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2 a . Avaliação a Distância – 2013/2 Disciplina: Bioquímica 1 Data da entrega da prova pelo aluno no pólo: 27/10 (as questões 2 e 3 se referem à aula prática de Cinética Enzimática, e deverão ser entregues 1 semana após a prática) Nome: ______________________________________________________________ Pólo: _______________________________________________________________ 1ª questão (total 1,0 ponto): Durante o Estudo Dirigido que realizamos através do fórum, discutimos o papel de algumas proteínas virais durante a infecção. Ao final, você deve ter percebido como a flexibilidade estrutural das proteínas, ou seja, as mudanças conformacionais sofridas por elas frente a diferentes estímulos, possibilita que elas desempenhem seu papel. Seguindo por essa perspectiva, explique quais são os estímulos necessários para que as proteínas localizadas na superfície dos seguintes vírus desempenhem seus papéis e quais são as conseqüências das mudanças desencadeadas por eles para a interação de cada vírus com sua célula hospedeira. a) Poliovírus (0,5 pontos) b) Vírus Influenza (0,5 pontos) 2ª questão (total 2,0 pontos): Esta questão corresponde ao relatório da aula prática de “Cinética Enzimática”. Você deverá usar os resultados obtidos por seu grupo para respondê-la. a) Calcule a quantidade de p-NP em cada tudo em nmoles/tubo, e construa, em papel milimetrado, a curva padrão (gráfico com os valores da absorbância na ordenada e a quantidade de p-NP, em nmoles, na abscissa). Por fim, calcule o fator da reta obtida (pode ser obtido dividindo-se o valor de absorbância de determinado ponto da reta pelo valor de p-NP referente a esse mesmo ponto). (0,6 ponto) b) Calcule a quantidade de p-NP produzido em cada tubo da curva de temperatura, utilizando o fator da reta da curva padrão. Em seguida, calcule a atividade da enzima em cada temperatura. Preencha a primeira tabela do roteiro de aula prática com os valores obtidos. Por fim, construa um gráfico relacionando a atividade da enzima (em nmoles de p-NP/ min.g enzima) em função da temperatura.. (0,6 ponto) c) Agora responda as questões a seguir: Qual é a temperatura ótima para esta enzima? Qual o significado fisiológico deste fenômeno? (0,4 ponto) O que aconteceu na reação dos tubos 1 e 4? Qual a diferença no estado da enzima nos tubos 1 e 4? (0,4 ponto) 3ª questão (total 2,0 pontos): Nesta questão serão fornecidos gráficos obtidos anteriormente com a mesma enzima usada na aula prática e sobre eles você deve responder as questões a seguir. a) O gráfico a seguir mostra o curso temporal da reação, ou seja, como varia a formação de produto ao longo do tempo de reação. Explique o perfil do gráfico. Qual a diferença entre as regiões 1 e 2 do gráfico? (0,5 ponto) b) O gráfico a seguir mostra a dependência da concentração de substrato para a atividade da enzima. Busque uma justificativa que explique o perfil desse gráfico, ressaltando as diferenças de atividade em concentrações de substrato abaixo de 50M (região 1) e acima de 100M (região 2). (0,5 ponto) Tempo (min) 0 20 40 60 80 100 At ivi da de (n m ol oe s p -N P/ g en zim a) 0 200 400 600 800 1000 1 2 c) Qual a diferença entre as regiões 2 dos gráficos mostrados nos ítens a e b? Diferencie o estado da enzima nas duas condições. (1,0 ponto) 4ª questão (total 1,0 ponto): Explique com suas palavras a importância da curva padrão para a interpretação dos resultados da prática de cinética enzimática 5ª questão (total 2,0 pontos): a) Comente as vantagens da participação das vitaminas nas reações enzimáticas. (0,5 pontos) b) Recentemente a engenharia genética possibilitou a transferência de genes controladores da rota de biossíntese da provitamina A para o genoma do arroz. Deste modo foi produzido o chamado "Golden Rice", ou arroz dourado. De acordo com os autores do projeto, o consumo desse tipo de arroz poderia amenizar os problemas de carência dessa vitamina em populações de países subdesenvolvidos. Pesquise sobre a vitamina A e relacione suas características e suas funções com o projeto relatado acima. (0,5 pontos) 6ª questão (total 2,0 pontos): Membranas biológicas são estruturas bilaminares compostas de proteínas e lipídeos. O gráfico abaixo mostra alterações na fluidez de membranas com colesterol (azul) e sem este lipídio (vermelho) em diferentes temperaturas. [pNPP] (M) 0 50 100 150 200 Ativ ida de (nm ole s p NP /mi n. g e nzim a) 0 2 4 6 8 10 12 14 1 2 a) Qual o efeito do colesterol? (0,5 pontos) b) Além da presença de colesterol, características dos ácidos graxos que compõem os fosfolipídeos também interferem na fluidez da membrana. Comente essa afirmativa. (0,5 pontos) c) Por que este efeito seria biologicamente importante? (1,0 ponto)
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