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Projeto Integrador – Farmácia e Biomedicina 
Nome do Discente
COLORAÇÃO DE GRAM
OBJETIVO
• Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina da
microbiologia.
• Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática
demonstrativa através da realização de atividades
teórico-prática.
METODOLOGIA
Passo 1: Coleta do material e Preparo do 
esfregaço
• Obter material coletado com swab (amostra de 
orofaringe) para confecção do esfregaço. 
• Os esfregaços devem ser preparados rodando o swab
suavemente pela lâmina limpa;
• Antes de realizar a coloração o esfregaço deverá estar 
seco. 
• O esfregaço foi fixado na lâmina com calor brando
(50ºC), passando a lâmina 3 vezes através da chama
da lamparina de vidro.
Passo 2: Coloração de Gram
• Cobrir a área com a solução de cristal-violeta e deixar agir
por 1 minuto.
• Decantar o cristal-violeta e lavar suavemente com a própria
solução de iodo ou água da torneira.
• Cobrir a área do esfregaço com a solução de iodo durante
cerca de um minuto.
• Descorar a lâmina com a mistura álcool-acetona (1:1), até
que o solvente escorra incolor. Alternar com água corrente
(jato fraco). O tempo usualmente utilizado nesta etapa é de
cerca de 10 segundos.
Observação: Lavagem excessiva nesta etapa pode causar a
retirada do cristal violeta das células Gram-positivas, assim
como, a pouca descoloração pode resultar em pouca retirada do
cristal violeta, ocasionando uma tonalidade azulada nas
bactérias Gram-negativas.
• Cobrir o esfregaço com a solução de safranina ou Fucsina
básica 0.1% a 0.2%), por 30 segundos.
• Lavar com água corrente.
• Deixar secar ao ar, em temperatura branda (50ºC).
• Após secagem da lâmina efetuar a leitura microscópica em
objetiva de 40X e 100X com óleo de imersão.
COLORAÇÃO DE GRAM
METODOLOGIA
Figura 1 - Esquematização da coloração de Gram
COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 1 – Microscópico Óptico Figura 2 – Lamparina de vidro
COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 3 – Lâminas de vidro limpas e 
desengorduradas 7,5 cm x 2,5 cm 
Figura 4 – Swab Estéril
COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 5 – Cronômetro Figura 6 – Pinça de madeira para tubo 
de Ensaio
COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 7 – Salina estéril 0,9% Figura 8 – Óleo de imersão 
COLORAÇÃO DE GRAM
Figura 9 – Kit para coloração de Gram
COLORAÇÃO DE GRAM
RESULTADOS E DISCUSSÃO
• Após a execução da atividade prática o alunos deverão responder a atividade proposta
utilizando o material complementar para auxiliá-los.
Atividade Proposta
1) Descreva a diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas.
2) Esquematize a sequência da técnica de coloração de Gram.
Observação para correção: O aluno pode fazer o esquema utilizando as ferramentas do word/power
point ou adicionar imagem disponível na internet.
3) Reporte os resultados encontrados em sua lâmina. Sua coloração representa a existência de
bactérias Gram-positiva ou Gram-negativa.
Os alunos deverão arquivar uma foto da lâmina preparada.
°
COLORAÇÃO DE GRAM
CONCLUSÕES
Apresente aqui suas conclusões no formato de tópicos
• Neste item, demostre o seu entendimento sobre a atividade prática desenvolvida e o assunto
correlato. Apresente a conclusão, ou as conclusões, que seus resultados dão suporte.
• Neste item, você irá descrever se os objetivos foram alcançados ou não.
• Apresente também as limitações da experimentação e quais outros experimentos poderiam ampliar
o entendimento do assunto. Aqui você pode ainda apresentar possíveis aplicações práticas dos seus
resultados.
EXAME A FRESCO
OBJETIVO
• Conhecer as técnicas básicas utilizadas na rotina laboratorial. 
• Aplicar os conhecimentos obtidos na aula prática 
demonstrativa através da realização de atividades teórico-
prática.
METODOLOGIA
• Identificar a lâmina com um lápis de cera;
Colocar duas a três gotas de salina a 0,9% em uma lâmina de
vidro.
• Tocar com a ponta de um palito em vários pontos das fezes,
transferindo uma pequena porção para a lâmina de
microscopia.
Espalhar as fezes, fazendo um esfregaço e examinar ao
microscópio.
• A espessura do esfregaço não deve impedir a passagem de
luz.
Coloque uma lamínula sobre a amostra, tomando o cuidado
para não formar bolhas de ar;
• Percorra todos os campos da lâmina como mostra a imagem,
iniciando a microscopia na objetiva de 10X com aumento
progressivo para a objetiva de 40X.
