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LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG O que é o sangue? • É um fluido viscoso e ligeiramente alcalino e é encontrado em um ambiente fechado → sistema cardiovascular • Coloração avermelhada → hemoglobina • Representa 7% do peso corporal Composição ✓ Células e matriz ✓ Hemácias ou eritrócitos ✓ Leucócitos ✓ Plaquetas ✓ Plasma (MEC Líquida) Hematócrito: é a separação do sangue em diferentes camadas após centrifugação (Tratado com anticoagulantes) • Estimar o volume total de eritrócitos no sangue • 35 – 49 % → mulheres • 40 – 54% → homens Funções: Transporte de: • Gases respiratórios • Nutrientes • Resíduos metabólicos • Distribuição de hormônios • Substâncias sinalizadoras • Distribuição de calor • Células de defesa Diapedese: migração das células de defesa para tecidos lesionados ou atacados É uma solução aquosa que contém vários tipos de componentes. Composição: • Água • Proteínas (albumina, globulinas, lipoproteínas, proteínas de coagulação) • Compostos orgânicos (aminoácidos, vitaminas, hormônios, glicose) • Sais inorgânicos Albumina: são sintetizadas no fígado e muito abundantes no plasma sanguíneo → elas desempenham papel fundamental na manutenção da pressão osmótica do sangue. (deficiência em albuminas causa edema) Esfregaço: espalhamento de uma gota de sangue sobre uma lâmina, onde as células ficam estiradas e separadas, o que facilita a observação ao microscópio óptico. ✓ Mistura de corantes (eosina, azul de metileno e azures) o Estruturas acidófilas → rosa o Basófilas → azul o Azures (púrpura) → azurófilas Introdução O plasma Células do sangue LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG Eritrócitos Características • Células anucleadas nos mamíferos • Permanecem sempre nos vasos sanguíneos. • São acidófilos (coram pela eosina) • Eritrócitos imaturos são azulados • Duram aproximadamente 120 dias pelo fato dessas células não apresentarem núcleos e não ter renovação das organelas. • A produção de células é controlada pelo hormônio eritropoietina, liberado pelos rins. Disco bicôncavo ✓ Maximizar a superfície celular para difusão dos gases ✓ Flexibilidade para passagem de capilares O formato bicôncavo é mantido pelo córtex celular: rede de proteínas estruturais ligadas à membrana ✓ Espectrina, anquirina, actina → mutações nos genes dessas proteínas → esferocitose hereditária → os eritrócitos ficam mais esféricos e menores → remoção do baço → alivia os sintomas Concentração: ✓ Mulheres: 4 – 5.4 milhões/ uL ✓ Homens: 4.6 – 6 milhões/ uL Funções • Transporte de gases Composição • Grande abundancia de hemoglobina no sangue: proteína transportadora de O2 e CO2. Hemocaterese • Destruição das hemácias por macrófagos no baço e fígado A bilirrubina é tóxica → fígado → conversão em menos tóxico → excreção pela bile ✓ Icterícia: excesso de bilirrubina Globina → quebrada em aminoácidos Ferro → armazenado ou pode ir para a medula óssea e formar novas moléculas de hemoglobina Hemoglobina: Formada por 4 subunidades, contendo grupo hemes e polipeptídeos • Combinação reversível de gases com a hemoglobina • 02: pulmões para tecidos (oxi-hemoglobina) • CO2: tecidos para os pulmões (carbomino- hemoglobina e dissolvido no plasma) • CO: se liga de forma irreversível à hemoglobina Tipos de hemoglobina: variam com a sequência de aminoácidos • A1: duas alfas e duas betas → 97% • A2: duas deltas e duas alfas → 2% • F: duas alfas e duas gamas → fetal e tem grande afinidade pelo oxigênio → o feto não tem acesso ao ar diretamente (obtém pelo sangue materno) Histologia aplicada Anemia: • Caracterizada pela baixa concentração de hemoglobina ou pela redução de eritrócitos no sangue (hemoglobina não funcional) • Oxigenação reduzida para os tecidos (dispneia, fadiga, taquicardia, tontura, síncope). • Muitas vezes a anemia é manifestação de outras doenças • A existência de núcleos nos eritrócitos sugere uma saída prematura dos reticulócitos da medula, ocasionada por uma forte