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Gabrie lla D ias HEMATOLOGIA LEUCOGRAMA (Análises quantitativas e qualitativas da série branca) LEUCÓCITOS • “Glóbulos brancos” (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos e linfócitos • Elementos de defesa • Leucograma I - Análises quantitativas II - Análises qualitativas • Na presença de agentes infecciosos, as células fagócitas fagocitam a bactéria e apresentam antígenos para iniciar uma resposta imune. Inicialmente, substâncias químicas sinalizam a presença da infecção enquanto ocorre a ativação do sistema complemento. A ativação do complemento desencadeia a produção de proteínas C - reativas (PCR) → Proteína de fase aguda (pode ser dosada) → Se o agente infeccioso ainda for resistente, os mastócitos liberam mediadores químicos. Esses mediadores chegam à medula óssea e sinalizam a produção e liberação de mais leucócitos, promovendo uma leucocitose. → Demanda tecidual por neutrófilos (liberação de bastonetes/ células jovens pela medula em maior quantidade) CONSIDERAÇÕES • Os granulócitos (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) e monócitos presentes no sangue estão em trânsito da medula para os tecidos onde exercem suas funções. - Para que os linfócitos saiam do sangue, eles precisam aderir às células endoteliais, passar pela etapa de rolamento e, em seguida, sair por diapedese chegando ao local de atuação. - São células de vida curta no sangue - O neutrófilo tem seu período de duração de 5h na corrente sanguínea • Os linfócitos, entretanto, refletem as alterações na cinética de recirculação e distribuição entre o sangue e os órgãos linfóides. - São células de memória - Os linfócitos são células que saem do sangue, migram para os órgãos linfóides e entram na linfa. A linfa se mistura com o sangue na altura do ducto torácico. Essas células têm uma longa vida útil, saindo e retornando para o sangue repetidamente. → Algumas substâncias, como os corticóides, podem interferir na cinética dos linfócitos. → Um paciente que está sob ação de corticóides geralmente apresentará um queda do número de linfócitos circulantes, pois os corticóides retêm os linfócitos nos órgãos linfóides, dificultando a recirculação e o retorno dessas células à corrente sanguínea. • Na medula, as células são distribuídas no pool de produção, pool de maturação e pool de reserva. • No sangue, as células são distribuídas no pool circulante e o pool marginal. Pool marginal: constituído por células que estão aderidas ao endotélio realizando a diapedese Gabrie lla D ias • As coletas trazem apenas as células do pool circulante MEDULA ÓSSEA VERMELHA Pool de produção: mieloblastos, pró-mielócito, mielócitos → células que realizam mitoses Pool de maturação: metamielócitos e neutrófilos bastonetes →células que passam por alterações para se tornarem maduras Pool de reserva: neutrófilos segmentados → células maduras que estão aguardando um estímulo para serem liberadas na circulação Em casos de alta demanda tecidual, a medula óssea responde liberando o pool de reserva. Quando a demanda tecidual é extremamente alta, podem ser encontrados Mielócitos no sangue circulante. Mieloblastos e Promieloblastos: suspeita de Leucemia - doença mieloproliferativa - Os blastos nunca saem da medula em situações normais - As maiores leucocitoses estão relacionadas à Leucemia, que também pode estar associada à leucopenia. → Depende do tipo de leucemia - A presença de blastos no sangue circulante requer obrigatoriamente a avaliação de um patologista para a análise da medula óssea. É necessário realizar um mielograma para obter um diagnóstico preciso da leucemia que está afetando o paciente. SANGUE Pool circulante: células livres presentes no fluxo que será coletado para a amostra Pool marginal: células que estão aderidas à parede do vaso para a realização da diapedese. • Quanto mais segmentada for a célula, mais madura ela será. Neutrófilo hipersegmentado: indicativo de células velhas - Normalmente, isso não ocorre na corrente sanguínea, mas pode acontecer em alguns casos sob o efeito de corticosteróides, uma vez que os corticoides impedem o retorno dos linfócitos à corrente sanguínea e a liberação dos neutrófilos da medula óssea. - Pacientes que estão usando glicocorticóides ou sob situações de estresse com a liberação de corticóides endógenos, a marginação das células diminuirá, fazendo com que as células que estavam aderidas à parede do vaso se soltem, permanecendo circulantes por mais tempo e iniciando uma hipersegmentação - A maioria dos neutrófilos hipersegmentados ocorrem por um artefato