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GENÉTICA BACTERIANA Albert Martins Genoma bacteriano Cromossomo Plasmídio Elementos transponíveis Cromossomo: DNA Único, circular e dupla fita Capacidade de replicação e transmissão das moléculas hereditárias Sem envoltório nuclear DNA Bases: 1-Púricas:A e G 2-Pirimídicas Açúcar: Desoxirribose Fosfato Pontes de hidrogênio Replicação Semiconservativa: A dupla hélice original se abre e cada filamento atua como olde para a replicação do DNA Após a síntese, a molécula-filha possui um filamento original e um filamento recém- sintetizado. Síntese in vitro de DNA:PCR - Molécula de DNA de fita dupla, circular e super- enovelada - Replicação autônoma (independente do cromossomo) ou juntamente com a bactéria Plasmídios Plasmídios (cont.) plasmidio F (Fertilidade): passagem de genes para outra bactéria Plasmídeo Resistência (R): levam genes que codificam resistência a drogas Importância: Plasmídios (cont.) Resistência a íons de metais pesados produção de fatores de virulência (toxinas, adesinas,hemolisinas Importância: Fatores R (plasmídios de resistência) 2 componentes: RTF: fator de transferência de resistência (genes para que o plasmídio sofra conjugação) R: gene de resistência Plasmídio de resistência -Fragmentos de DNA lineares -Podem mover-se de uma região para a outra, na mesma ou outra molécula podem inativar genes - Importância: Genes de resistência, produção de toxinas Elementos Transponíveis Seqüências de Inserção e Transposons Transposons Elementos de transposição contendo genes para transposição e também outros genes (ex.: genes R) Transposons Genes R Mudança de um plasmídio para outro em uma célula Mudança de um plasmídio para o cromossomo Como ocorre a variabilidade genotípica em bactérias? 1.Mutações 2.Aquisição de novo material genético através de - Transformação - Transdução - Conjugação Mutações Espontâneas Surgem durante a replicação Erros no pareamento de bases Mutações Induzidas Agentes mutagênicos Taxa acima da taxa espontânea Ex: agentes químicos, radiação - Captação de DNA livre por uma bactéria em estado fisiológico apropriado (estado de competência) 1. Transformação: Mecanismos de transferência genética em bactérias Transformação Transformação DNA livre no meio Ex: resistência a penicilina: N. gonorrhoea Transformação-1 A bactéria doadora morre e é degradada Transformação-2 Um fragmento de DNA da bactéria morta liga-se a proteínas específicas na parede celular de uma bactéria receptora, viva e competente. Transformação-3 A proteína RecA promove troca genética entre o fragmento de DNA da bactéria doadora e o DNA da bactéria receptora Transformação-4 A troca é completada 2. Transdução: Bacteriófago Mecanismos de recombinação genética em bactérias Bacteriófagos: vírus de bactérias Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-1 Bacteriófago lítico adsorve-se a uma bactéria susceptível Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-2 O genoma do bacteriófago entra na bactéria e direciona o maquinário metabólico bacteriano para confeccionar componentes e enzimas virais Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-3 Ocasionalmente, uma cabeça ou capsídeo do bacteriófago incorpora, por engano, um fragmento do genoma ou um plasmídeo da bactéria hospedeira (doadora), ao invés do genoma do fago. Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-4 Bacteriófagos são liberados. Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-5 O bacteriófago portador do DNA da hospedeira anterior (doadora) adsorve-se a uma nova bactéria (receptora) Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-6 O bacteriófago insere o DNA da bactéria doadora que carrega em uma bactéria receptora Transdução Generalizada por Bacteriófago lítico-7 O DNA da bactéria doadora é trocado com o DNA homólogo da bactéria receptora. Transdução 3. Conjugação Mecanismos de recombinação genética em bactérias Transferência de DNA simples fita via ponte de conjugação Plasmídio F (fertilidade): gene que codifica proteínas que formam o pili sexual Conjugação bacteriana via pillus sexual Conjugação-1 A bactéria doadora tem um plasmídio F, que produz pili sexual(F) para se ligar a outra bactéria Conjugação-2 O pili sexual adere a uma bactéria (fêmea) (F-) que atua como receptora. Uma fita do plasmídio F é quebrada e transferida. Conjugação-3 O pili sexual retrai-se e é criada uma ponte entre as duas bactérias. Uma fita do plasmídio F entra na bactéria receptora. Conjugação-4 Ambas fazem uma fita complementar do plasmídio (portanto, são F+). Não ocorre transferência de DNA cromossômico nessas condições DNA recombinante Importância - isolamento de um gene em particular - Melhoramento vegetal e animal - Produção de vacinas
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