Amplificação In Vitro de DNA

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Lista de exercícios Amplificaç... T Sair Questão 1 de 10 Você acertou 10 de 10 questões 1 2 3 4 5 Verifique seu desempenho e continue 6 7 8 9 10 treinando! Você pode refazer exercício quantas vezes quiser. Corretas (10) Em branco (0) Verificar Desempenho 1 Marcar para revisão SNPs são empregados amplamente para a Cor identificação humana e possuem diferenças Conte relevantes. A análise dos SNPs também pode estar associada aos fenótipos individuais, havendo uma possibilidade futura de identificação de traços físicos como, por exemplo, a cor da íris. Os SNPs são: Elementos repetitivos do genoma A nuclear Sequências presentes somente no DNA mitocondrial c Homozigotos 1Polimorfismos de nucleotídeo único; D uma variação na sequência de DNA E Heterozigotos Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado Os SNPs, ou Polimorfismos de Nucleotídeo Único, são variações na sequência de DNA que ocorrem quando um único nucleotídeo T, c ou G) na sequência do genoma é alterado. Eles são uma ferramenta importante na genética e na genômica, pois podem ajudar a identificar genes Cor associados a doenças e a responder a Conte medicamentos. Portanto, a alternativa correta é a D: "Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA". 2 Marcar para revisão A curva padrão desempenha um papel essencial na quantificação absoluta de um DNA alvo em uma amostra. Qual é a finalidade da curva padrão em quantificação absoluta de DNA alvo? 1Determinar a temperatura ótima de A amplificação do DNA alvo. Calibrar a concentração de reagentes na reação de amplificação. Estabelecer a linearidade e eficiência da amplificação para cálculos precisos. Identificar a sequência específica do D DNA alvo. Avaliar a presença de contaminantes E na amostra. Resposta correta Cor Parabéns, você selecionou a Conte alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado A curva padrão é essencial para a quantificação absoluta de DNA alvo, permitindo relacionar ciclo de limiar (Ct) de uma amostra desconhecida com a quantidade de DNA presente nela. Através da linearidade da curva e da eficiência de amplificação, podemos calcular com precisão a concentração de DNA nas amostras, garantindo resultados confiáveis. 1 Marcar para revisãoA principal função do PCR multiplex é permitir a detecção simultânea de múltiplos alvos de DNA em uma única reação. Qual é a principal função da técnica de PCR multiplex no diagnóstico de doenças genéticas? Amplificar regiões próximas de A repetições de DNA. Identificar a presença de infecções virais. Determinar a estrutura tridimensional c de proteínas. Avaliar a expressão gênica em D diferentes tecidos. Cor Detectar pequenas mutações em E Conte alelos distintos. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado A técnica de PCR multiplex é utilizada para detectar pequenas mutações em alelos distintos em uma mesma reação. Isso é especialmente útil para reconhecer mutações que poderiam levar ao de doenças genéticas, como no caso de alelos mutantes 1 iados a doenças hereditárias.4 Marcar para revisão A Biotecnologia trabalha predominantemente manipulando material genético de seres vivos; para a maioria dos organismos, o material genético é a molécula de DNA. Acerca da estrutura da molécula de DNA, assinale a opção correta. DNA é composto por quatro tipos de A bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina e uracila. açúcar contido na molécula de DNA é a ribose. Em uma cadeia de DNA, os c nucleotídeos se ligam aos açúcares e Cor fosfatos por pontes de hidrogênio. Conte As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por D pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. Há complementaridade entre as bases E nitrogenadas adenina e timina e entre guanina e uracila. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! 1 rito ComentadoAs duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. Isso ocorre porque a estrutura do DNA é uma dupla hélice, onde as bases nitrogenadas de cada fita se ligam às da outra fita por meio de pontes de hidrogênio, formando pares de bases. Adenina sempre se liga à timina e citosina sempre se liga à guanina, garantindo a complementaridade e a replicação precisa do DNA. 5 Marcar para revisão Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma Cor inicial, após a descrição de um marcador Conte voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados. Considerando as aplicações da PCR, assinale a opçã 1 orreta.Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short A tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas. A RT-qPCR permite a amplificação por c meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas. Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar D diferentes sequências simultaneamente. Cor Ao se planejar um experimento para Conte identificação de indivíduos, deve-se E ter cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado A amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Isso ocorre porque essas repetições são únicas 1 ada indivíduo, funcionando como espécie de "impressão digital" A técnica de PCR permiteamplificar essas sequências específicas de DNA, tornando possível a identificação de indivíduos a partir de pequenas amostras de material genético. 