técnico, quando o sangue fica armazenado por muito tempo. → Não é relatado no exame Neutrófilo segmentado: célula madura - Célula que esperamos encontrar no hemograma Gabrie lla D ias • O aumento da concentração de neutrófilos hipersegmentados é indicativo de desvio à direita → Difícil de ser encontrado (os exames não são feitos na hora) • O aumento da concentração de neutrófilos bastonetes (↑ de 2%), Metamielócito e Mielócito é indicativo de desvio à esquerda. → Presença de células jovens no hemograma → Presente em casos de alta demanda tecidual por neutrófilo (ex. situações de reação inflamatória) • O desvio à Esquerda está diretamente associado a uma reação inflamatória DESTINO DOS NEUTRÓFILOS PRESENTES NO SANGUE CIRCULANTE I - ANÁLISES QUANTITATIVAS DE LEUCÓCITOS 1) CONTAGEM GLOBAL DE LEUCÓCITOS • A contagem automatizada de leucócitos fornece resultados mais acurados do que a contagem manual → A máquina não diferencia hemácias nucleadas. → Se durante a contagem diferencial encontrarmos hemácias nucleadas, devemos incluí-las na contagem. → Para cada 100 leucócitos → X hemácias nucleadas encontradas • Todas as células nucleadas presentes na amostra são incluídas na contagem global de leucócitos, inclusive hemácias nucleadas. • A presença de hemácias nucleadas na amostra deverá ser identificada no exame de esfregaço sanguíneo e o número de hemácias nucleadas/100 leucócitos deverá ser anotado para a correção do valor da contagem global de leucócitos, através do seguinte cálculo: 1) Contagem global de leucócitos 2) Contagem diferencial de leucócitos • Câmara de Neubauer • Automatizada • Contagem em lâmina (100 células) Gabrie lla D ias • O hemograma fornece a porcentagem e os números absolutos. → A análise deve ser feita baseada nos números absolutos, pois a porcentagem não é indicativo de nada. → Mesmo que a global de leucócitos não apresente alterações, é preciso analisar os outros tipos de contagem • Os neutrófilos são as células mais abundantes, representando de 70 a 80% dos leucócitos. Portanto, as alterações nos neutrófilos são as que mais influenciam na contagem global. RESULTADOS - GLOBAL DE LEUCÓCITOS LEUCOCITOSE: aumento do número total de leucócitos. • Na maioria das vezes o aumento do número de neutrófilos (neutrofilia) é o responsável pela leucocitose, uma vez que esse é o tipo celular mais abundante entre os glóbulos brancos circulantes. LEUCOPENIA: diminuição do número total de leucócitos. • Na maioria dos casos, a leucopenia é causada pela diminuição do número de neutrófilos (neutropenia), exceto nos ruminantes e em algumas espécies de aves, nos quais os linfócitos são o tipo de leucócito predominante no sangue circulante de animais saudáveis. 2) CONTAGEM DIFERENCIAL DE LEUCÓCITOS • Esfregaços sanguíneos corados são examinados e os leucócitos são identificados e contados até um total de 100 células, em aumento de imersão (objetiva de 1000x). • Caso haja hemácias nucleadas na amostra, seus valores devem ser anotados separadamente. • A porcentagem de cada tipo de leucócito deve ser multiplicada pela contagem global de leucócitos dando origem ao número absoluto de cada célula. • O somatório total das contagens absolutas de cadatipo de leucócito deve ser igual à contagem global obtida para a amostra. • A interpretação do leucograma deve ser baseada na contagem absoluta de células e não em seus valores relativos • Os sufixos “filia” ou “ose” indicam um aumento do número do tipo específico de leucócito (neutrofilia, eosinofilia, basofilia, linfocitose e monocitose). • Os sufixos “penia” ou “citopenia” indicam uma diminuição do tipo específico de leucócito (neutropenia, eosinopenia, basopenia, linfopenia e monocitopenia). • ↓ imunidade está correlacionado com a linfopenia, uma vez que o sistema imune está diretamente ligado à contagem de linfócitos • Neutrófilos imaturos são incluídos na contagem diferencial de leucócitos. • Os bastonetes são o tipo mais comum de neutrófilo imaturo observado no desvio à esquerda, mas formas ainda mais jovens (metamielócitos e mielócitos) são ocasionalmente encontradas nos casos de doença severa. → Quanto mais grave for a doença, maior será o desvio observado. • Um número progressivamente maior de neutrófilos imaturos (metamielócitos, mielócitos e promielócitos) pode ser encontrado no sangue em casos específicos como inflamação severa e leucemia mieloide. DESVIO À ESQUERDA REGENERATIVO: ocorre quando há a presença de células jovens, porém há predominância de células maduras. - A medida em que as células jovens entram na corrente sanguínea, elas acabam amadurecendo - Prognóstico favorável DESVIO À ESQUERDA DEGENERATIVO: ocorre quando há uma maior quantidade de células jovens em comparação com células maduras (predominância de bastonetes e metamielócitos). Gabrie lla D ias - Exército formado por crianças - Está associado a leucopenia - Prognóstico reservado a desfavorável • Um desvio à esquerda degenerativo está presente se o número de bastonetes e neutrófilos ainda mais imaturos excede o número de neutrófilos segmentados maduros. • Um desvio à direita está presente se os neutrófilos apresentam hipersegmentação nuclear (na maioria das vezes é resultado de demora entre a coleta e a confecção do esfregaço sanguíneo). → Mais difícil de ser encontrado → Contagem em lâmina (esfregaços) → 100 células Gabrie lla D ias II - ANÁLISES QUALITATIVAS DE LEUCÓCITOS 1) ANORMALIDADES MORFOLÓGICAS OBSERVADAS EM LEUCÓCITOS → Hiposegmentação nuclear: Anomalia de Pelger-Huët • Defeito hereditário (genético) • Os núcleos dos granulócitos não se segmentam (bastonetes) • Frequente no Pastor Australiano • Pseudo Pelger-Huët: reações idiossincráticas → Reações que alguns indivíduos desencadeiam contra certos medicamentos. → Hipersegmentação nuclear • Neutrófilos com 5 ou mais lóbulos • Corresponde ao “envelhecimento” in vivo ou in vitro • In vivo: glicocorticóides endógenos ou exógenos prolongam a meia vida circulante dos neutrófilos • In vitro: como resultado do armazenamento prolongado do sangue antes de confeccionar os esfregaços → Alterações tóxicas em neutrófilos - Corpúsculos de Döhle - Granulações tóxicas - Vacuolização do citoplasma - Basofilia do citoplasma → Quando o citoplasma fica mais azulado • Condições associadas a inflamações severas, infecções e intoxicações medicamentosas • Ocorrem devido a uma diminuição no tempo de maturação dos neutrófilos da medula óssea (intensa demanda tecidual) • São achados que indicam que o processo de maturação foi extremamente rápido para atender uma alta demanda tecidual (ex. inflamação severa sépticas ou assépticas, infecção ou intoxicação). → O processo de produção dos neutrófilos pela medula óssea leva aproximadamente 9 dias. No entanto, se a demanda tecidual for alta, a medula acelera a maturação e libera as células com pequenos defeitos. 2) INCLUSÕES INTRACITOPLASMÁTICAS EM DOENÇAS INFECCIOSAS • A Ehrlichia é uma riquétsia que infecta glóbulos brancos • O corpúsculo de Lentz é resultado da precipitação de proteínas virais do vírus da cinomose. → Patognomônico de cinomose • São excessões do hemograma → Apresenta valor diagnóstico 3) LINFÓCITOS ATÍPICOS E LINFÓCITOS REATIVOS • É observado durante a leitura da lâmina → Durante a contagem diferencial • Associados à estimulação antigênica (especialmente na erliquiose canina), após vacinação ou infecção. Exemplo: indivíduos alérgicos à poeira apresentarão linfócitos reativos ao entrarem em contato com o alérgeno. • Presença de grânulos azurófilos no citoplasma • Apresentam citoplasma mais abundante e basofílico com núcleo clivado ou convoluto. • Atualmente o termo “reativo” é mais aceito. Gabrie lla D ias 4) SÍNDROME DE CHEDIAK - HIGASHI • Desordem hereditária caracterizada pela fusão de lisossomas que formam um corpúsculo eosinofílico. • Poucos sinais clínicos associados → É um achado de laboratório • Os animais afetados podem apresentar também desordens da coagulação (hemorragias) • Mais frequentemente reportada em gatos Persa, bovinos, raposas e também em outras espécies 5) CÉLULAS ROMPIDAS / CARIÓLISE / PICNOSE / CARIORREX Características da morte celular: Picnose: condensação do núcleo Cariorrex: fragmentação do núcleo Cariólise: dissolução do envoltório nuclear (lise do núcleo) • Normalmente, está relacionada a algum defeito na preparação da lâmina (artefato de técnica) 6) PRESENÇA DE BLASTOS NO SANGUE PERIFÉRICO Desordens hematopoiéticas: linfoproliferativas ou mieloproliferativas Nome comum: leucemias (neoplasias hematopoiéticas) • A falta de hemácias é um sintoma recorrente nas leucemias, pois o aumento da proliferação dos blastos reduz o espaço disponível para as hemácias na medula óssea. • O sangue contém aproximadamente 100 mil leucócitos. Sendo os leucócitos as células maiores e mais complexas, a viscosidade de um sangue com essa quantidade elevada de leucócitos será diferente. O fluxo sanguíneo de um paciente com leucemia estará comprometido, dificultando a passagem pelos pequenos capilares, o que pode resultar em problemas de fluxo sanguíneo e levar à formação de trombose, isquemia e hipóxia da células. • É necessário uma avaliação da medula óssea para fechar o diagnóstico HEMATOLOGIALEUCOGRAMA