Tese_doutorado
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Tese_doutorado


DisciplinaFisiologia Veterinária I1.737 materiais10.909 seguidores
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UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO 
FACULDADE DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS DE RIBEIRÃO PRETO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Estudo dos mecanismos de resistência às quinolonas em 
enterobactérias isoladas de alguns estados brasileiros 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Luciene Andrade da Rocha Minarini 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Ribeirão Preto 
2008 
UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO 
FACULDADE DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS DE RIBEIRÃO PRETO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Estudo dos mecanismos de resistência às quinolonas em 
enterobactérias isoladas de alguns estados brasileiros 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Ribeirão Preto 
2008 
Tese de Doutorado apresentada ao Programa de 
Pós-Graduação em Biociências Aplicadas à 
Farmácia para obtenção do Título de Doutor em 
Biociências Aplicadas à Farmácia 
 
Área de Concentração: Biociências Aplicadas à 
Farmácia. 
 
Orientada: Luciene Andrade da Rocha Minarini 
Orientadora: Profa. Dra. Ana Lucia da Costa Darini 
FOLHA DE APROVAÇÃO 
 
Luciene Andrade da Rocha Minarini 
 
Estudo dos mecanismos de resistência às quinolonas em enterobactérias 
isoladas de alguns estados brasileiros 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Aprovado em: 
 
 
Banca Examinadora 
 
Prof. Dr. ____________________________________________________________ 
Instituição: _____________________________ Assinatura:____________________ 
 
Prof. Dr. ____________________________________________________________ 
Instituição: _____________________________ Assinatura:____________________ 
 
Prof. Dr. ____________________________________________________________ 
Instituição: _____________________________ Assinatura:____________________ 
 
Prof. Dr. ____________________________________________________________ 
Instituição: _____________________________ Assinatura:____________________ 
 
Prof. Dr. ____________________________________________________________ 
Instituição: _____________________________ Assinatura:____________________ 
Tese de Doutorado apresentada ao Programa de 
Pós-Graduação em Biociências Aplicadas à 
Farmácia para obtenção do Título de Doutor em 
Biociências Aplicadas à Farmácia 
 
Área de Concentração: Biociências Aplicadas à 
Farmácia. 
 
Orientadora: Profa. Dra. Ana Lucia da Costa Darini 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Este trabalho de pesquisa foi realizado nos seguintes 
centros de pesquisa: 
 
Como laboratório principal, Laboratório Especial de 
Bacteriologia e Epidemiologia Molecular (LEBEM) do 
Departamento de Análises Clínicas, Toxicológicas e 
Bromatológicas da Faculdade de Ciências Farmacêuticas 
de Ribeirão Preto, USP, Ribeirão Preto, São Paulo, Brasil, 
sob orientação da Profa. Dra. Ana Lucia da Costa Darini. 
 
Durante o estágio de doutorado no exterior, Service de 
Bactériologie-Virologie, Hôpital de Bicêtre, Assistance 
Publique/Hôpitaux de Paris, Faculté de Medicine de 
l\u2019Université Paris XI, Paris, França, sob supervisão do Prof. 
Dr. Patrice Nordmann. 
 
Laboratório de Genética Molecular e Bioinformática, do 
Departamento de Genética da Faculdade de Medicina de 
Ribeirão Preto, USP, nas dependências da Fundação 
Hemocentro de Ribeirão Preto, onde foi realizada parte dos 
experimentos de seqüenciamento, sob coordenação do 
Prof. Dr. Wilson de Araújo da Silva Júnior. 
 
 
 
 
Os meus mais sinceros agradecimentos: 
 
