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Hipernutrição e Desnutrição pelas grandes e pequenas ninhadas

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Hipernutrição e Desnutrição pelas grandes e pequenas ninhadas
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE NUTRIÇÃO
NUTRIÇÃO EXPERIMENTAL – SUBTURMA NC
1
INTRODUÇÃO
A hipernutrição (pequenas ninhadas) e a desnutrição (grandes ninhadas) durante o período pós-natal alteram permanentemente o fenótipo de maneira específica. Durante a vida intrauterina, o desenvolvimento do embrião e do feto é suscetível a mudanças ambientais. O efeito da exposição às condições adversas no período pós-natal pode modificar o fenótipo do indivíduo, tanto precocemente quando tardiamente. O tamanho da prole é uma das características que varia entre os estudos sobre programação fetal. Ratos criados em pequenas ninhadas é um modelo adequado para o estudo das consequências da hipernutrição precoce pós-natal. Estes ratos rapidamente desenvolvem obesidade. Ao contrário, ratos desnutridos devido à criação em grandes ninhadas desenvolvem baixo peso até o desmame.
EFEITOS DA MANIPULAÇÃO NEONATAL COM AGONISTA PARCIAL 5-HT1A SOBRE O DESENVOLVIMENTO DA LOCOMOÇÃO EM RATOS DESNUTRIDOS PELA TÉCNICA DAS GRANDES NINHADAS.  
Objetivo
Investigar os efeitos da administração crônica de buspirona sobre o desenvolvimento da locomoção em ratos de grandes ninhadas. 
Introdução
 A locomoção é uma característica vital e qualquerfator que atue durante um período de desenvolvimento relacionado a locomoção podem induzir alterações expressivas nesta. Temos como exemplo o sistema de neurotransmissão.
 O sistema de neurotransmissão que guarda maior relação com a locomoção é o serotoninérgico e entre os receptores serotoninérgicos, o 5-HT1A guarda grande influência sobre a locomoção.
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 Dentre os fármacos usados nas manipulações está a buspirona na quantidade de 10 mg/Kg(agonista parcial dos receptores 5-HT1A, que possui efeitos diversos sobre a locomoção).
 A nutrição e desnutrição também influenciam no desenvolvimento, poisum suprimento adequado de nutrientes é imprescindível para a manutenção do crescimento em todos os sistemas orgânicos e para o desenvolvimento de funções fisiológicas.
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 A desnutrição pode ser obtida através do aumento no tamanho das ninhadas (diminuindo a oferta de leite e expondo os filhotes a situações estressantes, podendo alterar o comportamento exploratório dos mesmos).
 Devido ao fato da escassez de trabalhos que correlacionem a manipulação do sistema serotoninérgico com o tamanho das ninhadas e a atividade locomotora, esse trabalho tem como propósito realizar essas relações.
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Metodologia
 86 ratos albinos da linhagem Wistar mantidos em um ambiente com temperatura e ciclo de luz controlada e constante, com acesso livre a água filtrada e dieta padrão do biotério (ração LABINA, 23% de proteína).
 Para induzir a desnutrição foram formadas ninhadas com 12 filhotes.
 Os animais foram amamentados durante os primeiros 21 dias pós-natais, período no qual receberam o tratamento farmacológico.
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 Nesse experimento houve a formação de 4 grupos: Grupo Normal Salina (GNSal), Grupo Normal Buspirona (GNB10), Grupo Grande Salina (GGSal) e Grupo Grande Buspirona (GGB10) (os quais receberam buspirona (10 mg/Kg) ou salina (NaCl 0,9%, 1ml/100g de peso), via subcutânea, do 1º ao 21º dia pós- natal entre 12h e 14h.
 Os animais foram filmados durante 2 minutos, enquanto se locomoviam livremente num campo aberto, no 8º, 14º, 17º, 21º, 30º e 60º dias de vida. 
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 Através de um programa de análise automática da locomoção foram extraídos os parâmetros: distância percorrida, velocidade média, energia cinética, tempo de parada, número de paradas e relação tempo de parada/número de paradas. Foi utilizado o teste Anova two-way (manipulação X idade) medidas repetidas, seguido do teste de Holm-Sidak. 
 
(Todos os procedimentos realizados foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) da Universidade Federal de Pernambuco, processo nº 23076.002659/2010-01.)
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Resultados
 Em relação à evolução ponderal, pudemos observar que não houve efeito da manipulação, nem da idade, nem houve interação entre manipulação e idade.
 Para o estudo do desenvolvimento da locomoção, no parâmetro de distância percorrida, foi observado efeito da idade e da manipulação, porém não houve interação entre os fatores.
