Resumo para prova prática de Microbiologia

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1 Resumo de Microbiologia Geral – Prova Prática 
THAMIRES L. V. LEITE I Agronomia/UFRRJ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
IV217- MICROBIOLOGIA GERAL 
 
 
 
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THAMIRES L. V. LEITE I Agronomia/UFRRJ 
 
 
 MEIOS DE CULTURA 
 
 Quanto à consistência. 
 
 Sólido: Ágar(1,5 - 3,0g/100ml). 
 Semi-sólido: Ágar(0,1 – 1,4g/100ml). 
 Líquido: Caldo. 
 
 Composição Química. 
 
 Meio sintético; Quando há conhecimento sobre a composição 
e quantidade. 
 Meio complexo; Quando não há informações precisas sobre 
composição e quantidade. Ex.: Extrato de carne, leveduras, 
sangue, leite. 
 
 Utilização. 
 
 Meio de uso geral; Base de outros meios. Usado pra diversos 
microrganismos. 
 Meio enriquecido; Nutrientes favorecerão à formação de 
microrganismos específicos. 
 Meio seletivo; Utilização de inibidores(antibióticos) que 
favorecem o crescimento de determinados microrganismos. 
 Meio diferencial; Diferenciação através de estrutura e 
reação. 
 
 Etapas do preparo do meio de cultura. 
 
 Pesar, mensurar, agitar, fundir à 100°c, placas de petri. 
 
 
 
 
 
 
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 ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS E MEIOS: Controle Microbiano 
 
 Processos Físicos: 
 
 Calor Seco. 
- Flambagem; Alça de platina- Chama redutora e oxidante. 
Passar a boca das vidrarias na chama oxidante. 
- Forno Pasteur; 180°C – 200°C. 1h30minutos. 
 
 Calor úmido. 
-Pasteurização; Aquecimento. 
-Tindalização; Aquecimento em intervalo de 24h por 3 dias. 
 
 Processos Químicos: 
 
 Esterilizantes; Óxido de etileno, Alquilantes. 
 
 Desinfetantes; Álcool, halogênios, Fenóis. 
 
 ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS 
 
 Bactérias Aeróbias: 
 Esgotamento de inoculo por estrias. 
 
 Spread Plate: Crescem na superfície do Ágar. 0,1mL. 
UFC/ml amostra = Nº Colônias x Diluição POSITIVO x 10. 
 
 Pour Plate: Crescem no superior e interior do Ágar. 1mL 
 UFC/ml amostra = Nº Colônias x Diluição POSITIVO. 
 
 Bactérias Anaeróbicas: 
 Agentes redutores que proporcionam ambiente anaeróbico: 
Tioglicolato, Ágar azida. 
 Zeissller. 
 Técnica de Gaspak: Jarras com catalisadores de H2. 
 Meio de Tarozzi: Manutenção de bactérias anaeróbias vivas. 
 
 
 
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 COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 Fixação na lâmina. 
 Violeta: 1 min. 
 Água. 
 Lugol: 1 min. (+) 
 Álcool: 30seg. 
 Água. 
 Fucsina: 30seg. (-) 
 
Gram positiva- Roxo. 
Gram negativa- Vermelho. 
 
 TESTES BIOQUÍMICOS 
 
 Identificação colonial. 
 Identificação microscópica. 
 Identificação bioquímica: 
 Ureia-> Produção de urease. 
 Gelatina-> Gelatinase. 
 Caseina-> Caseinase. Leite. Halo em volta. 
 Amido-> Amilase. Halo transparente em volta. 
 Celulose-> Celulase. Papel picado. 
 
 
 ANTIBIOGRAMA 
Teste in vitro pra identificar a sensibilidade de microrganismos patogénicos à 
um ou mais antibióticos. 
 
 Difusão em meio sólido: Halos. 
 MIC(concentração inibitória mínima): 
 Dissolução em caldo. 
 E-Test. 
 
 
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