Exercício cultivo e identificação de microrganismos

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Curso: Enfermagem
Disciplina: Microbiologia
Exercício - cultivo e identificação de microrganismos
1. Meios de cultura são usados para cultivar microrganismos. Qual tipo de meio de cultura é mais adequado em cada situação abaixo?
a) Para cultivar um grupo de microrganismo e inibir o crescimento de outros grupos. 
Meio Seletivo
b) Para identificar características fisiológicas do microrganismo cultivado no meio. 
Meio Diferencial
c) Para cultivar uma grande diversidade de microrganismos com características e necessidades nutricionais desconhecidas. 
Meio Enriquecido
2. O que é uma cultura pura? Descreva um método para obter uma cultura pura. 
É a cultura com um tipo de microrganismo.
Métodos: 
Riscado em meio sólido;
Espalhamento em meio sólido;
Incorporação.
Riscado em meio sólido (Este método permite o isolamento e obtenção de culturas puras através do isolamento de colónias):
Após recolher o inóculo com a ponta da ansa, este é espalhado nas placas de Petri ou tubos de vidro, riscando a superfície com a ponta da ansa contendo o inóculo. A ansa deve ser esterilizada sempre que se mude de direção, por forma a ir reduzindo o número de células presentes no inóculo. 
Espalhamento em meio sólido:
Neste método, após diluição apropriada da amostra, são espalhados à superfície do meio sólido, 0.1 ml da amostra, com o auxílio de uma vareta de vidro em L, previamente esterilizada.
As placas são posteriormente incubadas, em posição invertida em atmosfera e temperatura adequadas, até ao aparecimento de colónias.
A observação das colónias obtidas à superfície de um meio de cultura sólido permite avaliar o grau de pureza de uma dada cultura. A presença de mais de um tipo de colónias na mesma placa indica que a cultura original não estava pura, ou seja, que se encontrava contaminada com outro microrganismo.
Incorporação:
Neste método a amostra diluída é pipetada diretamente sobre a placa de Petri e só depois é adicionado o meio de cultura sólido apropriado, no estado liquefeito. Neste método, obtêm-se colónias à superfície e no interior do agar.
3. Cite duas situações em que é mais vantajoso usar métodos de coloração do que usar cultivo de microrganismos. 
Coloração: diferenciar alguns tipos de bactérias (taxonomia) e para verificação do número total de células de uma amostra
Cultivo de microrganismos: para promover o crescimento de microrganismos e para estudos de diversidade microbiana
4. Por que bactérias Gram positivas são coradas em roxo e bactérias Gram negativas são coradas em rosa na coloração de Gram?
As bactérias Gram-positivas, que têm a parede celular composta por mureína, durante o processo de descoloração com álcool etílico, retém o corante, permanecendo com a coloração conferida pelo corante roxo. 
As bactérias Gram-negativas com parede celular composta predominantemente por ácidos graxos, perdem o complexo de iodo e são incapazes de reter o violeta de Genciana, assumindo a cor do corante de fundo (vermelha).