 Foi observado aumento significativo da distância, comparada à idade anterior, em todos os grupos.
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 Os animais do grupo GGB10 apresentaram menor distância percorrida que os do grupo GNB10 (p<0,05). Na velocidade média, foi encontrado apenas efeito da manipulação, encontrando-se redução deste parâmetro no grupo GGSal em comparação ao GNSal. Não houve efeito da idade nem interação entre os fatores.
 Para a energia cinética não foi observado efeito da manipulação, nem da idade ou interação entre os fatores.
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 Nos parâmetros de imobilidade, não houve influência da idade.
 Houve influência da manipulação nos parâmetros tempo de parada, número de paradas e na relação tempo de parada/número de paradas.
 Os animais do grupo GGSal apresentaram, quando comparados aos grupo GNSal, menor tempo de parada, maior número de paradas e menor relação tempo de parada/número de paradas.
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Discussão
 Tamanho da ninhada (ninhadas grandes), ocasiona redução da distância percorrida e da velocidade média, além de alterar tempo de parada, número de paradas e relação tempo de parada/número de paradas, quando comparados aos ratos de ninhadas normais, o que representa um atraso no desenvolvimento e redução da locomoção.
 Wurtman e Miller (1976) estudando ninhadas de vários tamanhos, observaram que as ninhadas de 8 e de 12 filhotes não apresentaram diferença significativa no peso corporal em todas as idades examinadas, demonstrando que as ratas-mães foram capazes de produzir leite suficiente para alimentar seus filhotes.
 A quantidade de leite disponível para cada filhote nas ninhadas de 8 ratos pode ter sido a mesma disponível para as de 12 filhotes, o que justifica a não ocorrência de diferença no peso corporal entre as ninhadas normais e as grandes.
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 Estudos já demonstraram que o número de filhotes no início da amamentação determina a quantidade de leite produzida pela mãe.
 Como a técnica das grandes ninhadas, aplicada em nosso estudo, não induziu a desnutrição, a redução da atividadelocomotora entre os ratos provenientes de ninhadas grandes observada em nossos achados pode decorrer do estresse a que são submetidos os ratos nessa técnica.
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 Filhotes de grandes ninhadas são expostos a fatores estressantes durante o período de amamentação: sofrem maior frustração na conexão com a mãe e maior competição pela nutrição e recebem menor cuidado materno.
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 Observaram que ratos que sofreram privação materna (umrecurso que induz estresse neonatal) por 24h apresentaram redução da locomoção, em análise no teste de campo aberto. A diminuição da locomoção pode ser justificada pelo aumento da ansiedade, que é um reflexo da hiperresponsividade do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA) induzida pelo estresse neonatal.
 Alguns trabalhos demonstram que a buspirona diminui a atividade locomotora, entretanto, outros demonstraram que não afeta.
 Aragão (2009) observou que a utilização crônica de buspirona, em ratos, não alterou parâmetros de locomoção, nem durante a administração, nem depois de cessado o tratamento. A ausência de alterações mais expressivas da administração de buspirona aqui apresentadas pode ser justificada pelo uso muito prolongado (21 dias) da droga. Isto poderia ocasionar dessensibilização dos receptores 5-HT1A (Blier e Ward, 2003) antes que esses alcançassem o período mais crítico para sua atuação sobre o comportamento locomotor.  
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Conclusão
 
A desnutrição apresenta-se mais incisiva na redução da locomoção do que a manipulação neonatal crônica com agonista parcial 5-HT1A. Além disso, nosso estudo confirma a diminuição da atividade locomotora causada pela desnutrição induzida pela técnica das grandes ninhadas.
MEDIDAS MURINOMÉTRICAS E EFICIÊNCIA ALIMENTAR EM RATOS PROVENIENTES DE NINHADAS REDUZIDAS NA LACTAÇÃO E SUBMETIDOS OU NÃO AO EXERCÍCIO DE NATAÇÃO
Objetivo
Avaliar o crescimento corporal e a eficiência alimentar em ratos provenientes de ninhada reduzida no aleitamento.
Introdução
 A relação entre a nutrição no período perinatal e repercussões na vida adulta tem sido documentada por diversos pesquisadores. Um dos modelos experimentais proposto para induzir superalimentação, subsequente aumento do peso e hiperfagia na vida adulta é a redução do tamanho da ninhada ao nascer.
 A indução de superalimentação com ninhadas de ratos compostas por três filhotes detectaram de forma precoce aumento de peso corporal, hiperglicemia, hiperinsulinemia com resistência à insulina e alterações em estruturas hipotalâmicas de controle alimentar.
