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01/08/2016 1 O estudo dos micro-organismos e da sua relação com o ambiente; Micróbio/micro-organismos/microrganismos formas de vida diminutas invisíveis a olho nu (????) bactérias, fungos, protozoários, algas microscópicas e vírus (vírus são formas de vida??); A maioria é unicelular; Em virtude do tamanho dos microrganismos, a microbiologia, como ciência, só se desenvolveu após a invenção e o aperfeiçoamento dos microscópios. INTRODUÇÃO À MICROBIOLOGIA A vida na Terra 01/08/2016 2 Microrganismos são essenciais para a manutenção do equilíbrio dos organismos e do meio ambiente: Microrganismos marinhos e de água doce base da cadeia alimentar; Microrganismos de solo degradação e ciclagem; Microrganismos simbiontes; Microrganismos fotossintetizantes. Microrganismos têm grandes aplicações comerciais alimentos, energia, medicamentos, enzimas, etc... engenharia genética. INTRODUÇÃO À MICROBIOLOGIA O impacto dos Micro-organismos 01/08/2016 3 Micro-organismos como agentes de doenças A microbiologia teve suas raízes no estudo das doenças infecciosas No início do século XX, os micro-organismos eram as principais causas de morte grande número de idosos e crianças sucumbiam devido a doenças microbianas Desenvolvimento da microbiologia maior compreensão dos processos das doenças, melhoria das práticas sanitárias e ambientais controle e redução das doenças infecciosas Micro-organismos e Agricultura Algumas das principais culturas envolvem leguminosas, que vivem em estreita associação com bactérias fixação do nitrogênio é dispensado assim o uso de fertilizantes nitrogenados dispendiosos e poluentes Ruminantes processo digestivo dependente de microrganismos Os microrganismos são os principais responsáveis pela ciclagem dos elementos químicos necessários à vida: carbono, nitrogênio, oxigênio e enxofre. Por outro lado, além dos efeitos benéficos à agricultura, os microrganismos também podem trazer efeitos negativos: doenças microbianas em plantas e animais. 01/08/2016 4 Micro-organismos e Alimentos Uma vez que vegetais e animais produzidos são destinados ao consumo humano, eles devem ser disponibilizados de forma saudável controle do desenvolvimento microbiano evitar decomposição dos alimentos Por outro lado, nem todos os microrganismos tem efeitos nocivos sobre os alimentos ou sobre aqueles que os ingerem há alimentos produzidos que dependem de transformação microbiana Micro-organismos, energia e meio ambiente Produção de biogás a partir de atividades metabólicas de bactérias sobre dejetos Produção de biomassa a partir de energia luminosa Produção de combustíveis a partir de biomassa Produção de combustíveis por conta da fermentação Degradação de poluentes biorremediação decompor e/ou consumir óleo derramado, solventes, pesticidas... Enzimas bacterianas podem ser usadas para desentupimento de bueiros Estações de tratamento de esgoto combinam processos físicos com a ação microbiana bactérias convertem materiais orgânicos em dióxido de carbono, nitratos, fosfatos, sulfatos, amônia... 01/08/2016 5 Biotecnologia e Microbiologia O uso de microrganismos com vistas à obtenção de um produto, constitui um processo biotecnológico Embora a biotecnologia ocorra há milênios, as técnicas empregadas se tornaram mais sofisticadas nas últimas décadas, principalmente com o advento da tecnologia do DNA recombinante engenharia genética produção de enzimas, vacinas... otimização de processos industriais... “O papel dos infinitamente pequenos na natureza é infinitamente grande” Louis Pasteur 01/08/2016 6 Embora os microrganismos estejam há milênios ao nosso redor (e há bilênios no planeta), a microbiologia é recente; 1665 Robert Hooke, ao observar uma fina fatia de cortiça, relatou que as menores unidades vivas eram “pequenas caixas/celas” “células” teoria celular “todas as coisas vivas são compostas por células”; Em seu livro Micrographia, do mesmo ano, representou estruturas de frutificação de bolores coletados de couro. HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA Fig. 1.9 1676-1684 Anton(i) van Leeuwenhoek descobriu as bactérias descreveu como “animálculos” usou como amostra: água da chuva, suas próprias fezes e material raspado de seus dentes. HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA Fig. 1.10 01/08/2016 7 HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA Após van Leeuwenhoek, o progresso no estudo dos minúsculos organismos foi lento por cerca de 150 anos Século XIX microscópios aperfeiçoados e mais amplamente difundidos formas de vida microbiana passaram a ser mais observadas No mesmo período, é questionada e derrotada a teoria de geração espontânea