Figura 1 – Técnica leitura microscópica
EXAME A FRESCO
Figura 2 – Caneta para vidro ou lápis 
de cera
Figura 1 – Microscópico Óptico
EXAME A FRESCO
Figura 3 – Lâminas de vidro limpas e 
desengorduradas 7,5 cm x 2,5 cm 
Figura 4 – Lamínulas
EXAME A FRESCO
Figura 5 – Bastão de vidro Figura 6 – Salina estéril 0,9% 
EXAME A FRESCO
RESULTADOS E DISCUSSÃO
• Após a execução da atividade prática o alunos
deverão responder a atividade proposta
utilizando o material complementar para
auxiliá-los.
• O aluno deverá consultar o atlas de
parasitologia da Universidade Federal
Fluminense e observar se na microscopia da
lâmina confeccionada por ele se é possível
identificar a presença de trofozoítos de Giardia
duoenalis, Entamoeba coli e Entamoeba
histolytica/dispar .
Caso o aluno não observe a presença de
trofizoítos em sua lâmina similar a imagem do
Atlas, basta descrever que não observou e
adicionar a imagem dos trofozoítos presentes no
Atlas disponível para consulta no material
complementar .
Atividade Proposta
1) Descreva quais são as parasitoses que apresentam
trofozoítos como forma evolutiva parasitária.
Para responder consulte o material complementar.
2) Descrever se os achados encontrados na sua lâmina
são referentes a presença de trofozoítos.
Para isto compare com as imagens do Atlas que consta no 
material complementar.
EXAME A FRESCO
CONCLUSÕES
Apresente aqui suas conclusões no formato de tópicos
• Neste item, demostre o seu entendimento sobre a atividade prática desenvolvida e o assunto 
correlato. Apresente a conclusão, ou as conclusões, que seus resultados dão suporte.
• Neste item, você irá descrever se os objetivos foram alcançados ou não. 
• Apresente também as limitações da experimentação e quais outros experimentos poderiam ampliar 
o entendimento do assunto. Aqui você pode ainda apresentar possíveis aplicações práticas dos seus 
resultados.
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
OBJETIVO
• Conhecer as técnicas básicas utilizadas na
rotina laboratorial.
• Aplicar os conhecimentos obtidos na aula
prática demonstrativa através da realização de
atividades teórico-prática.
METODOLOGIA
Procedimento: Técnica de sedimentação
espontânea (Hoffman, Lutz, Pons e Janer)
• Usar luvas descartáveis durante a execução
do procedimento.
• Em um bécker, homogeneizar, com auxílio de
bastão de vidro ou palito de madeira, cerca de
2 – 4 g de fezes em 20 mL de água;
• Filtrar a suspensão por meio de gaze dobrada
4 vezes, em cálice de fundo cônico apropriado,
com capacidade de 125 mL;
• Completar o volume com água e deixar em
repouso por no mínimo 1 horas para que
ocorra sedimentação espontânea;
• Após, com auxílio de uma pipeta de Pasteur,
recolher do fundo do cálice amostra da porção
inferior do sedimento, depositar sobre lâmina,
adicionar 1 gota de lugol, cobrir com lamínula e
proceder a leitura microscópica.
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
Figura 1 – Peneira/parasitofiltro Figura 2 – Cálice de sedimentação 
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
Figura 3 – Bécker Figura 4 – Gaze 
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
Figura 5 – Pipeta de Pasteur Figura 6 - Lâmina e Lamínula 
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
Figura 6 – Lugol parasotológico Figura 6 – Microscópico Óptico
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Atividade Proposta
1) Descreva a finalidade da técnica da
sedimentação espontânea, mencionando as
formas parasitárias que podem ser
observadas através desta técnica.
Após a execução da atividade prática o alunos
deverão responder a atividade proposta utilizando
o material complementar para auxiliá-los.
Figura 2 – Sequênciada técnica 
Sedimentação espontânea 
EXAME PARASITOLÓGICO DE 
FEZES
CONCLUSÕES
Apresente aqui suas conclusões no formato de tópicos
• Neste item, demostre o seu entendimento sobre a atividade prática desenvolvida e o assunto 
correlato. Apresente a conclusão, ou as conclusões, que seus resultados dão suporte.
• Neste item, você irá descrever se os objetivos foram alcançados ou não. 
• Apresente também as limitações da experimentação e quais outros experimentos poderiam ampliar 
o entendimento do assunto. Aqui você pode ainda apresentar possíveis aplicações práticas dos seus 
resultados.