c) Uma célula hospedeira utilizada para clonagem. d) Uma técnica para sequenciar DNA. e) Uma técnica para transferir DNA para células Resposta: b) Justificativa: Vetores de clonagem são moléculas de DNA (geralmente plasmídeos bacterianos ou vírus modificados) capazes de se replicar em uma célula hospedeira e que são utilizadas para transportar e replicar um fragmento de DNA de interesse (ex: um gene) inserido artificialmente. 4. Qual é a principal diferença entre clonagem molecular e clonagem reprodutiva? a) Clonagem molecular produz cópias idênticas de um organismo; clonagem reprodutiva produz cópias de um gene. b) Clonagem molecular produz cópias de um gene ou fragmento de DNA; clonagem reprodutiva produz um organismo geneticamente idêntico a outro. c) Clonagem molecular é usada em plantas; clonagem reprodutiva é usada em animais. d) Clonagem molecular envolve a técnica de PCR; clonagem reprodutiva não. e) Não há diferença, os termos significam a mesma coisa Resposta: b) Justificativa: Clonagem molecular é a produção de múltiplas cópias de um fragmento de DNA (ex: um gene) in vitro ou em uma célula hospedeira. Clonagem reprodutiva é a produção de um organismo inteiro geneticamente idêntico a outro (ex: a ovelha Dolly). 5. Qual técnica de biologia molecular é utilizada para identificar a presença de uma sequência específica de DNA em uma amostra, utilizando uma sonda de DNA ou RNA marcada? a) PCR. b) Eletroforese em gel. c) Southern blot (para DNA) ou Northern blot (para RNA). d) Sequenciamento de DNA. e) Western Blot Resposta: c) Justificativa: Southern blot (para DNA) e Northern blot (para RNA) são técnicas de hibridização que utilizam uma sonda (fragmento de DNA ou RNA marcado) complementar à sequência de interesse para detectar a presença dessa sequência em uma amostra (após separação por eletroforese e transferência para uma membrana). 6. O que é um organismo transgênico (organismo geneticamente modificado - OGM)? a) Um organismo que teve seu genoma sequenciado. b) Um organismo que contém um gene (ou genes) de outra espécie, inserido artificialmente por técnicas de engenharia genética. c) Um organismo clonado. d) Um organismo resultante de cruzamentos seletivos. e) Um organismo com mutação. Resposta: b) Justificativa: Um organismo transgênico (OGM) é aquele que recebeu material genético de outra espécie (transgene) por meio de técnicas de engenharia genética (manipulação do DNA in vitro), e esse material genético exógeno é incorporado ao seu genoma e expresso. 7. Qual das seguintes técnicas não é utilizada para introduzir DNA em células? a) Transformação bacteriana (ex: por choque térmico). b) Transfecção (em células eucarióticas). c) Eletroporação. d) Biobalística (gene gun). e) PCR. Resposta: e) Justificativa: A PCR é uma técnica para amplificar DNA, não para introduzi-lo em células. As demais opções são métodos de transformação (introdução de DNA exógeno em células): transformação bacteriana (geralmente por choque térmico ou eletroporação), transfecção (em células eucarióticas, usando métodos químicos ou físicos), eletroporação (uso de pulsos elétricos) e biobalística (uso de microprojéteis revestidos com DNA).