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1 Diluições 10 -3 , 10 -4 e 10 -5 forem plaqueadas em triplicata pela técnica do pour plate alternate e após incubação a 37 °C por 48 horas, o resultado foi o seguinte; 298, 290 e 276; 35, 37, 30 e, 12, 8 e 10. A concentração de bactérias na amostra original é: 2 Uma cultura bacteriana foi quantificada na fase log por contagem de células viáveis em placas (spread-plate) e foi encontrado um valor médio de 35 colônias nas placas da diluição 10 -5 . Após 180 minutos de incubação e sabendo que a bactéria duplica-se a cada 40 minutos foi realizada nova contagem em Câmara de Neubauer (volume de 2,5 x 10 -7 mL) e foi detectado um número médio de 4 células na diluição 10 -1 . Com base nestes dados calcule o número de gerações (n), tempo de geração e tempo de duração da fase LAG. 3. Uma amostra de água foi quantificada para coliforme termotolerantes pela técnica dos tubos múltiplos (NMP). Os resultados encontrados para as diluições 10 -4 , 10 -5 e 10 -6 e foram os seguintes (em ordem crescente de diluição): 3 tubos positivos; 1tubo positivo; 1tubo positivo. Escolha a alternativa que expressa à leitura desse teste para consultar a tabela de Hoskins e o fator de diluição utilizado. 4 Um meio de cultura foi cultivado com 1 x 10 5 UFC/mL no tempo zero, e após 6 horas de incubação, sendo 2 horas na fase LAG, a população final foi de 1 x 10 8 UFC/mL. Calcule o tempo de geração dessa cultura em minutos. 5 Vantagem da técnica do pour-plate em relação ao spread-plate e vice-versa 6 Considere que 10 células de uma bactéria anaeróbia facultativa foram inoculadas em meio ATGE e incubadas em condições aeróbicas. Um segundo inóculo com a mesma concentração foi incubado em condições anaeróbias. Após um período de 24 horas de incubação em qual situação o número de colônias será maior? 7 O teste confirmativo de NMP para coliformes totais apresentou os seguintes resultados: 10 -3 + + +; 10 -4 + + +, 10 -5 + + +; 10 -6 + + -, 10 -7 + - -, 10 -8 - - -. Qual a leitura e o respectivo fator de diluição para determinar o NMP/100 mL na tabela de Hoskins. 8 Suponha que a contagem de células viáveis em placas de uma determinada bactéria após 24 horas de incubação apresentou uma média de 2,38 x 10 7 UFC/mL. Qual a provável diluição que foi realizada a contagem? 9 Uma mostra de água foi diluída 10000 vezes e a partir desta diluição, realizou-se a contagem em Câmara de Neubauer de volume de 2,5 x 10 -7 mL. Considerando-se que o número total de células em 80 quadrados foi 240, calcule a concentração celular na amostra de água. 10 Se A for o tempo de geração de uma dada espécie bacteriana durante a fase exponencial e B o tempo de geração da mesma espécie durante a fase Lag da mesma curva em qual situação o tempo de geração será maior? 11 O número de células de uma cultura na fase logarítmica de crescimento foi determinado pelos métodos de contagem total por microscopia e por contagem de células viáveis em placas. Esses valores serão iguais, maiores ou menores? 12 Qual o fator de seletividade na análise de coliformes termotolerantes pela técnica do NMP? 13 Qual a fase da curva de crescimento em sistema fechado que se caracteriza por apresentar tempo variável, elevada atividade metabólica, sem aumento da população? UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ CENTRO DE CIÊNCIAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA - SETOR DE MICROBIOLOGIA REVISÃO 2 AP MICROBIOLOGIA GERAL 2013-02 TURMAS 2A e 2B 14) Qual o principal objetivo da técnica de crescimento em culturas contínuas? 15 Cite dois critérios para seleção de micro-organismos indicadores 16 Principais gêneros de bactérias do grupo coliforme 17 Como é denominado o grupo de coliformes que continuam fermentando lactose com produção de gás, quando incubadas à temperatura de 44,5ºC? 18 Qual característica metabólica que se constitui o fundamento da técnica do NMP de bactérias do grupo coliforme? 19 Qual o fundamento da técnica de contagem de células viáveis em placas? 20. Qual a grandeza do número de células em uma colônia de Bacillus subtilis no meio ATGE após 24 h de incubação a 37 °C? 21 Quais são os substratos da prova bioquímica para produção de H2S no meio SIM? 22 Qual coloração que indica positividade do teste de produção de H2S 23 Quais as principais características que diferenciam o processo de fermentação em relação à respiração aeróbica e anaeróbica todos usados para produção de energia? 24 Qual processo metabólico de produção de energia que se caracteriza pela produção final de nitratos, sulfatos e carbonatos? 25 Entre os processos microbianos de produção de energia qual apresenta maior rendimento em produção de ATPS? 26 Produtos resultantes da oxidação completa da glicose. 27 Quais substratos são usados para avaliar a produção de indol e acetil metil carbinol? 28 Cite um produto final característico de metabolismo proteico nas chamadas provas do IMViC. 29 Quais as principais características das bactérias do grupo coliforme? 30 Qual processo metabólico de produção de energia que apresenta somente fosforilação a nível de substrato? 31 Quais os aceptores finais de elétrons nos processos de fermentação, respiração aeróbica e respiração anaeróbica? 32 Quais as vias metabólicas fermentativas consideradas nos testes denominados Vermelho de Metila e Voges-Proskauer? 33 Qual a enzima presente nas bactérias que degradam o peróxido de hidrogênio? 34 Qual teste bioquímico é usado para testar a produção ácidos até pH 4,4 a partir da glicose? 35 Que provas bioquímicas do IMViC usam o mesmo meio de cultura? 36 Que cor caracteriza a positividade do teste para identificar bactérias capazes de utilizar citrato de sódio como única fonte orgânica de carbono? 37 Cite uma técnica de preservação de culturas a de curto, médio e longo prazo 38 Quais os meios de cultura usados para os testes de coliformes presuntivo, confirmatório e termotolerantes? 39 Qual fator seletivo é usado para inibir o crescimento de bactérias Gram-positivas fermentadoras da lactose no teste do NMP de bactérias do grupo coliforme? 40 Qual a principal vantagem da técnica do pour-plate alternate em relação ao pour plate?
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