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Material de Estudo 2: Genética Molecular 1. Em um experimento, pesquisadores introduziram uma mutação pontual em um gene responsável pela produção de uma enzima essencial em bactérias. Observou-se que a enzima mutante apresentava uma alteração na sequência de aminoácidos, mas ainda mantinha uma atividade catalítica reduzida. Qual dos seguintes tipos de mutação pontual é mais provável de ter ocorrido? • a) Deleção de um par de bases. • b) Inserção de um par de bases. • c) Substituição de uma base que resulta em um códon sinônimo. • d) Substituição de uma base que resulta em um códon de terminação prematuro. • e) Substituição de uma base que resulta em um aminoácido diferente. Resposta: e) Substituição de uma base que resulta em um aminoácido diferente. Justificativa: A substituição de uma base pode alterar um códon, resultando na incorporação de um aminoácido diferente na proteína. Se a alteração não inativar completamente a enzima, ela ainda pode apresentar atividade reduzida. 2. Durante a replicação do DNA em células eucarióticas, a enzima DNA polimerase III é responsável pela síntese da maior parte da nova fita de DNA. Qual das seguintes características da DNA polimerase III é essencial para garantir a fidelidade da replicação? • a) Capacidade de iniciar a síntese de DNA sem um primer. • b) Atividade de exonuclease 3'→5' para correção de erros. • c) Alta taxa de processividade, sintetizando longos trechos de DNA sem se dissociar. • d) Capacidade de desenrolar a dupla hélice de DNA. • e) Atividade de ligase para unir os fragmentos de Okazaki. Resposta: b) Atividade de exonuclease 3'→5' para correção de erros. Justificativa: A atividade de exonuclease 3'→5' permite que a DNA polimerase remova nucleotídeos incorporados incorretamente, garantindo a fidelidade da replicação. 3. Em um estudo sobre a regulação da expressão gênica em células de levedura, pesquisadores observaram que a adição de galactose ao meio de cultura induz a transcrição de genes envolvidos no metabolismo desse açúcar. Qual dos seguintes mecanismos de regulação gênica é mais provável de estar envolvido? • a) Repressão por um repressor que se liga ao DNA na ausência de galactose. • b) Ativação por um ativador que se liga ao DNA na presença de galactose. • c) Atenuação da transcrição por um sinal de terminação prematura na ausência de galactose. • d) Edição do RNA mensageiro para alterar a sequência de códons. • e) Modificação covalente de histonas para silenciar a transcrição dos genes. Resposta: b) Ativação por um ativador que se liga ao DNA na presença de galactose. Justificativa: A galactose atua como um indutor, ligando-se a um ativador transcricional que, por sua vez, se liga ao DNA e estimula a transcrição dos genes envolvidos no metabolismo da galactose. 4. A técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é amplamente utilizada para amplificar sequências específicas de DNA. Qual das seguintes etapas do PCR é responsável pela separação das fitas de DNA da dupla hélice? • a) Anelamento dos primers às sequências complementares de DNA. • b) Extensão da fita de DNA pela DNA polimerase. • c) Desnaturação do DNA por aquecimento. • d) Ligação dos fragmentos de DNA pela DNA ligase. • e) Adição de nucleotídeos trifosfato à fita de DNA em crescimento. Resposta: c) Desnaturação do DNA por aquecimento. Justificativa: O aquecimento do DNA a altas temperaturas quebra as pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas, separando as fitas da dupla hélice. 5. Em um experimento de clonagem de genes, pesquisadores inseriram um gene de interesse em um plasmídeo bacteriano, juntamente com um gene de resistência a antibiótico. Qual das seguintes finalidades o gene de resistência a antibiótico desempenha nesse experimento? • a) Induzir a expressão do gene de interesse. • b) Facilitar a inserção do gene de interesse no plasmídeo. • c) Permitir a seleção de bactérias que incorporaram o plasmídeo. • d) Aumentar a taxa de transcrição do gene de interesse. • e) Codificar uma proteína que marca as células transformadas. Resposta: c) Permitir a seleção de bactérias que incorporaram o plasmídeo. Justificativa: O gene de resistência a antibiótico permite que apenas as bactérias que incorporaram o plasmídeo sobrevivam em um meio de cultura contendo o antibiótico.