anemia (hemolítica ou associada a um processo tumoral) Pode ser cauda por: ✓ Hemorragia ✓ Produção insuficiente de eritrócitos pela medula óssea (infecções, câncer, radiação, agentes químicos) ✓ Produção de eritrócitos com pouca hemoglobina (falta de ferro) → anemia hipocrômica LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG ✓ Destruição acelerada dos eritrócitos (alterações nos seus formatos e oclusão dos vasos) Anemia falciforme: mutação pontual no gene para a cadeia B da hemoglobina • Troca o ácido glutâmico pela valina → alteração estrutura pela mudança de polaridade • Esse eritrócito não tem flexibilidade, é frágil e tem vida curta • O sangue se torna mais viscoso → fluxo sanguíneo prejudicado e oclusão de vasos → hipoxia Leucócitos • Incolores e geralmente esféricos • 4.500 a 11.500 leucócitos por microlitro • Leucocitose → aumento • Leucopenia → redução Função: defesa contra substâncias e organismos estranhos • São produzidos pela medula óssea → permanecem temporariamente no sangue → migram para outros tecidos para executar suas funções Granulócitos: polimorfonucleares • Núcleo irregular e grânulos específicos • Neutrófilos, eosinófilos e basófilos • Grânulos azurófilos → lisossomos Agranulócitos • Núcleo mais regular e sem grânulos específicos. • Linfócitos e monócitos. • Grânulos azurófilos Neutrófilos Características: • São os mais abundantes → 50 – 70% • Arredondados • Núcleo lobulado → 3 a 5 lóbulos ligados por pontes de cromatina • 1600 a 8000 por mm3 Função: • Primeira linha de defesa do organismo, sendo as primeiras células a migrarem para sítios de infecção. • Tem sua quantidade aumentada quando há infecção ou inflamação. • Neutrófilo maduro → envolve as células e depois as elimina Composição: • Citoplasma com grânulos específicos e pouco corados • Lisozima, lactoferrina, colagenase, fosfatase alcalina → combate a microrganismos Diapedese para tecidos: ameboide e fagocitários → fusão dos fagossomos com grânulos específicos e lisossomo. Pus: formação de líquido viscoso e amarelado, contendo bactérias, neutrófilos mortos, material semidigerido e líquido extracelular. Corpúsculos de Barr: cromossomo X condensado e inativo das mulheres ➢ Aparece como um pequeno apêndice no núcleo dos neutrófilos Eosinófilos Características: • 1-4% dos leucócitos • Núcleo bilobulado • Citoplasma com grânulos específicos acidófilos ovulados ( se coram pela eosina) LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG Composição: • Proteína básica principal, proteína catiônica eusinofílica • Arginina Função: • Defesa contra parasitas, bactérias vírus • Participação em respostas alérgicas e inflamatórias • Asma • Contribuem para a inflamação que ocorre em distúrbios alérgicos • Diminuição do número: síndrome de Cushing, sepse e no tratamento com corticosteroides • Aumento do número: distúrbio alérgicos, infecções por parasitas e determinados tipos de câncer Basófilos Características: • 0.5 – 2 % • Núcleo pouco visível, volumoso e em formato retorcido e irregular em S • Citoplasma com grânulos basófilos (grandes e metacromáticos) e muito elétron-densos Composição: • Histamina, heparina, fatores quimiotáticos para eosinófilos e neutrófilos Funções: • Respostas alérgicas, inflamatórias e ação imunomoduladora • Vigilância imunológica e no reparo de feridas • Evitam a coagulação do sangue Linfócitos Características: • 20 – 40 % • Núcleo esférico e volumoso com cromatina muito condensada • Células imunocompetentes recirculantes • Citoplasma escasso e periférico • Recirculam continuamentedo sangue para tecidos e vice-versa • Sua cromatina se dispõe em grumos grosseiros • Pobre em organelas • Não são células terminalmente diferenciadas • São capazes de se desenvolver fora da medula óssea • Os ribossomos são responsáveis pela leve basofilia do citoplasma Função: • Defesa imune do organismo: reconhecem e combatem diferentes moléculas estranhas ao corpo • Reconhecem agentes infecciosos e os combater por meio de uma resposta humoral (produção de imunoglobulinas) Três tipos: Linfócitos B: origem e diferenciação na medula óssea • Produzem anticorpos circulantes e tem tempo de vida variável LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG • Originam plasmócitos Linfócitos T: originam na medula óssea e a diferenciação ocorre no timo • Participam da imunidade celular e têm vida mais longa • Proteínas de reconhecimento na superfície celular (receptores de células T) • Produção de perforinas e indução de apoptose (células estranhas, tumorais ou infectadas) • Produção de citocinas, ativação de células fagocitárias Células natural killer: são programadas para matar certos tipos de células infectadas por vírus ou células tumorais • O aumento da quantidade de linfócitos no sangue (linfocitose) está frequentemente associada a infecções virais • A redução está associada a terapia farmacológica prolongada ou imunodeficiência. Monócitos Características: • 2 – 10 % • Maiores leucócitos • Núcleo em formato de rim, feijão ou ferradura e geralmente excêntrico • O arranjo pouco denso da cromatina deixa o núcleo deles mais claro que dos linfócitos • Núcleo com dois ou três nucléolos • Representam uma fase de maturação da célula mononuclear fagocitária originada na medula óssea Função: • Migram para os tecidos e originam macrófagos (fagocitose, apresentação de antígenos e produção de citocinas) • Fazem parte do sistema mononuclear fagocitário. Monocitose: doença hematológica, infecções, doenças autoimunes Monocitopenia: rara e pode ocorrer em tratamentos com corticoesteroides Plaquetas Características • Pequenos corpúsculos anucleados em forma de disco • Derivadas de megacariócitos • Permanecem no sangue por 10 dias Funções: • Coagulação sangue e reparo da parede dos vasos, evitando a perda de sangue Estrutura: • Sistema canalicular aberto: são canais que se comunicam com invaginações da membrana das plaquetas e facilitam a liberação de moléculas ativas • Camada superficial de glicoproteínas e GAGs: adesividade e pode absorver compostos • Hialômero: feixe marginal de microtúbulos, que contribui para manter a forma ovóide desses corpúsculos, e filamentos de actina e miosina, responsáveis pela contração. LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG Quando a parede de um vaso é lesionada inicia-se um processo denominado hemostasia, que visa impedir a hemorragia. • Agregação primária: As descontinuidades do endotélio (produzidas pela lesão) são seguidas pela absorção de proteínas do plasma, sobre o colágeno adjacente. As plaquetas se aderem ao colágeno, formando um tampão plaquetário. • Agregação secundária: as plaquetas liberam ADP (indutor), fazendo aumentar o número de plaquetas do tampão. • Coagulação do sangue: liberação de fatores de coagulação e fibrina → a fibrina forma uma malha frouxa sobre o tampão inicial, que é estabilizada por ligações covalentes. • Eritrócitos, leucócitos e plaquetas são aprisionados pela fibrina → coágulo sanguíneo Introdução: • É processo de produção das células do sangue • Envolve renovação, ploriferação, diferenciação e maturação celular • Ocorre a partir de células da medula óssea → encontrada no canal medular de ossos longos e cavidades dos ossos esponjosos ✓ Produção de células sanguíneas o Eritrócitos, leucócitos e plaquetas → circulação o Obs: os linfócitos T complementam a maturação no timo ✓ Destruição de eritrócitos velhos ✓ Estocagem de ferro ✓ Fonte de células-tronco As células-tronco originam células-filhas que seguem dois segmentos distintos: • Algumas permanecem como células-tronco • Outras sofrem diferenciação O controle desse processo se dá por meio de fatores de crescimento e citosinas. Células-tronco são caracterizadas por: • Capacidade de autorrenovação • Capacidade de produzir vários tipos celulares • Capacidade de reconstituir o sistema hemocitopoiético Células-tronco pluripotentes • Tipo celular do qual as células sanguíneas se derivam • Células linfoides → linfócitos • Células mieloides → eritrócitos, granulócitos, monócitos e plaquetas Células progenitoras e células precursoras • Células tronco → progenitoras → precursoras (blastos) • Nas células precursoras as características morfológicas diferenciais das linhagens aparecem pela primeira vez. Medula óssea • É um órgão difuso, volumoso e ativo • Encontrada no canal medular dos ossos longos e nas cavidades dos esponjosos • Nos recém-nascidos toda medula é vermelha Vermelha (ativa) • Muitas células-tronco • Muitos precursores de eritrócitos • Adulto: esterno, clavícula, vértebras, costelas, ossos do crânio, ossos pélvicos Hemocitopoese LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG • Adulto jovem: epífise do fêmur e úmero Medula óssea amarela (menos ativa) • Mais adipócitos • Menos células sanguíneas Medula óssea vermelha • Células reticulares (fibroblastos especializados), fibras reticulares → formam rede percorrida por capilares sinusoides • GAGs, proteoglicanos, glicoproteínas, citocinas e fatores de crescimento • O endotélio dos capilares e as células reticulares são fontes de citocinas hemocitopoiéticas • Capilares sinusoides, células endoteliais e macrófagos • Existem microrregiões que predominam linhagens sanguíneas em diferentes fases de maturação • A liberação de células maduras ocorre por migração através do endotélio, próximo das junções intercelulares Maturação dos eritrócitos O processo básico é a síntese de hemoglobina e a formação de um corpúsculo pequeno e bicôncavo 1- Redução do volume celular 2- Condensação da cromatina 3- Estrangulamento e extrusão do núcleo Proeritroblasto → eritroblasto basófilo → eritroblasto policromático → eritroblasto ortocromático (acidófilo) → reticulócito → hemácia Proeritroblasto: • Célula grande • As proteínas sintetizadas por ele destinam-se principalmente a reconstituir o tamanho da célula, que se divide ativamente • Síntese de hemoglobina → contém pouca Eritroblasto basófilo • Menor que anterior • Cromatina consensada Eritroblasto policromático • Ainda menor • Hemoglobina suficiente para gerar acidofilia citoplasmática + basofilia já existente = cor cinza Eritroblasto ortocromático (acidófilo) • Núcleo picnótico, com cromatina condensada • Riqueza em hemoglobina → citoplasma acidófilo • Em algum momento ele começa a emitir saliências e expeli o núcleo Reticulócito • Parte anucleada com mitocôndrias e polirribossomos → sintetizam hemoglobina → cessa • Aparece como maior que os eritrócitos • Basofilia devido ao resto de RNA • Saem da medula óssea → sangue → pouco tempo depois já viram eritrócitos • Hormônio eritropoetina LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG Granulocitopoese • Modificações citoplasmáticas caracterizadas pela síntese de muitas proteínas → grânulos azurófilos ou específicos • Primeiro estágio → produção de azurófilos, que são basófilos e contém enzimas lisossomais • Segundo estágio → produção das proteínas dos grânulos específicos Setas pretas: proeritroblastos → células grandes com núcleo volumoso e citoplasma basófilo Seta vermelha: eritroblasto basófilo → pouco maior que as hemáciase com citoplasma basófilo Setas verdes: eritroblastos policromáticos → células pequenas com citoplasma de cor misturada Setas amarelas: mielócitos → células grandes, apresentando núcleo endentado e grânulos discretos Seta azul: metamielócito neutrófilo → menor que o mielócito com o núcleo mais endentado ainda Maturação dos granulócitos • O mieloblasto é a célula mais imatura já determinada para formar os três tipos de granulócitos Mieloblasto → surgem granulações específicas → promielócito (neutrófilo, basófilo ou eosinófilo) → mielócito → metamielócito → granulócito com núcleo em bastão → granulócito maduro Mieloblasto • Célula com citoplasma basófilo, com grânulos azurófilos • Núcleo grande, esférico e com cromatina delicada Promielócito • Menor • Núcleo esférico com reentrância • Cromatina mais grosseira • Citoplasma mais basófilo com granulações específicas Mielócito • Núcleo esférico ou em