6 Marcar para revisão A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) desempenha um papel fundamental na biologia molecular, possibilitando a amplificação seletiva de segmentos específicos de DNA. Qual é a diferença central entre a PCR qualitativa e a PCR quantitativa (em tempo real)? A PCR qualitativa requer ciclos adicionais para quantificar produto, A enquanto a PCR quantitativa não necessita de revelação posterior. Cor Conte A PCR quantitativa é mais rápida e não exige revelação posterior, enquanto a PCR qualitativa é mais lenta. A PCR qualitativa ocorre em um termociclador especializado (tempo c real), enquanto a PCR quantitativa utiliza um termociclador comum. 1A PCR quantitativa é mais sensível na detecção de alvos específicos D necessitando de amplificação em tempo real, enquanto a PCR qualitativa é mais rápida na amplificação. A PCR qualitativa não requer amplificação do produto alvo, E enquanto a PCR quantitativa quantifica a presença do alvo em tempo real. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado A principal diferença entre a PCR Cor qualitativa e a PCR quantitativa (em tempo Conte real) é que a PCR qualitativa requer ciclos adicionais para amplificar produto alvo e, posteriormente, uma etapa de revelação para determinar a presença ou ausência do alvo amplificado. Por outro lado, na PCR quantitativa em tempo real, a amplificação e a quantificação são realizadas simultaneamente, eliminando a necessidade de uma etapa adicional de revelação. 7 Marcar para revisão A importância primordial da sensibilidade da 1 diversos cenários eculares, incluindo diagnósticos clínicos, pesquisas genéticas e análises de patógenos.Nesse contexto, qual é exatamente conceito subjacente à sensibilidade da PCR? Sensibilidade da PCR refere-se à capacidade de amplificar DNA em A altas temperaturas, o que facilita a detecção. Sensibilidade da PCR representa a habilidade da enzima Taq polimerase em se ligar ao DNA-alvo. Sensibilidade da PCR é a quantidade c máxima de DNA que pode ser amplificada em uma reação. Sensibilidade da PCR é a capacidade D de detectar sinal do DNA-alvo em amostras contendo-o na realidade. Cor Conte Sensibilidade da PCR é a velocidade E com que os produtos de amplificação são gerados. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado A sensibilidade da PCR se refere à capacidade de identificar e amplificar com precisão sequências de DNA-alvo presentes em baixas concentrações nas 1 ras. É importante para a detecção ável de alvos moleculares mesmoquando estão presentes em quantidades mínimas. 8 Marcar para revisão No âmbito da replicação do DNA in vitro, a enzima polimerase assume um papel de extrema importância e centralidade. Qual é a principal função desempenhada pela enzima polimerase durante a replicação do DNA em ambiente controlado? Abrir a fita dupla de DNA em fitas A simples. Adicionar os primeiros nucleotídeos à fita sintetizada. Cor Conte Realizar a complementação das bases nitrogenadas. Quebrar as pontes de hidrogênio entre D as bases. Neutralizar a carga elétrica das bases E nitrogenadas. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! 1 rito ComentadoA enzima polimerase é responsável por ler cada base nitrogenada da fita molde (simples) e adicionar a base nitrogenada complementar na fita que está sendo sintetizada, formando a nova fita de DNA. Essa complementação das bases nitrogenadas (A com T e c com G) é fundamental para a replicação precisa da informação genética. 9 Marcar para revisão No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para prognóstico de tumores malignos. A figura Cor abaixo apresenta ciclos de amplificação de Conte amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. 1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 Threshold 0,0 12 3 Ciclos NASCIMENTO, S.; SUAREZ, E.R.; PINHAL, M.A. S. Tecnologia de PCR RT-PCR em tempo real suas aplicações na área médica. Revista Brasileira de Medicina, Especial Oncologia, São Paulo, V. 67, p. 7-19, nov. 2010 (adaptado). A partir 1 das informações apresentadas, conclui-Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha A do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da c amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. Cor Conte A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que D ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra e no ciclo 40, para a amostra maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas e indica maior expressão E comparativamente às células neoplásicas (B), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral. 1 Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confiragabarito comentado! Gabarito Comentado A resposta correta é: Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. 10 Marcar para revisão Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. mRNA 5' AAAAAA 3' 1 5' AAAAAA 3' 2 Cor 5' AAAAAA Conte 3' 3 5' 3' 4 5' DNA 3' AAAAAA TTTTTT Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a A atividade da enzima transcriptase reversa. A reação mostrada na etapa 4 ilustra a B atividade da enzima DNA polimerase. 1Na etapa 4, para que ocorra a reação, c é suficiente a adição dos nucleosídios representados por U, C, G. DNA obtido pelo método ilustrado é D denominado tDNA. A reação mostrada na etapa E demonstra a desnaturação da fita de mRNA. Resposta correta Parabéns, você selecionou a alternativa correta. Confira gabarito comentado! Gabarito Comentado Cor A resposta correta é: A reação mostrada na Conte etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. 1