MEDIDAS MURINOMÉTRICAS E EFICIÊNCIA ALIMENTAR EM RATOS PROVENIENTES DE NINHADAS REDUZIDAS NA LACTAÇÃO E SUBMETIDOS OU NÃO AO EXERCÍCIO DE NATAÇÃO
 Um estímulo ambiental que pode interferir no ganho de peso total, na distribuição de massa corporal ou de gordura localizada e ainda na ingestão alimentar é a realização de exercício físico. 
 Diante do exposto, o estudo se propôs a avaliar o crescimento corporal e a eficiência alimentar de ratos provenientes de ninhadas reduzidas no aleitamento e que foram submetidos ou não ao exercício crônico de natação na adolescência.
MEDIDAS MURINOMÉTRICAS E EFICIÊNCIA ALIMENTAR EM RATOS PROVENIENTES DE NINHADAS REDUZIDAS NA LACTAÇÃO E SUBMETIDOS OU NÃO AO EXERCÍCIO DE NATAÇÃO
Metodologia
 Foram utilizados 25 ratos machos da linhagem Wistar.
 Ao terceiro dia de vida pós-natal, as ninhadas foram manipuladas para 10 (controle, n = 13) ou quatro animais (reduzidas, n = 12).
 Após o desmame, os machos foram mantidos em gaiolas individuais e receberam água e ração comercial Labina® durante todo o experimento.
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 A partir da idade de 60 dias (± 2) os animais foram subdivididos em sedentários (SED) e exercitados (NAT), formando quatro grupos: GN4-SED e GN10SED (provenientes de ninhadas não exercitadas com quatro e 10 animais, respectivamente) e GN4NAT e GN10NAT (provenientes de ninhadas e exercitadas com quatro e 10 animais, respectivamente).
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Exercício físico
 O grupo exercitado foi inicialmente ambientado ao meio líquido durante a primeira semana, começando com cinco minutos e acrescentando 10 minutos por dia até completar 45 minutos/dia. 
 Da segunda à sétima semana, os ratos se exercitavam livremente 45 minutos/dia, três vezes por semana. O grupo controle permaneceu durante o mesmo período dos exercitados em cuba com água sem realizar a natação.
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Parâmetros avaliados
Peso e comprimento corporal
 A mensuração do peso foi realizada a partir do terceiro dia de vida pós-natal até o desmame, com intervalo de três em três dias, e aos 30, 60 e 110 dias de vida.
 O ganho de peso (Peso final - Peso inicial) foi calculado nos intervalos de 3-21; 21-30; 30-60 e 60-110 dias de vida.
 O comprimento nasoanal foi realizado ao fim do experimento, após anestesia do animal, com as medidas registradas em papel milimetrado.
MEDIDAS MURINOMÉTRICAS E EFICIÊNCIA ALIMENTAR EM RATOS PROVENIENTES DE NINHADAS REDUZIDAS NA LACTAÇÃO E SUBMETIDOS OU NÃO AO EXERCÍCIO DE NATAÇÃO
Índice de Lee 
Calculado, ao final do experimento, a partir da relação entre a raiz cúbica do peso corporal e o comprimento nasoanal do animal [3 Peso (g)/CNA(cm)]
Índice de massa corporal (IMC) e Taxa específica de ganho de peso (g/kg) 
São, respectivamente, determinados a partir da relação entre peso corporal (g)/comprimento nasoanal (cm2) e a relação entre: dM/Mdt, em que dM representa o ganho de peso corporal durante dt (t2-t1) e M é o peso corporal do ratos em t1 (data inicial do período).
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Eficiência alimentar 
Foi mensurada através do coeficiente de eficácia alimentar (CEA) e do ganho de peso por consumo calórico (GPCC).
 O coeficiente de eficácia alimentar é a relação entre o ganho de peso por quantidade de alimento consumido: CEA = (PF - PI) / TA
PF: Peso Final; PI: Peso Inicial; Ta: Quantidade total de alimento consumido em gramas.
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Glicemia
Ao fim do experimento, os animais foram mantidos em jejum de 15 horas para determinação da glicemia.
Gordura epididimal
Ao término do experimento, de 24 a 48 horas após o final do exercício, os animais foram anestesiados com uretana a 12,5% e cloralose a 0,5% e abertos pela região peritoneal de modo a permitir aretirada do tecido adiposo epididimal que foi imediatamente pesado em balança eletrônica, Marte (modelo ASF11).