forma de rim, com cromatina grosseira • Desaparece a basofilia citoplasmática Metamielócito • Núcleo com uma chanfradura profunda → processo de formação dos lóbulos • O metamielócito basófilo não costuma ser descrito Granulócito com núcleo em bastão • Antes de atingir a forma lobulada o neutrófilo passa por uma fase de bastonete, na qual o núcleo tem uma forma de bastão recurvado. • Os outros não são descritos Seta verde: mielócito Seta amarela: metamielócito eosinófilo → célula pequena com grânulos evidentes Seta azul: metamielócito neutrófilo LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG Maturação dos linfócitos e monócitos • De estudo difícil • Os precursores dos linfócitos são identificados pelo tamanho, estrutura da cromatina e pelos nucléolos • À medida que eles maturam a cromatina se torna mais condensada, os nucléolos menos visíveis e a célula menor. Linfócitos • Originam no timo e nos órgãos linfoides periféricos, a partir de células levada da medula óssea para o sangue • T → diferenciam no timo / B→ medula óssea • Nos tecidos, os linfócitos B se diferenciam em plasmócitos, células produtoras de imunoglobulinas Linfoblasto • Célula mais jovem • É a maior, com forma esférica e citoplasma basófilo sem grânulos azurófilos • Cromatina levemente condensada • 2 ou 3 nucléolos Prolinfócito • Menor, com citoplasma basófilo, podendo contém grânulos azurófilos • Cromatina condensada ( - que nos linfócitos) • Os nucléolos não são facilmente visíveis • Da origem ao linfócito circulante Monócitos • São células intermediárias destinadas a formar os macrófagos dos tecidos • Originam-se das células mieloides multipotentes Promonócito • Encontrada apenas na medula óssea • Morfologicamente igual ao mieloblasto • Cromatina delicada com citoplasma basófilo • Numerosos grânulos azurófilos finos • Dividem-se duas vezes → monócitos → 8 horas no sangue → vão para os tecidos → macrófagos Histologia aplicada Leucemia • Proliferação neoplásica de células precursoras de leucócitos • Linfocíticas, granulocíticas ou monocíticas • Geralmente há produção excessiva de células funcional e morfologicamente defeituosas, originadas de um único tipo de célula precursora, podendo haver redução na formação das outras células sanguíneas. • Frequentemente os pacientes apresentam anemia e pouco resistência às infecções Causas → ainda não são completamente elucidadas, mas, em muitos casos, existem translocações cromossômicas • 95% com leucemia granulocítica crônica são portadores de translocação entre os cromossomos 22 e 9 • E na leucemia mieloide aguda, observa-se translocação entre os cromossomos 8 e 21 e entre os cromossomos 15 e 17 Diagnóstico • Os esfregaços da medula óssea são muito utilizados nos diagnósticos • Introduz uma agulha no esterno (geralmente) e, por aspiração, obtém-se uma amostra de células da medula que é colocada na lâmina e corada • O uso de anticorpos específicos consegue identificar a célula que origina a leucemia Origem das plaquetas • Se originam na medula óssea vermelha, pela fragmentação de megacariócitos, os quais são formados pela diferenciação de megacarioblastos. Megacarioblasto • Célula grande, com núcleo grande e oval (ou em forma de rim), com numerosos nucléolos LORRANE BRAGA RANGEL LXIX – UFG • Citoplasma homogêneo e intensamente basófilo Megacariócitos • Tem o núcleo irregularmente lobulado, com cromatina grosseira e sem nucléolos visíveis • Citoplasma abundante e basófilo, com granulações que formam os cromômeros das plaquetas • Adjacentes aos sinusoides, o que facilita a liberação das plaquetas Histologia aplicada • Em alguns tipos de púrpura trombocitopênica, doença em que o número de plaquetas no sangue é baixo, a quantidade de plaquetas presas ao citoplasma dos megacariócitos é aumentada, indicando um distúrbio no mecanismo de liberação desses corpúsculos. • Transfusões de plaquetas • Atualmente, há um enorme esforço para a produção de plaquetas in vitro, o que reduziria ou até resolveria muitos problemas.