A minha orientadora, . 
À Izabel Cristina V. Palazzo, pelo apoio durante a técnica de determinação da 
concentração inibitória mínima para os antibióticos testados frente às 
bactérias estudadas e ajuda nos experimentos de hibridação. Agradeço, 
particularmente, seus constantes e valiosos conselhos científicos. 
. Ana Lucia da Costa Darini, por ter me acolhido em 
sua equipe de pesquisa, por sua disponibilidade e por seus valiosos 
ensinamentos durante a pós-graduação. Agradeço ainda por todo seu apoio e 
empenho no desenvolvimento deste estudo. 
À Joseane C. Ferreira, agradeço pela importante contribuição na 
padronização da técnica de extração de proteínas de membrana externa e 
pelo apoio na realização do experimento de eletroforese de campo pulsado. 
Aos docentes do Laboratório de Bioquímica do Departamento de Física e 
Química, por disponibilizarem a ultracentrífuga durante a técnica de extração 
de proteínas de membrana externa. 
À Nathalia A. C. Trevisani, aluna de iniciação científica, por sua importante 
contribuição na detecção de mecanismos de resistência bacteriana aos 
antibióticos \u3b2-lactâmicos e nos experimentos de extração de porinas. 
Ao doutorando Eduardo C. Clímaco, por sua contribuição nas técnicas de 
PCR e seqüenciamento utilizadas na determinação do contexto genético da 
resistência aos antibióticos \u3b2-lactâmicos. 
Aos integrantes do LEBEM, André Pitondo Silva e Leonardo Andrade, pelas 
constantes discussões científicas. 
À Adriana Aparecida Márquez, pela colaboração na técnica de 
seqüenciamento realizada do Hemocentro. 
Ao Professor Patrice Nordmann, meu supervisor de estágio no exterior, por 
ter me dado a honra de integrar à sua renomada equipe de pesquisa e pela 
grande oportunidade de aprendizado. 
Ao Dr. Laurent Poirel, meu co-supervisor de estágio de doutorado no exterior, 
pelo espírito de pesquisa que me foi transmitido e pelos seus importantes 
conselhos científicos. 
Ao Dr. Vincent Cattoir, por todos os conselhos ao curso dos experimentos de 
clonagem e análise do contexto de determinantes gênicos avaliados neste 
trabalho. 
Aos membros do laboratório de pesquisa na França, em especial, Pauline 
Mugnier, Samy Figueiredo, Sandrine Bernabeu, Carla Sofia Silva, Luisa 
Meira, Hedi Mammeri, Amelie Carrër, Delphine Girlich, Gaëlle Cuzon e 
Fateméh Nandari, por toda ajuda e colaboração que me foi dada ao longo do 
meu estágio na França. Agradeço a disponibilidade e os ensinamentos de 
todos. 
Ao Dr. George A. Jacoby (EUA), Dr. David Livermore (Inglaterra), Dr. Patrice 
Nordmann (França) e Dr. Jorge Sampaio (Instituto Fleury, SP, Brasil) por 
terem gentilmente cedido linhagens-controle imprescindíveis para a realização 
deste trabalho. 
Aos diretores clínicos do Lemos Laboratórios de Análises Clínicas de Juiz de 
Fora e Laboratório de Microbiologia do Hospital das Clínicas de Ribeirão 
Preto, os quais cederam amostras bacterianas avaliadas neste estudo. Em 
especial, agradeço Juarez Rocha pela manutenção e identificação desta 
coleção bacteriana. 
À CAPES, pela bolsa de doutorado que me foi concedida no Brasil e no 
exterior. 
À FAPESP, pelo apoio financeiro concedido a este trabalho. 
 
 
 
A minha mais profunda gratidão 
 
Ao meu marido, Paulo, com quem compartilhei momentos de felicidade, de 
grandes aprendizados e de incertezas neste início de vida acadêmica. 
Agradeço sempre seu companheirismo, seu amor, e sua intensa amizade. 
Aos meus queridos pais, Marlene e Nelson, e minha irmã Líllian, pelo 
importante apoio e incentivo durante estes anos e, principalmente, durante 
minha estadia no exterior. 
Aos meus sogros, Dorvalina e Adilson, e minha cunhada Idelzina, pelos 
constantes incentivos. Agradeço a sincera amizade e o grande apoio durante 
estes anos. 
Aos queridos amigos do LEBEM, Cristina, Joseane, Eduardo, André, 
Leonardo, Nathalia, Amanda, Priscila, Rubens e Ilana pelo apoio, pela 
amizade, convivência e simpatia de todos. 
Aos meus amigos do laboratório em Paris, Pauline, Samy, Sofia, Luisa, 
Vincent e Fateméh que me acolheram, agradeço pela receptividade, apoio e 
amizade de todos. 
Aos meus queridos