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Resultados
A evolução ponderal de animais com ninhadas de quatro ou de 10 filhotes durante o aleitamento revela que, a partir do 12º dia de vida, o grupo GN4 demonstrou maior peso corporal e este se manteve elevado até a idade de 21 dias, igualmente o ganho de peso da ninhada reduzida durante o período foi 52% maior que no grupo controle:
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Resultados
Nos grupos exercitados, observa-se que GN10NAT apresenta menor peso aos 110 dias de vida. Esses resultados foram ratificados pela menor taxa específica de ganho de peso de 21 a 30 dias:
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Resultados
Nos grupos exercitados, observa-se que GN10NAT apresenta menor peso aos 110 dias de vida. Esses resultados foram ratificados pela menor taxa específica de ganho de peso de 21 a 30 dias:
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Resultados
O estudo da correlação (coeficiente de correlação de Pearson) entre os índices (IMC e Lee) revelaram uma significante e positiva associação entre eles. Isto denota que tanto um quanto o outro pode ser utilizado como determinante da massa corporal e atuar como preditor do excesso de peso em ratos:
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Resultados
O efeito da manipulação do tamanho da ninhada na lactação e/ou do exercício da natação sobre os valores de glicemia em jejum e lactemia apresentados na tabela não revelam diferenças nos valores glicêmicos e nem nos valores de lactato intragrupo antes e imediatamente após o término do exercício:
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Conclusão
 
A redução do número de filhotes na lactação não causou sobrepeso persistente na prole nem alterou a ingestão alimentar e o acúmulo de gordura central no animal adulto jovem. No entanto, a indução de superalimentação na lactação parece promover uma alteração do crescimento no período pós-desmame em sentido oposto ao observado em animais que sofrem desnutrição perinatal. Esse achado é importante quando observamos que o maior período de crescimento do animal ocorre antes da idade de 60 dias e que até os 30 dias esta velocidade é bem acentuada. 
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Por outro lado, o exercício de nado livre realizado apenas três vezes por semana parece não induzir grandes mudanças na composição corporal dos animais, o que sugere a realização de mais estudos.
Por fim, consideramos que a alteração na disponibilidade da quantidade e/ou qualidade da alimentação no aleitamento merecem maiores investigações em vistas da vulnerabilidade desse período a influências ambientais e nutricionais que podem predispor ao aumento de tecido adiposo, bem como a alterações metabólicas permanentes. 
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IMPORTÂNCIA DO TEMA
Excesso de alimentação no início da vida pode modificar persistentemente consumo, peso corporal e o tamanho. Na lactação, pelo fato do controle hipotalâmico não estar totalmente desenvolvido, ocorre a superalimentação, hipótese de estudos, que é um exagerada ingestão do animal, onde há uma grande oferta de leite. Essa grande quantidade ingerida nessa fase faz com que haja o excesso de peso na fase adulta.
Com este modelo é possível torna-se possível as consequências da alimentação no inicio da vida, a longo e curto prazo. A nutrição em períodos críticos da vida pode influenciar no surgimento de processos patológicos na vida adulta.
Exemplo 1: Hipótese de programação metabólica, onde animais desnutridos no período gestacional ou lactacional tornam-se obesos, hipertensos e apresentam alterações na sensibilidade a insulina. 
Exemplo 2: Evidências consideráveis de estudos em humanos e em outras espécies animais mostram que a desnutrição pré e pós-natal precoce influencia esses aspectos e o desempenho cognitivo posterior.
IMPORTÂNCIA DO TEMA
Hipernutrição e Desnutrição pelas grandes e pequenas ninhadas
Referências Bibliográficas
 http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1517-86922011000100010&script=sci_arttext 
 http://www.scielo.br/scielo.php?script=
sci_arttext&pid=S1415-52732009000200009 
 http://www.files.scire.net.br/atrio/uerj-fisclinex_upl//THESIS/73/annie_seixas_bello_moreira.pdf 
 http://www.contabeis.ufpe.br/propesq/images/
conic/2010/conic/pibic/40/Resumo_CONIC_10040135PO.pdf
Referências Bibliográficas
 Avaliação das consequencias da limitação do tamanho da prole de ratos Wistar ao nascimento sobre seu desenvolvimento ponderal e características morfofuncionais na idade adulta
 Desnutrição e Obesidade, faces da mesma moeda
 Modificação do estado nutricional no rato recém-nascido, por manipulação do tamanho da ninhada: estudo morfo-funcional do sinstema nervoso
Hipernutrição e Desnutrição pelas grandes e pequenas ninhadas
SUBTURMA NC
Daniela Michaello
Ellen Souza
Gabriela Magalhães
Geise Oliveira
Juliana Andrade
Letícia Olímpia
Maiara Borges
Tatiane Pontes
Thaysa Aguiar
Hipernutrição e Desnutrição pelas grandes e pequenas ninhadas

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