RELATÓRIO DE AULAS PRATICAS Biologia molecular aplicada a biomedicina - Resumo

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## Resumo do Relatório de Aulas Práticas – Biomedicina: Biologia Molecular Aplicada à BiomedicinaEste relatório detalha as atividades práticas realizadas no curso de Biomedicina da Universidade Paulista (UNIP), na disciplina de Biologia Molecular Aplicada à Biomedicina, conduzidas nos dias 07 e 28 de outubro de 2023. As práticas abordaram desde o uso correto de micropipetadores, passando por protocolos de extração de DNA em diferentes organismos, até a aplicação de ferramentas bioinformáticas para análise genômica e desenho de primers.### Uso de Micropipetadores: Técnicas e PrecisãoA primeira aula prática teve como objetivo principal ensinar o uso correto dos micropipetadores, instrumentos essenciais para a manipulação precisa de pequenos volumes líquidos em laboratórios de biologia molecular. Foram identificados diferentes tipos de pipetas (P-10, P-100, P-200, P-1000), cada uma adequada para faixas específicas de volume, variando de 0,5 µL a 1000 µL. Os alunos realizaram exercícios práticos de pipetagem, escolhendo a pipeta correta para volumes variados, desde 1,5 µL até 1 mL, e observaram a importância da técnica correta para garantir a exatidão do volume transferido.Nas atividades seguintes, foram preparados microtubos com soluções em volumes controlados, utilizando micropipetas para volumes entre 1-20 µL e entre 100-1000 µL. A precisão da pipetagem foi verificada ajustando a pipeta para o volume total esperado (20 µL ou 1000 µL) e medindo o conteúdo dos tubos. Os resultados confirmaram a exatidão esperada, ressaltando a importância da manipulação adequada para evitar erros experimentais.### Extração de DNA: Protocolos em Vegetais e BactériasNas aulas seguintes, os alunos aplicaram protocolos práticos para extração de DNA a partir de diferentes fontes biológicas: morango, cebola e bactérias. A extração em vegetais envolveu etapas fundamentais como maceração para lise celular, adição de detergente e sal para romper membranas e estabilizar o DNA, filtragem para separar os resíduos celulares, e precipitação do DNA com álcool gelado. O DNA precipitado foi recolhido e lavado, podendo ser armazenado para análises posteriores, como eletroforese em gel de agarose.No protocolo de extração bacteriana, a técnica foi adaptada para a obtenção de DNA genômico, utilizando centrifugação para concentrar as células, seguida de lise com detergente SDS e tratamento com solventes orgânicos como clorofórmio para remover proteínas e outras impurezas. A etapa de precipitação com etanol resfriado permitiu a visualização do DNA, que foi então dissolvido em solução salina para posterior análise. Destaca-se que, devido ao uso de solventes tóxicos, essa etapa foi realizada sob capela de exaustão para garantir a segurança dos operadores.A comparação entre os protocolos evidenciou a importância de cada etapa para a eficiência da extração, ressaltando que a maceração, a adição de detergentes e sais, a filtragem e a precipitação são cruciais para isolar DNA puro e intacto, essencial para análises moleculares subsequentes.### Aplicação de Ferramentas Bioinformáticas: Análise Genômica e Design de PrimersNas últimas aulas, os alunos foram introduzidos ao uso de bancos de dados genômicos e ferramentas de bioinformática, com foco na análise do genoma do vírus SARS-CoV-2 e na busca de genes humanos no PubMed. Utilizando o site do NCBI, os estudantes acessaram a base de dados “genome”, localizaram a sequência do SARS-CoV-2, e exploraram conceitos como ORF (Open Reading Frame) e a organização genômica dos genes virais.Posteriormente, utilizaram a ferramenta Primer-BLAST para desenhar primers específicos para o SARS-CoV-2, avaliando parâmetros como tamanho do produto, temperatura de melting, conteúdo de GC e autocomplementariedade. A análise permitiu a seleção de pares de primers ideais para diferentes objetivos: um par para pesquisas detalhadas (produto maior) e outro para análises rápidas (produto menor), demonstrando a importância da bioinformática na otimização de experimentos moleculares.Além disso, os alunos aprenderam a buscar informações sobre genes humanos no PubMed, utilizando o exemplo do gene IDUA (alpha-L-iduronidase). Foram identificados dados importantes como o nome oficial do gene, seu código de identificação, localização cromossômica (4p16.3), número de éxons (18) e os principais tecidos onde o gene é expresso. Essa atividade reforçou a habilidade de utilizar bases de dados para pesquisa genética e análise funcional.---## Destaques- **Micropipetadores**: Aprendizado prático sobre o uso correto e a importância da precisão na manipulação de volumes microlitricos, com confirmação da exatidão dos volumes pipetados.- **Extração de DNA**: Protocolos aplicados em morango, cebola e bactérias, destacando etapas essenciais como lise celular, uso de detergentes, filtragem e precipitação com álcool, além da segurança no manuseio de solventes orgânicos.- **Bioinformática**: Uso do NCBI para análise do genoma do SARS-CoV-2, design de primers via Primer-BLAST e busca de informações genéticas no PubMed, integrando conhecimentos moleculares e computacionais.- **Importância didática**: As atividades práticas consolidaram conceitos teóricos, desenvolveram habilidades laboratoriais e promoveram o entendimento da aplicação da biologia molecular na pesquisa biomédica.- **Segurança e técnica**: Ênfase na manipulação correta dos equipamentos e reagentes para garantir resultados confiáveis e segurança dos operadores.Este relatório evidencia a integração entre teoria e prática na formação em Biomedicina, preparando os alunos para a execução de técnicas fundamentais em biologia molecular e para a utilização de ferramentas modernas de análise genética.