Prévia do material em texto
BIOQUÍMICA HEPÁTICA Funções do fígado: - metabolismo de carboidratos, lipídios, proteínas, hormônios e vitaminas - desintoxicação, excreção de metabolitos e de outras substancias toxicas - digestão (principalmente de gordura) - produção da maioria dos fatores de coagulação - produção de proteínas que participam da resposta imune e inflamatória Doenças hepáticas X insuficiência hepática: - quaisquer dos vários distúrbios que causam lesão de hepatócitos e/ou colestase - o fígado é acometido, secundariamente, por doenças primarias situadas em outros tecidos, como doença intestinal inflamatória e pancreatite - insuficiência hepática pode ser decorrente de doença hepática, sendo reconhecida pela insuficiência em depurar o sangue das substancias normalmente excretadas pelo fígado e pela falha na síntese das substancias normalmente produzidas pelo fígado Testes laboratoriais para diagnostico de doença hepática e insuficiência hepática: - mensuração da atividade sérica de enzimas que detectam lesão de hepatócitos (ALT, AST e SDH) - mensuração da atividade sérica de enzimas que detectam colestase (FA e GGT) - testes que avaliam a função hepática (albumina, ureia, ácidos biliares, bilirrubina e fibrinogênio) Teste para detecção de lesão de hepatócitos: Alanina Amino Transferase (ALT) - também conhecida como Transamina Glutâmico Pirúvica (TGP) - é uma enzima de extravasamento que se apresenta livre no citoplasma - em cães e gatos a maior concentração de ALT é verificada em hepatócitos - o aumento da atividade sérica de ALT em cães e gatos pode indicar morte de hepatócitos ou lesão subletal dessas células. Também deve-se considerar a possibilidade de necrose ou de lesão subletal de células musculares - em cães e gatos várias doenças hepáticas podem induzir o aumento da atividade sérica de ALT. Hipóxia, alterações metabólicas que ocasionam acumulo de lipídios nos hepatócitos, toxinas bacterianas, inflamação, necropsia hepática, vários medicamentos e substancias químicas toxicas podem causar lesão de hepatócitos e subsequente extravasamento de ALT - a concentração de ALT nos hepatócitos de equinos e ruminantes é baixa, consequentemente, nessas espécies, a atividade sérica de ALT não é útil na detecção de doença hepática Aspartano Amino Transferase (AST) - Também conhecida como transaminase glutâmico oxalacética (TGO). - Presente em maior concentração nos hepatócitos e nas células musculares (esqueléticos e cardíacas) de todas as espécies. - Portanto, AST não é uma enzima hepatoespecifica. - Em cães e gatos, embora a AST seja menos hepatoespecifica do que a ALT, ela é mais sensível para a detecção de alguns tipos de lesão de hepatócitos do que a ALT. - Em equinos e ruminantes, com frequência, determina-se a atividade de AST como teste de detecção de rotina da lesão de hepatócitos Sorbitol desidrogenase/iditol desidrogenase - É uma enzima de extravasamento que se encontra livre no citoplasma. Está presente em alta concentração nos hepatócitos de cães, gatos, equinos e ruminantes: contudo, nessas espécies, a sua concentração em outros tecidos é baixo. - SDH é uma enzima hepatoespecífica - Em equinos e ruminantes, a SDH é muito mais especifica na detecção de lesão de hepatócitos do que a AST. Glutamato desidrogenase - Os mesmos tipos de lesões de hepatócitos, reversíveis e ireversíveis, que ocasionam aumento da atividade sérica de ALT provocam aumento da atividade sérica de GLDH Fosfatase alcalina (ALP) - Enzima de indução presente nas membranas celulares: - Sintetizada por vários tecidos ou órgãos, como o figado, ossos, rins, intestinos, pâncreas e placenta. - Aumento da produção de ALP e de sua atividade sérica comumente é notado quando há colestase, maior atividade osteoblastica, indução por alguns medicamentos (principalmente em cães) e vários doenças crônicas. Testes para detecção de colestase - No fígado, a fosfatase alcalino está presente nos células do epitélio biliar e nas membranas caniculares de hepatócitos. - Várias doenças hepatobiliares podem ocasionas aumento da atividade sérica de ALP devido à maior produção da enzima, à solubilização de membranas pela ação de ácido biliares e ao extravasamento de vesículas de membranas, após lesão celular. - Em cães, as doenças colestáticas podem resultar em aumento marcante da atividade sérica de ALP - Quando a colestase é a causa do aumento da atividade sérica de ALP, as concentrações séricos de bilirrubina total e de ácidos biliares podem estar simultaneamente aumentados A y-glutamilhansferase (GGT) - é considerada uma enzima de indução. No entanto, a lesão hepática aguda pode provocar aumento imediato da atividade sérica de GGT, possivelmente: por causa da liberação de fragmentos de membrana que contem GGT - Para a detecção de doença hepática em cães, a GGT é mais específica, porém menos sensível, se comparada à