Louis Pasteur Até a metade do séc. XIX, muitos cientistas acreditavam que algumas formas de vida poderiam surgir espontaneamente da matéria morta geração espontânea (as pessoas acreditavam que sapos, cobras e camundongos poderiam nascer do solo úmido, que moscas poderiam surgir do estrume e que larvas de insetos poderiam surgir de corpos em decomposição) Defensores da geração espontânea apresentavam objeções a experimentos onde caldos nutrientes eram fervidos e imediatamente lacrados, pois alegavam que a “força vital” (ar) tinha sido destruída pelo calor e impedida de entrar em contato com os caldos por conta dos lacres. Em 1861, entretanto, experimentos de Pasteur refutaram a geração espontânea. 01/08/2016 8 HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA 01/08/2016 9 HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA 01/08/2016 10 Fermentação e Pasteurização Pasteur descobriu que a fermentação (fermentare = ferver, ebulir, borbulhar), que transformava açúcar em etanol durante a produção da cerveja e do vinho, era conduzida por microrganismos (naquela época achava-se que o ar era responsável por essa transformação) leveduras (levare = fazer crescer – devido ao aumento do volume do mosto em razão da liberação do gás e da formação de espuma); Mercadores queriam também entender o porquê do azedamento dessas bebidas Pasteur descobriu que o motivo eram bactérias; Solução do problema aquecimento matava a maioria das bactérias que causavam o estrago PASTEURIZAÇÃO. Fig. 1.14 Teoria do Germe da Doença A descoberta de que as leveduras têm um papel fundamental na fermentação foi a primeira ligação entre a atividade de um microrganismo e as mudanças químicas e físicas nas matérias orgânicas alertou os cientistas para o fato de que microrganismos pudessem ter relações similares (alteração na matéria) em plantas e animais – ou seja, que pudessem causar doenças teoria do germe da doença; Difícil de aceitar na época explicações místicas doentes de uma vila eram afetados por “demônios na forma de odores dos esgotos” ou na forma de “venenos dos pântanos” achava-se inconcebível micróbios “invisíveis” viajarem pelo ar e infectar plantas e animais; Aos poucos os cientistas foram acumulando fatos para dar suporte à teoria do germe Ex.: Joseph Lister aplicou a teoria aos procedimentos médicos assepsia para diminuir a transmissão de infecções de um paciente para outro foi propulsor do desenvolvimento de desinfetantes mais tarde; A primeira prova de que bactérias realmente causam doenças foi fornecida por Robert Koch em 1876 descobriu uma bactéria na forma de bastonete (Bacillus anthracis) no sangue de gado que morrera de antraz cultivou a bactéria isolada e injetou em animais sadios que desenvolveram a doença e morreram tornou a isolar e comparou com as bactérias originalmente isoladas postulados de Koch. 01/08/2016 11Penicilina: um acidente de sorte. 01/08/2016 12 HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA 01/08/2016 13 MICROBIOLOGIA E MICROSCOPIA A microbiologia e a microscopia progrediram lado a lado; Tão importante quanto o aumento é a resolução (a capacidade de distinguir dois objetos) resolução do olho humano é de 0,1 mm e do microscópio óptico é de 0,2 mm Microscopia Óptica 01/08/2016 14 Microscopia Óptica de Campo Claro No microscópio de campo claro, os espécimes são visualizados em virtude das diferenças de contraste entre eles e o meio células absorvem ou dispersam a luz em graus variáveis Células bacterianas são normalmente de difícil visualização devido à ausência de contraste em relação ao meio Coloração aumenta o contraste e melhora a imagem corantes são compostos orgânicos, sendo que cada classe apresenta afinidades específicas por determinados compostos celulares Microscopia Óptica de Campo Claro A realização de uma coloração simples deve ser iniciada a partir de preparações celulares secas, fixadas pelo calor Em seguida, adiciona-se o corante Em virtude do tamanho das células (principalmente depois de secas), utiliza-se a objetiva de imersão Fig. 2.3 01/08/2016 15 Microscopia Óptica de Fluorescência 01/08/2016 16 Microscopia Eletrônica Microscópios eletrônicos utilizam feixes de elétrons em vez de feixe de fótons São adaptados com câmeras, permitindo a obtenção de uma fotografia micrografia eletrônica Maior resolução comprimento de onda dos elétrons é muito menor que o da luz visível (comprimento de onda afeta a resolução) MET e MEV MET Fig. 3.10 01/08/2016 17 MEV Fig. 3.10 Bacillus subtilis Rhodovibrio sodomensis MET e MEV geram imagens em preto e branco Fig. 2.10 01/08/2016 18 Fig. 3.2 Microbiota Normal 01/08/2016 19 Biofilmes
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