Ligação e Mapeamento Genético em Eucariotos

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Ligação e mapeamento genético em eucariotos
	INTRODUÇÃO
Depois que Sutton sugeriu a teoria cromossômica da hereditariedade em 1903, várias evidências foram acumuladas de que os genes estavam nos cromossomos
Como existem muito mais genes do que cromossomos espera-se que vários genes possam estar no mesmo cromossomo
Como os cromossomos tem forma linear é esperado que os genes também estejam alinhados ao longo dos cromossomos como "contas de um colar"(isto foi demonstrado por Surtevant em 1913)
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A SEGREGAÇÃO INDEPENDENTE SEMPRE É VÁLIDA ?
Qual seria a relação que os genes tem uns com os outros quando no mesmo cromossomo ? (animação)
Podemos determinar que um gene está no mesmo cromossomo pela quebra da 2a Lei de Mendel (a da segregação independente) Ex. Drosófilas (figura)
A explicação seria que os locus bn e det estão tão próximos uns dos outros e no mesmo cromossomo. Como conseqüência estão associados e movem-se juntos durante a meiose
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NOMENCLATURA
Os locus carregados em um mesmo cromossomo são ditos "ligados"
Grupos de ligação n. haplóide de autossomos + os cromossomos sexuais
Ex.1 Drosófila tem 5 grupos de ligação (2N = 8; 3 autossomos + X + Y)
Ex.2 Humano tem 24 grupos de ligação (2N = 46; 22 autossomos + X + Y)
	Obs. Quando não há cromossomos sexuais, considera-se "grupo de ligação" o número haplóide. Ex. Tomateiro (2N = 24 ou seja possui 12 grupos de ligação)
Quando o fenótipo da progênie combina características de ambos os parentais, é chamado de “recombinante” ou “não parental”
Quanto ao arranjo dos alelos em dihíbridos pode ser Cis ou Trans (figura)
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Os genes estão na configuração Cis quando ambos os selvagens ou ambos os recessivos se encontram em um mesmo cromossomo. Trans quando se tem um selvagem e um recessivo no mesmo cromossomo.
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Quanto ao modo de representação dos alelos nos cromossomos
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Recombinantes são o produto da meiose possuidores de combinações alélicas diferentes das células haplóides que formaram o diplóide meiótico
Os produtos Recombinantes de uma meiose diplóide são mais prontamente detectados em um cruzamento de um heterozigoto e um testador recessivo
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Cruzamento teste em Drosófila para 2 locus
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CRUZAMENTO DE "DOIS PONTOS“
É a análise de 2 locus. É útil para evidenciar associação ou não de locus de um mesmo cromossomo
A freq. de recombinantes pode ser usada como indicadora da distância entre os genes. Um % de recombinantes = 1 centimorgan.
No exemplo, os locus bn e det estão distanciados de 0,5 centimorgans (figura)
A relação centimorgan / pares de base é variável entre espécies, sexo, regiões do cromossomo.
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CRUZAMENTO DE “TRÊS PONTOS“
É a análise de 3 locus, cada um segregando 2 alelos. É útil para verificar a posição relativa de cada um dos locus
A análise de 3 locus, cada um segregando 2 alelos controlando a cor do corpo (preto b); cor do olho (púrpura pr) e a morfologia da asa (curvada c) (figura)
Os dados são posicionados em "classes recíprocas" colocando-se as parentais como primeiras e as duplo recombinantes como as últimas
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POSSÍVEIS RESULTADOS DE UM CRUZAMENTO TESTE DA PROGÊNIE DE UM TRIHÍBRIDO b pr c 
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RESULTADOS DE UM CROSSING OVER
ENTRE OS LOCUS PRETOS E PÚRPURA
EM CROMOSSOMOS DROSÓFILA 
RESULTADOS DE UM CROSSING OVER DUPLO
 NAS REGIÕES b - pr - c
EM CROMOSSOMOS DE DROSÓFILA 
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Distâncias de mapa
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Mapa cromossômico de Drosófila
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Cálculos
Número observado de Duplo Recombinantes (NODR)
= 60+72= 132; a freq. é 132/15.000 = 0,88%
Freqüência esperada de Duplo Recombinantes (dois eventos independentes ocorrendo simultaneamente 	regra de multiplicação)
(prob. de b pr) x (prob. de pr c) = 0,059 x 0,195 = 0,0115 = 1,15%. Esta percentagem de 15.000 da 172 que é o Número esperado de Duplo recombinantes (NEDR) 
Coeficiente de Coincidência (CC) = NODR /NEDR = 132/172 = 0,77 = 77%. Isto significa que somente 77% dos Crossing Over esperados realmente ocorreram
Coeficiente de Interferência (CI)= 1 - CC = 1- 0,77 = 0,23 = 23%. Isto significa que 23% dos Crossing Over esperados não ocorreram
A interferência é positiva quando a ocorrência do primeiro Crossing Over reduz a chance de ocorrência do segundo
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A demonstração citológica do Crossing Over em milho (experimento de H. Creighton e B. McClintock)