ALP. - Para a detecção de doença hepática em gatos, a GGT é mais sensível, porém menos específica do que a ALP. - Em cães e gatos, a determinação concomitante das atividades séricas de ALP e GGT é mais confiável no diagnóstico de doença hepatobiliar do que quando mensuradas isoladamente. - Em equinos e bovinos, em geral, a GGT é considerada mais sensível na detecção de colestase do que a ALP. Testes de função hepática - Os testes de função hepática incluem mensurações das concentrações séricas de substâncias que normalmente são removidas do sangue pelo fígado e, em seguida, metabolizados ou excretadas pelo sistema biliar (ex: bilirrubina, ácidos biliares, amônia, colesterol) e de substâncias normalmente sintetizadas pelo fígado (p. ex., albumina, globulinas, ureia, colesterol e fatores de coagulação). Alterações do metabolismo de bilirrubinas: - O aumento da concentração sérica de bilirrubina (hiperbilirubinemia) pode ser decorrente de três principais mecanismos patológicos: 1. Aumento da produção de bilirrubina (devido à destruição acelerada de eritrócitos) 2. Menor absorção ou conjugação de bilirrubina pelos hepatócitos 3. Menor excreção de bilirrubina (colestase). Ácidos biliares séricos - Os ácidos biliares são sintetizados nos hepatócitos a partir do colesterol - Na maioria dos animais, o ácido cólico e o ácido quenodesoxicólico são os ácidos biliares primários. Após sua síntese, os ácidos biliares são conjugados com aminoácidos (principalmente taurina, na maioria dos animais) antes de sua secreção na bile. - São liberados no duodeno e participam da emulsificação de gorduras, digestão e absorção de lipídios e vitaminas lipossolúveis - As possíveis causas de alterações da concentração sérica de ácidos biliares são: 1. Anormalidades da circulação porta (p. ex, shunt portossistêmico, displasia microvascular hepatoportal, shunt adquirido secundário à cirrose hepática grave). 2. Redução da massa hepática funcional. Esse é um importante fator em vários doenças hepáticas difusas (p. ex., hepatite, necrose, hepatopatia por glicocorticoide) que resultam em lesão de hepatócitos suficiente para prejudicar a absorção de ácidos biliares do sangue portal. 3. Menor excreção de ácidos biliares na bile. Isso pode ser decorrente de colestase hepática ou pós-hepática de qualquer causa (obstrução, tumefação de hepatócitos, neoplasia, inflamação), colestase funcional ou associada à sepse, ou extravasamento do ducto biliar ou da vesícula biliar. Amônia - Predominantemente amônio, NH4+) é largamente produzida por bactérias do trato gastrointestinal durante a digestão normal, sendo absorvida no trato intestinal e alcança a corrente sanguínea. - É removida da circulação porta pelo fígado, no qual é utilizada na sintese de ureia e proteínas. - Alteração no fluxo sanguíneo ao fígado ou na quantidade muito reduzida de hepatócitos funcionais pode resultar em aumento da concentração de amônia no sangue. - O aumento do teor plasmática de amônia é maiscomum em animais com shunt portossitêmico (shunt congénito ou secundário à cirrose grave). - Também a elevação do teor de amónia no sangue pode ser verificada quando há perda de 60%, ou mois, da massa hepática funcional. - Bovinos intoxicados por ureia ou que consumiram alimentos contaminados com essa substância também ocorre aumento. Albumina - O fígado é o local de síntese de toda a albumina. Em geral, não se constata hipoalbuminemia até que ocorra perda de 60 a 80% da função hepática. - No entanto, parece haver algumas diferenças entre as espécies em relação à ocorrência de hipoalbuminemia na doença hepática. URINÁLISE - permite a avaliação do sistema urinário - avaliação de doença renal (verifica se o rim está mantendo a densidade da urina) - avaliação de pacientes diabéticos - teste de triagem de todas as espécies - permite a detecção precoce de algumas enfermidades (proteinuria, hematúria) - monitoramento de pacientes com doenças renais - deve ser realizada rapidamente após a coleta (até 30 minutos) - refrigerada a 4 graus - antes da analise deve ser levada à temperatura ambiente e homogeneizada Composição da urina: - 95% agua - 5 % eletrólitos - soluto: ureia, creatinina, ácido úrico, CL, Na, K, PO4 - outras substancias: hormônios, vitaminas e medicamentos - elementos que não fazem parte do filtrado plasmático inicial: células, cristais, muco (presença de mucina que reveste a mucosa uterina), bactérias (a urina contamina-se na parte distal da uretra). Método de coleta: - micção natural 1. desprezar os primeiros jatos da urina 2. evitar coleta por compressão manual da bexiga 3. coletar em frascos limpos e descartáveis fornecidos pelo laboratório 4. evitar aceitar coletores fornecidos pelo proprietário - cateterismo vesical 1. cateter urinário especifico para a espécie e tamanho 2. utilizar lubrificante 3. nesse tipo de coleta é comum encontrar alterações na