Aula 14 (Validação de métodos cromatográficos)

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Cromatografia InstrumentalCromatografia Instrumental
Alexandre SchulerAlexandre Schuler
Departamento de Engenharia Química
Universidade Federal de Pernambuco
Décima quarta Aula
Validação de Métodos CromatográficosValidação de Métodos Cromatográficos
DESENVOLVIMENTO DE UM DESENVOLVIMENTO DE UM 
MÉTODO ANALÍTICOMÉTODO ANALÍTICO
� Seleção do tipo de cromatógrafo (a gás ou a líquido);
� Seleção do detetor, em função dos compostos a serem 
analisados e de suas concentrações;
� Parâmetros de funcionamento do detetor;� Parâmetros de funcionamento do detetor;
� Seleção da coluna;
� natureza da Fase Estacionária (e sua granulometria, caso seja 
sólida).
� dimensões da coluna (comprimento e diâmetro);
� Concentração da Fase Estacionária (FE líquida), natureza e 
granulometria do suporte, no caso de FE líquida;
DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO 
ANALÍTICO (cont.)ANALÍTICO (cont.)
� Seleção da temperatura (ou programação de temperatura) 
para a coluna, no caso de CFG;
� Seleção da Polaridade da Fase Móvel ou do Gradiente de � Seleção da Polaridade da Fase Móvel ou do Gradiente de 
Polaridade, se necessário, no caso de CFL (HPLC);
� Determinação do Limite de Detecção (LD) e da Faixa de 
Linearidade Dinâmica (FLD);
� Determinação dos Fatores de Resposta.
DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO 
ANALÍTICO (cont.) ANALÍTICO (cont.) 
� Determinação das demais condições de análise: volume 
injetado, técnica de injeção, temperatura do vaporizador 
(em CFG) e do detetor e vazão da fase móvel (ou gradiente);
� Concentração dos componentes na solução padrão, 
natureza do solvente empregado e técnicas de amostragem 
e de preparação da amostra e da solução padrão;e de preparação da amostra e da solução padrão;
� Método de cálculo utilizado;
� Número mínimo de determinações em paralelo e erro 
máximo (reprodutibilidade);
� Avaliação do erro estatístico global, associado às diversas 
operações (preparação de soluções, técnica de 
amostragem, técnica de injeção e medição de área); 
expressão do resultado final.
VALIDAÇÃO DE UM MÉTODO ANALÍTICOVALIDAÇÃO DE UM MÉTODO ANALÍTICO
� Determinação do tempo de retenção de todos os 
componentes eventuais ou não;
Complementação da identificação do analito, por 
2- Procedimento
� Complementação da identificação do analito, por 
outras técnicas;
� Avaliação estatística de todo o procedimento 
analítico.
Erro Grosseiro
Pico estranho
Erro Grosseiro (Cromatograma correto)
Pico “estranho”
Fim da Décima quarta Aula