microscópios ópticos

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Microscópios Ópticos 
Adriana Fontes 
Departamento de Biofísica e Radiobiologia 
ÓPTICA GEOMÉTRICA: REFLEXÃO 
ÓPTICA GEOMÉTRICA: REFRAÇÃO 
n = c/v 
lei de snell 
Luz branca v = λ f 
n = c/v 
ÓPTICA GEOMÉTRICA: LENTES 
DIFRAÇÃO 
Difração é o espalhamento da luz que acontece quando a luz passa por objetos 
ou aberturas bem pequenas. Após a luz ser espalhada pelo objeto tem-se uma 
padrão de difração que consiste em máximos e mínimos de intensidade. 
senθ = 1.22(λ/d) abertura / objeto circular -> 
MICROSCÓPIOS 
lâmpada e condensador 
MICROSCÓPIOS 
ocular 
objetiva 
MICROSCÓPIOS 
1680 1700 1845 
1998 
MICROSCÓPIOS 
1900 1930 
1960 
1970 
1971 1985 
1998 
MICROSCÓPIOS 
lâmpada e condensador 
ocular 
objetiva e foco 
ocular 
objetiva e foco 
lâmpada e condensador 
direto invertido 
Transmissão vs. Reflexão 
MICROSCÓPIOS -> FORMAÇÃO DA IMAGEM 
MICROSCÓPIOS ANTIGOS: 
h
H
f
‘
 X
Xfm
X
=
MICROSCÓPIOS -> FORMAÇÃO DA IMAGEM 
MICROSCÓPIOS MODERNOS: 
obj
tubo
f
m
f
=
Sample being imaged 
Primary Image Plane 
Objective 
Other optics 
Ocular 
Other optics 
Tube Lens The main advantage of 
infinity corrected lens 
systems is the relative 
insensitivity to additional 
optics within the tube 
length. 
 
 
 
Objective Eyepieces 
(NA) 10x 12.5x 15x 20x 25x 
2.5X 
(0.08) --- --- --- x x 
4X 
(0.12) --- --- x x x 
10X 
(0.35) x x x x x 
25X 
(0.55) x x x x --- 
40X 
(0.70) x x x --- --- 
60X 
(0.95) x x x --- --- 
100X 
(1.40) x x --- --- --- 
x = good combination 
MICROSCÓPIOS -> FONTES 
OBJETIVAS 
 NA = raio/foco = r/f = n sen θ -> 
 
Lei de seno de Abbe para microscópios -> aberração 
e formação correta das imagens -> sistema 
aplanético. 
ABERTURA NUMÉRICA 
CAMPO DE VISÃO 
Quanto maior for a abertura numérica, maior é o ângulo de abertura do cone de 
luz formado. A abertura numérica, o aumento e o campo de visão de uma 
objetiva estão relacionados. O campo de visão cai com o aumento da objetiva e 
aumenta com sua abertura numérica. 
DIFRAÇÃO E RESOLUÇÃO 
d senθ = 1.22 λ mas senθ = R/f -> d R/f = 1.22 λ -> 2 r R/f= 1.22 λ ->	
 2 NA R = 1.22 λ - > R = 0.61 λ /NA 
FEIXE E OBJETO 
 
LARGURA 
MICROSCÓPIOS -> OBJETIVAS 
maior o aumento, maior é a abertura 
numérica e menor é a distância de trabalho. 
quanto maior o aumento, melhor é a resolução. 
melhores objetivas 40X, 60X, 100X – maiores aberturas 
numéricas – imersão a água. 
R = 0.61 λ / NA 
Os parâmetros que definem as propriedades das objetivas são: aumento, 
abertura numérica, distância de trabalho e se são de imersão em óleo ou água. 
NA = n sen θ	
CONDENSADORES 
MICROSCÓPIOS -> OBJETIVAS 
IMERSÃO 
sin c = 1/n n = 1.5 c = 40o -> 0.7 
IMERSÃO 
TRABALHANDO COM CÉLULAS VIVAS