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MICROSCOPIA Alunos: Ariane Queiroga ________________________________________ Bianca Siqueira _________________________________________ Laísa Honorato _________________________________________ Vitor Yu Zhu ___________________________________________ Wallace Cataldo________________________________________ Professora: Paula Magalhães Turma: T222 Disciplina: Biologia 1 - Introdução Com a descoberta da microscopia, foi possível grandes avanços tecnológicos e descobertas. O microscópio é capaz de aumentar a imagem vista, sendo muito útil aos que necessitam dele, para observação de objetos muito pequenos. A primeira amostra dessa invenção foi criada por dois holandeses: Hans Janssen e Zacarias, que fabricavam lentes de óculos. Este aparelho consistia em duas lentes presas à extremidade de um tubo. Após, uma nova descoberta: o holandês Antonie van Leewenhoek, aperfeiçoou o microscópio, utilizando “apenas uma lente, pequena e quase esférica, entre duas placas de cobre”. Sua intenção era observar os seres vivos e partes da natureza. Robert Hooke, também contribuiu para o avanço tecnológico do microscópio, construindo uma ferramenta constituída de duas lentes, nas extremidades de um tubo de metal. Essas duas lentes são denominadas ocular e objetivas. Os microscópios fotônicos, usados no experimento, utilizam a luz. Permitem ampliações de até 1000 vezes. Além do microscópio, são utilizadas diversas técnicas e ferramentas como: resinas, corantes, fixadores e esmagamento, entre outras. 2 - Objetivo Conhecer e manipular as partes do microscópio com suas respectivas funções. Aprender a movimentar e focalizar amostras no aparelho. Entender os fenômenos ocorridos no microscópio (inversão, rebatimento e luminosidade do campo). Aprender a calcular a ampliação obtida no microscópio. Fazer observações de diferentes tipos de células. 3 - Materiais Microscópio Folha de papel Lápis Lâmina de vidro e lamínula Folhas de Setcraesia Papel absorvente e palito Corante (azul de metileno) Infusão previamente preparada Conta gotas Papel toalha Cultura de levedura em aproximadamente 37°C (Sacharomyces) Estilete Colônia de Asperqillus (fungo pluricelular) 4 - Procedimento (Método) Aula prática: Estudo de microscopia 1 Microscópio óptico Foi ligado o microscópio e observado suas funções, através do reconhecimento dos componentes mecânicos, tais como: Pé ou base Braço Platina Revólver tubo ou canhão Parafuso macrométrico Parafuso micrométrico E Componentes ópticos: Condensador Diafragma Fonte luminosa Lente ocular Lente objetiva Aula prática: Estudo de microscopia 2 Riscaram-se quatro letras (A, E, O e F) em pedaços pequenos de papel para serem observados no microscópio. Depois, colocaram-se esses pedaços nas lâminas, molhando-os com água destilada e acrescentando a lamínula por cima. Foi baixada a mesa com charriot com o auxílio do parafuso macrométrico, e em seguida introduzido o material para visualização. Levantou-se a mesa e observado a imagem com a objetiva de menor aumento (4x). Repetiu o procedimento nas outras letras. Aula prática: Diversidade celular Células vegetais Observação: Células de setcraesia Arrancou-se uma folha da planta, e com cortes delicados coletou-se uma epiderme da parte inferior da folha que apresenta cor de vinho. Foi preparada uma lâmina com a epiderme, colocando-se uma gotícula de água, e adicionando a lamínula por cima. Após a lamina preparada, foi observada a amostra nas objetivas de 10x e 40x, após a focalização. Células Animais Observação: Células da mucosa bucal Com um palito e papel absorvente raspou-se com cuidado o interior da boca, usando-se a ponta do palito. Recolheu-se saliva, que foi adicionada a uma lamina com uma gota de água e corante azul de metileno, e pôs-se a lamínula sobre a amostra. Em seguida foi observada nas lentes objetivas de 10x e 40x, após a focalização. Observação: Infusão Com o auxílio de um conta gotas colocou-se uma gota de infusão sobre a lâmina e pôs-se a lamínula sobre a amostra. Em seguida foi observada nas lentes objetivas de 10x e 40x, após a focalização. Células de Fungos Observação: Células de Sacharomyces (leveduras) Foi prepara da uma cultura de leveduras, feita de fermento Fleishmann (fermento biológico), água e glicose, água e glicose. Foi posta uma gota da cultura de leveduras com o auxílio de um conta gotas numa lamina, e coberta pela lamínula. Foi então observada nas lentes objetivas de 10x e 40x, após a focalização. Observação: Células de Aspergillus (mofo) Foi retirado com o estilete um pouco da colônia do fungo, com pequenas partes da cultura de fungos. Foi preso a uma lâmina e coberto por uma lamínula, sem estar pressionada. Foi então observada nas lentes de 10x e 40x, após a focalização. 5 - Resultados Aula prática: Estudo de microscopia 1 Parafuso macrométrico - Suspende e rebaixa a mesa (ou platina) que serve para colocar o objeto estudado. Revolver – peça giratória que abriga as lentes objetivas que possuem o aumento proporcionado. Parafuso micrométrico - Auxilia na focalização oferecendo mais nitidez a imagem. Diafragma - Controla a intensidade luminosa. Condensador- condensa os raios luminosos Pé ou base - Serve de apoio às restantes componentes do microscópio. E sustentar o microscópio em si. Coluna ou Braço - Fixo à base, serve de suporte aos outros elementos e serve para o transporte do microscópio. Mesa ou Platina - Onde se fixa a lâmina a ser observada, possui uma janela por onde passam os raios luminosos e também parafusos dentados que permitem deslocar a preparação. Charriot - Peça ligada à platina que possibilita mover a lâmina, permitindo a melhor centralização