protocolo questionário 8

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QUESTIONÁRIO 08 – BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR
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A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas por meio de um gel sobre o qual é aplicada uma diferença de potencial. Ela pode ser utilizada para a separação de proteínas, DNA e RNA.
Sobre o assunto, julgue os itens colocando V para verdadeiro e F para falso.
(         ) A separação de proteínas é geralmente feita em um gel de poliacrilamida-SDS (dodecilsulfato de sódio), o qual possui ligações cruzadas como uma matriz, pelas quais as proteínas migram.
(         ) Inicialmente, as proteínas são dissolvidas em um detergente fortemente carregado negativamente, o SDS. Isso vai fazer com que a proteína seja desnaturada em uma cadeia estendida e totalmente solúvel na solução.
(         ) As proteínas adquirem uma carga positiva, de forma que, ao aplicarmos uma voltagem, migrem para o polo positivo. Assim, são excluídas as variáveis carga e forma, de maneira que apenas o tamanho da proteína irá influenciar na velocidade de migração.
(         ) Outra técnica que pode ser empregada é a eletroforese em gel de agarose, muito usada para a separação de moléculas de DNA, RNA e proteínas maiores do que 200 kDa.
 
A sequência CORRETA é:
· V, V, V, V
· F, V, V, F
· V, V, F, V
· F, F, V, F
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Os diferentes métodos de ________________em gel permitiram o desenvolvimento de novas técnicas, como as de detecção de _________. A eletroforese em gel permite que fragmentos de DNA, mRNA e _____________sejam analisados separadamente. Essas técnicas são utilizadas em diversas áreas do conhecimento, como ciências forenses, biologia molecular, genética, microbiologia e bioquímica.
A sequência CORRETA é:
· eletroforese – moléculas – proteínas específicas.
· detecção de DNA – moléculas– DNA.
· detecção de DNA - fibrinas – DNA.
· eletroforese – fibrinas – proteínas específicas
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A detecção de moléculas específicas, como fragmentos de DNA, mRNA e proteínas, é muito utilizada tanto na pesquisa como em testes diagnósticos. Para todas as técnicas de detecção que estudamos, o primeiro passo é a eletroforese em gel. Podemos concluir que a afirmativa é:
· VERDADEIRA
· FALSA
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Após a realização da eletroforese em gel de proteínas, é possível identificar uma proteína específica pela exposição de todas presentes no gel a um anticorpo contra esta de interesse, marcado com um isótopo radioativo ou corante fluorescente. Essa técnica se chama:
· Western blot
· Southern blot.
· Northern blot.
· Edwin Southern.
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As técnicas de detecção de moléculas são amplamente utilizadas na biologia molecular e na bioquímica. A técnica de Western blot é utilizada para a detecção qualitativa de proteínas específicas e modificações das mesmas.  Sobre o assunto, assinale a alternativa CORRETA:
· Ademais, essa técnica é utilizada para diagnósticos médicos de doenças como o HPV, variante da doença de Creutzfeldt-Jakob e doença de Lyme.
· O Southern blot, por sua vez, pode ser utilizado para a identificação de genes heterogêneo de espécies iguais, com base na sequência já conhecida de uma espécie.
· A membrana é exposta a uma sonda cuja sequência é complementar à sequência do gene de interesse de outra espécie, de modo que os fragmentos que hibridizarem com essa sonda possam ser posteriormente analisados.
· O Northern blot é utilizado para a análise dos padrões de expressão gênica entre tecidos, órgãos e iguais condições de uma célula. Essa técnica já foi utilizada para a avaliação da expressão de oncogenes e de genes supressores de tumor em células cancerígenas em comparação com células sadias.
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