amostra - cistocentese 1. método de eleição para obtenção da urina para a cultura bacteriana 2. pode ocorrer complicações em casos de coleta inadequada Exame físico da urina: 1. volume: em mL 2. cor: - coloração normal: tipicamente transparente a amarela - variações da cor: Hematúria (presença de sangue/coloração avermelhada e escura) Colúria (urina muito escura) Hemoglobinúria (coloração avermelhada devido a presença de hemoglobina) Mioglobinuria Bilirrubinuria (coloração alaranjada devido a presença de bile) 3. odor: - o odor normal da urina é conferido pela presença de ácidos orgânicos voláteis (amônia, ureia...) * odor pútrido: indica necrose tecidual de vias urinarias * odor adocicado: presença de corpos cetonicos, associados a diabetes melitos e acetonemia da vaca leiteira * odor amoniacal: observado na urina de animais com infecção bacteriana 4. aspecto/turbidez: - avalia-se o grau de turbidez/transparência da urina, ou seja, elementos que não são dissolvidos - límpida, semi-turva e turva - pode ser influenciado pela concentração urinaria - leucócitos (em excesso gera um aspecto turvo/esverdeado), eritrócitos, cristais, bactérias, muco, lipídios e materiais contaminantes podem aumentar a turbidez da amostra - avaliar esse parâmetro logo após a coleta - avaliar o sedimento urinário para investigar a turbidez 5. densidade urinaria - representa a concentração dos sólidos em solução urinaria, ou seja, quanto de soluto (potássio, sódio) está dissolvido nos solventes - teste muito útil para avaliar o nível de hidratação do animal - retrata o grau de reabsorção tubular ou da concentração renal - avalia a capacidade do rim em concentrar ou em diluir a urina - utilização do refratômetro - a densidade urinaria é um teste muito útil para a avaliação da capacidade de diluição e concentração renal, pois a perda da habilidade de concentração costuma ser o primeiro sinal de doença tubular renal - valores de referência: 1.015 a 1.025 Exame químico da urina: - técnica: - imersão completa e rápida da tira reagente em uma amostra bem homogeneizada - eliminação do excesso de urina na borda do recipiente - esperar o período especifico de tempo para que as reações aconteçam (de 30 a 60 segundos) - comparação das reações coloridas com a tabela fornecida belo fabricante, sempre utilizando uma boa luz 1. pH urinário: - animais carnívoros: 5,5 a 7,0 (fosfato de sódio e cálcio) - animais herbívoros: 7,0 a 8,5 (bicarbonato de cálcio) 2. glicose - não deve estar presente em animais saudáveis - causas de glicosuria: hiperglicemia, lesão do túbulo proximal renal, diabetes, estresse em felinos 3. cetonas - a urina fisiológica é livre de corpos cetonicos (ácido acético e acetona) - causas de cetonúria: distúrbios no metabolismo dos ácidos graxos e carboidratos, jejum prolongado, anorexia, lipidose hepática, cetoacidose diabética, hepatopatias 4. proteínas - não deve ser encontrada - as tiras reagentes detectam principalmente albuminas - causas de proteinuria: lesão renal, glomerulonefropatia, defeitos de transporte tubular, inflamação e infecção do trato urinário 5. bilirrubina - não é normal ser encontrada - causas de bilirrubinuria: distúrbios hepáticos e hemolíticos ou em obstruções das vias biliares como colestase 6. sangue, hemoglobina e mioglobina - não são normais 7. nitritos - em caso positivo é indicativo de presença de bactérias (deve-se estar atento, pois existem bactérias que podem estar presentes mas não liberam nitrito) 8. leucócitos: de 0 a 5 por campo 9. urobilinogenio: pigmento presente na urina Avaliação do sedimento urinário: - avaliação microscópica: contagem em câmera de Neubauer ou Kcell - pode ser encontrado: Células (leucócitos, eritrócitos, células epiteliais) Cilindros (é o precipitado proteico. Indicativo de lesão tubular/renal) Cristais Bactérias Leveduras Relação proteína/creatinina urinaria (relação UPC): - a quantificação da proteinuria é um teste de grande valor na avaliação das doenças renais, constituindo-se em marcador diagnostico e prognostico, além de ser fundamental no acompanhamento do tratamento das glomerulopatias - o padrão-ouro é a determinação da proteinuria na urina de 24 horas (P24h), devido à grande variação na concentração da proteína urinaria ao longo do dia - é um teste indicado para avaliação de lesão dos glomérulos quando ainda não há evidencias clinicas ou até mesmo laboratoriais de patologia no sistema urinário - canino: - não proteinúrico: 0,5 - felino: - não proteinúrico: 0,4 Urocultura: - é o cultivo de urina utilizada para verificar a presença de microrganismos localizados na urina, na uretra e nos rins - neste exame podemos diagnosticar a infecção do trato urinário das vias inferiores: uretrite (doença inflamatória e infecciosa da uretra) e cistite OBS: - piúria: é a presença de leucócitos em excesso na urina. Indicativo de processos inflamatórios