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CRESCIMENTO BACTERIANO continuação 1 Obtenção de culturas Puras Necessidade da cultura pura Técnica de esgotamento 2 Preservando Culturas Bacterianas Refrigerador 2 métodos para longos períodos congelamento a –50 a –95ºC liofilização Crescimento das Culturas Bacterianas Divisão bacteriana Reprodução por fissão binária brotamento 3 4 Medidas , Unidades e Parâmetros do Crescimento Bacteriano Crescimento exponencial – 2n N = N0 x 2n Tempo de Geração g ou T = t/n 5 MEDIDAS DO CRESCIMENTO MICROBIANO Podem ser realizadas pelos seguintes métodos: 1) Peso seco total das próprias células – filtração, secagem e pesagem 2) Peso de algum componente celular – extração, secagem e pesagem 3) Variação no número de células a) contagem de células totais b) contagem de células viáveis Vantagens: método rápido e fácil Desvantagens Não distingue as células vivas das mortas Pode-se omitir células pequenas Células móveis precisam ser imobilizadas a) Contagem de células totais (contagem microscópica direta) Utilizam-se câmaras especiais de contagem (lâmina com grade quadriculada) Ex.: Câmara de Neubauer b) Contagem de células viáveis: contagem indireta Contagem das colônias formadas em meio de cultura em placas. Razões: Erros devido à junção de células na colônia Restrições podem fazer células viáveis não originar colônias São empregadas várias diluições decimais porque é difícil prever o número de viáveis. É contada a placa com 30 a 300 colônias Diluição das suspensões celulares Amostras concentradas precisam ser diluídas Outros métodos: Turbidimetria As células dispersam a luz e quanto mais células mais turvo é o meio Pode ser medida com um espectrofotômetro O uso da turbidimetria exige a construção de uma curva padrão Turbidez X quantidade de células Contagem eletrônica Medidas , Unidades e Parâmetros do Crescimento Bacteriano escala aritmética x escala logarítmica 12 Fases de crescimento Fase lag Fase Log Fase Estacionária Fase de declínio ou morte 13
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