da mesma. Tubo ou canhão - Suporta a lente ocular na extremidade superior. Ocular – lente sobre a qual se coloca o olho para visualiza o material. Objetivas – lentes que estão voltadas para o objeto de estudo. Aula prática: Estudo de microscopia 2 Ao observar a letra “O” houve apenas o aumento da imagem. Ao observar a letra “A” notou-se que a letra apresenta-se invertida de cima para baixo (chamada de inversão). Na observação feita da letra “E” foi possível notar o rebatimento da imagem da esquerda para direita. Na visualização da letra “F” observou-se o rebatimento e inversão da imagem. Logo, as imagens observadas no microscópio sofrem inversões nos seus eixos (rebatimento e inversão), no caso da letra “O” não foi possível comprovar os dois fenômenos devido à forma circular da letra, no caso da letra “E” não foi possível observar a inversão da imagem devido à simetria da letra, o mesmo ocorre com a letra ”A”, mas o caso é que o eixo de simetria é vertical e não ocorre rebatimento, apenas inversão. As imagens visualizadas no microscópio são representadas abaixo: Aula prática: Diversidade celular Células Vegetais Observação: CÉLULAS DE SETCRAESIA Observam-se estruturas muito regulares devido ao fato de serem células de uma planta, ou seja, em plantas a primeira camada de tecido (revestimento) é a epiderme, formada por uma única camada de células diretamente ligadas umas às outras formando uma camada compactada sem espaços intercelulares. Na epiderme existem células aclorofiladas, elas variam quanto à forma, tamanho e arranjo. Existem também células com coloração roxa. Nos centros de algumas das estruturas hexagonais nota-se a presença de “boquinhas”, denominados Estômatos, que são responsáveis pela troca gasosa com o meio ambiente, é constituída por duas células com formato parecido com o do feijão, meio curvadinho, essas células são chamadas de células-guarda; que são ricas em clorofila, por esse motivo apresentam cores verdes. A imagem obtida no microscópio está representada abaixo: Células Animais Observação: CÉLULAS DA MUCOSA BUCAL Nota-se que essas células possuem um formato diferenciado das células vegetais. A célula da mucosa bucal tem umformato arredondado que é diferencia da Setcraesia, que possui um formato hexagonal, em células da mucosa não apresentam estruturas regulares como a da epiderme dos vegetais. É possível ver os limites da célula, e o núcleo dessa célula é um pequeno ponto localizado no centro da estrutura. A imagem visualizada no microscópio está representada abaixo: Observação: INFUSÃO Observam-se pequenos “pontos” que ficam girando e se movendo aleatoriamente, são protozoários, seres unicelulares e eucariontes, ao aumentarmos para uma objetiva maior, nota-se uma melhor visualização desses. É possível perceber a limitação das células pela sua membrana plasmática. A imagem abaixo é a representação da visualização no microscópio: Células de Fungos Observação: CÉLULAS DE SACHAROMYCES (leveduras) Na primeira imagem, vê-se uma cultura de fungos com forma cilíndrica e ovais, alguns com uma estrutura mais condensada. Na outra, nota-se esses organismos unicelulares com uma melhor visualização. Observação: CÉLULAS DE ASPERGILLUS (mofo) Na primeira imagem observa pequenos traços e pontos, na segunda imagem já é possível observar o fungo com mais nitidez, um fungo pluricelular de coloração branca amarelada com formação de pedúnculos. Observam-se hifas que formam o corpo do mofo e esporos (células reprodutoras). A imagem abaixo representa a visualização no microscópio: 6 – Discussão e conclusão Aula prática: Estudo de microscopia 1 O microscópio é um aparelho utilizado para aumentar e observar estruturas pequenas dificilmente visíveis ou invisíveis a olho nu. O microscópio óptico utiliza luz visível e um sistema de lentes de vidro que ampliam a imagem das amostras. Contém componentes mecânicos e ópticos. Aula prática: Estudo de microscopia 2 Existem várias técnicas para observação ao microscópio óptico, entre elas, estão: Observação vital, fixação e coloração das células, esfregaço, esmagamento e entre outras. A imagem ao ser observada e focalizada no microscópio na verdade está invertida de cima para baixo e rebatida da esquerda para a direita. Quando se usa objetivas de maior aumento deve-se abrir mais o diafragma, pois quando se aumenta a objetiva maior será a necessidade de iluminação. Ao iniciar a observação de um objeto deve começar pela objetiva de menor aumento, para ter maior área de abrangência tendo uma visualização mais geral. Aula prática: Diversidade celular Existem diversos tipos de células, no qual foi possível observar do tipo animal, vegetal e de fungos, cada tipo com suas características, como forma, arranjo, coloração e etc. As células dos animais não apresentam parede celular, pois é uma célula animal. Possuem núcleo individualizado (já que são eucarióticas), membrana plasmática e citoplasma. As células vegetais são semelhantes às células animais, mas contém algumas peculiaridades como a parede celular e os cloroplastos. Já as células de fungos não apresentam clorofila, portanto não realizam fotossíntese, todos os fungos são eucariotos que podem ser unicelulares (leveduras) ou multicelulares (mofo). Normalmente apresentam dois núcleos em suas células. 7- Bibliografia LAY-ANG, Giorgia. Microscopia. Disponível em: <http://www.brasilescola.com/biologia/microscopia.htm>. Acesso em: 01 de Fevereiro de 2013 EMBRAPA. PREPARO DE AMOSTRAS DE TECIDOS VEGETAIS PARA MICROSCOPIA. Disponível em<http://www.cnpab.embrapa.br/system/files/downloads/doc050.pdf>. Acesso em: 01 de Fevereiro de 2013.
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