PRATICAS IMUNO CLÍNICA

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AULA PRATICA Nº01
TÉCNICA DE ESTENSÃO DE SANGUE
Materiais:
-Sangue total com edta
-Lâmina de vidro 75x25mm	
-Lâmina extensora
- Corantes
METODO	
Primeiramente, utilizam-se lâminas limpas e desengorduradas, uma lâmina extensora, e a lamina onde o sangue será estendido. A gota de sangue é colocada em uma das extremidades e com o auxilio da lâmina extensora posicionada frente a gota realiza-se um movimento rápido e continuo distribuindo o sangue por toda a superfície.
Após a secagem total do esfregaço, submergir a lâmina no corante, deixar por 10 segundos. Retirar e deixar escorrer. Depois Submergir a lâmina no corante deixar pelo mesmo tempo. Retirar e deixar escorrer. Após, colocar a lâmina no corante e deixar por 20 segundos. Retirar e lavar em água corrente. Secar e limpar a parte de trás. Levar ao microscópio na objetiva de imersão (100x), fazer a leitura.
LEITURA
É possível observar diversas células sanguíneas de acordo com a sua coloração e núcleo, entre elas foi observado: 
Neutrófilos, de coloração rósea com granulações finas, na cor vermelho-violeta, seu núcleo apresenta uma coloração vermelha; eritrócitos, coloração rósea; plaquetas, coloração azulada a púrpura, com finas granulações; eosinófilos, citoplasma com coloração rósea e granulações em vermelho brilhante e núcleo de coloração vermelha; basófilos, citoplasma com granulações especificas de coloração parda a preta, seu núcleo de coloração vermelha; linfócitos, com o citoplasma azul celeste e o núcleo com a cromatina densa em cor violeta e os monócitos, com coloração cinza e seu núcleo de cor violácea, com cromatina frouxa e estriada.
UTILIDADE
 Essa técnica tem como objetivo a realização de um esfregaço ideal, livre de falhas e paradas, nem muito fino, nem muito grosso, sem falhas na cauda para uma leitura correta e confiável de um hemograma.
AULA PRÁTICA Nº2
EXAME PCR – IMUNO-LATEX
Materias:
-Soro
-kit de imuno-látex PCR
-Cartão teste látex
METODO
O método utilizado é a partir da aglutinação do soro do paciente com o reagente, quando o resultado é positivo.
Após a coleta de sangue venoso, e a sua centrifugação, pipetar 25 µl do soro do paciente em uma área do cartão-teste, homogeneizar a suspensão de látex e pipetar 25 µl na mesma área da amostra. Misturar muito bem o soro com o látex, espalhando-se cuidadosamente com uma vareta plástica. Através de movimentos suaves de rotação, sob uma boa fonte de luz, observar durante 2 minutos a formação de uma eventual aglutinação.
LEITURA
A leitura é feita a olho quando ocorre a aglutinação.
UTILIDADE
A Proteína C-reativa (PCR) é uma proteína produzida pelo fígado e está presente em pequenas quantidades no plasma de pessoas hígidas. No entanto, sua concentração circulante pode aumentar drasticamente em uma resposta mediada por processos inflamatórios e infecciosos.
Esta proteína é considerada um bom marcador de fase aguda por apresentar características como: o tempo de meia-vida curto, entre 8 a 12 horas; resistência à quebra entre a coleta da amostra e o exame laboratorial; e valores normais menores que 5 mg/L, que, em resposta a estímulos inflamatórios podem atingir até 100 vezes o normal em menos de 24 horas e normalizar-se em até 4 dias pela ausência do estímulo crônico.
AULA PRÁTICA Nº3
IMUNO ELISA - CHAGAS
Materiais:
-Soro
-Kit chagas
-Pipetas
-Microplaca 
METODO E LEITURA
Qualitativo
Incuba-se 50 µl do soro e 50 µl do controle positivo, mais 25 µl das hemácias em um poço. No sugundo poço da microplaca, 50 µl do controle negativo, mais 25 µl das hemácias. Utiliza-se no terceiro poço, 50 µl do soro e 25 µl das hemácias. Feito isso, 3 minutos de vibração ou utlização os dedos pra bater em volta da microplaca, espere 1 a 2 horas para a leitura. Observa-se o acumulo das hemácias no fundo do poço quando o resultado é negativo, e uma película sobre a superfície quando positivo.
Semi-quantitativo
Nesse método incuba-se 50 µl do soro mais 50 µl do controle positivo. Em outro poço adiciona 50 µl do diluente mais 50 µl do soro do paciente e dessa mesma maneira faz-se a diluição com 50 µl da amostra do segundo poço para o terceiro já adiciona 50 µl do diluente, até a diluição no quinto poço, depois adicionar em todos os poços 25 µl das hemácias. Faz-se 3 minutos de vibração e observa-se o resultado.
Nesse método de diluição será observado também o acumulo das hemácias no fundo do recipiente e a película na superfície. Observou-se o acumulo apenas até p terceiro poço, com resultado positivo de 1/128 de diluição.
UTILIDADE
Os anticorpos contra Tripanosoma cruzi surgem logo após a infecção, atingem níveis elevados e podem persistir, juntamente com a infecção, durante muitos anos, embora o parasita esteja localizado dentro das células do hospedeiro. Recomenda-se mais de um teste para o diagnóstico e valoriza-se, para fins diagnósticos, a pesquisa de anticorpos específicos positiva em todos os testes utilizados. Quando a reação é positiva somente em um dos métodos a valorização do resultado dependerá dos antecedentes epidemiológicos, exame físico e exames complementares como eletrocardiograma e raio-x.