Modelo de pop para biomedicina

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Hospital Antônio dos Santos
Lab. de Análises Clínicas de Beneditinos
	
	
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO – POP
	POP N° 013
	
PROCEDIEMENTOS EM PARASITOLOGIA 
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1 SITUAÇÃO DE REVISÃO
	ELABORADO POR:
	REVISADO POR:
	APROVADO POR:
	Dr João Paulo da Silva Sampaio CRBM 4216
	Dr João Paulo da Silva Sampaio CRBM 4216
	
	DATA: 30/02/2020
2 OBJETIVO
	Identificação de ovos e larvas de helmintos, cistos e oocistos de protozoários.
3 RESPONSABILIDADES
3.1 Geral
	Coordenador do Laboratório de Análises Clínicas e Responsável Técnico.
3.2 Executiva
	Responsáveis pelos setores da clínica: biomédico e técnicos de laboratório.
4 PROCEDIMENTOS
4.1 MÉTODO DE HOFFMAN, PONS E JANER OU MÉTODO DE LUTZ
	É um método de sedimentação espontâneo para a identificação de ovos e larvas de helmintos e de cistos de protozoários.
1. Colocar aproximadamente 2g de fezes em um frasco de Borrel com cerca de 5mL de água, triturar bem com um bastão de vidro.
2. Acrescentar mais 20 mL de água.
3. Filtrar suspensão para um cálice cônico de 200 mL de capacidade por intermédio de uma peneira de náilon ou gaze cirúrgica dobrada em quatro; os detritos retidos são lavados com mais 20 mL de água, agitando-se constantemente com bastão de vidro, devendo o líquido da lavagem ser colhido no mesmo cálice.
4. Completar o volume do cálice com água.
5. Deixar a suspensão em repouso de 2 a 24 horas.
6. Ao final desse tempo, observar o aspecto do líquido sobrenadante, tomando uma das duas condutas:
a. Se o líquido estiver turvo, descartá-lo cuidadosamente sem levantar ou perder o sedimento, colocando mais água até o volume anterior e deixar em repouso por mais 60 minutos.
b. Se o líquido estiver límpido, colher uma amostra do sedimento para exame.
7. Existem duas técnicas para colher o sedimento:
a. Introduzir uma pipeta obliterada pelo dedo indicador até o sedimento do fundo do cálice, retirar o dedo e deixar subir uma pequena porção do sedimento; recolocar e retirar a pipeta.
b. Desprezar o líquido sobrenadante cuidadosamente, homogeneizar o sedimento e colher uma gota do mesmo.
8. Colocar parte do sedimento em uma lâmina, adicionar uma gota de lugol, cobrir com lamínula. Examinar com objetiva de 10 e/ou 40x. Deve-se examinar no mínimo duas lâminas de cada amostra.
4.2 MÉTODO POR CENTRIFUGAÇÃO
	Usado para pesquisa de ovos e larvas de helmintos, cistos e alguns oocistos de protozoários.
1. Retirar do filtrado contido no cálice do método de Hoffman 5mL para um tubo cônico de centrifugação.
2. Centrifugar por 5 minutos a 1.500 rpm.
3. Desprezar o sobrenadante.
4. Preparar uma lâmina com uma alíquota do sedimento utilizando lugol e lamínula. Examinar com objetiva de 40x.
4.3 MÉTODO DE BAERMANN-MORAIS
	É um método de concentração de larvas de helmintos por migração ativa devido ao hidrotropismo e termotropismo positivos.
1. Pegar 8 a 10g de fezes.
2. Colocar em uma gaze dobrada em uma peneira.
3. Colocar o material assim preparado sobre um funil de vidro contendo um tubo de borracha conectado à extremidade inferior de sua haste.
4. Obliterar o tubo de borracha com uma pinça de Hoffman e adicionar, ao funil, água aquecida (45°C) em quantidade suficiente para entrar em contato com as fezes.
5. Deixar 1 hora em repouso.
6. Terminado esse tempo, colher 5 a 7 mL de água, em um tubo de centrífuga, abrindo-se a pinça.
7. Centrifugar a 100 rpm por 1 minuto.
8. Colher o sedimento, sem desprezar o líquido sobrenadante, examinar ao microscópio (10x). Caso se detecte a presença de larvas, essas deverão ser coradas com lugol e observadas com objetiva de 40x para identificação.
4.4 MÉTODO DE FAUST
	Método de centrifugação por flutuação utilizado para a pesquisa de cistos, alguns oocistos de protozoários e ovos leves de helmintos.
1. Diluir 10 gramas de fezes em 20 mL de água filtrada.
2. Homogeneizar bem.
3. Filtrar através de gaze dobrada em quatro ou peneira.
4. Transferir para um tubo falcon e centrifugar por 2 minutos a 2.500 rpm.
5. Desprezar o líquido sobrenadante e ressuspender o sedimento em água.
6. Repetir as operações 4 e 5 mais duas ou três vezes, até que o líquido sobrenadante fique claro.
7. Desprezar a água sobrenadante e ressuspender o sedimento com uma solução de sulfato de zinco a 33%, densidade de 1,18g/mL.
8. Centrifugar novamente por 1 minuto a 2.500 rpm.
9. Os cistos e alguns oocistos de protozoários e os ovos leves presentes na amostra fecal estarão na película superficial. Recolher a película com alça de platina, colocar em uma lâmina, acrescentar uma gota de lugol e cobrir com uma lamínula.
10. Examinar com as objetivas de 10 e 40x.
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