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UNIVERSIDADE NOVE DE JULHO – UNINOVE Microbiologia básica Fisiologia bacteriana Profa. Dra Joselma Siqueira Quinta aula Não é apostila! OBJETIVO -Compreender as fases do crescimento microbiano; - compreender a curva de crescimento; - conhecer as condições necessárias para o cultivo bacteriano - noção sobre respiração aeróbia e fermentação Fisiologia Microbiana - Por que é importante estudar o crescimento das microbiano? - Isolar os agentes causais das doenças infecciosas - Identificação dos agentes causais das doenças infecciosas - Desenvolvimento de agentes antimicrobianos - Preservação dos alimentos - Estudo: Bioquímica, Genética, Biotecnologia 1. Crescimento As bactérias se proliferam por divisão binária em duas metades equivalentes (idênticas) - Como as bactérias se multiplicam? �Ácidos nucléicos �Proteínas �Lipídeos �polissacarídeos 1 2Tempo de Geração Introdução 1 220min 420min 820min CRESCIMENTO MICROBIANO - Dividido em 4 fases -FASE Lag (fase de retardo): intensa atividade metabólica. Não ocorre divisão celular. Pode durar poucos minutos ou horas. -FASE Log (logarítmica): Ocorre rápida divisão celular. Fase que ocorre a ação dos antibióticos (ex: penicilina – atuam na parede celular no momento da divisão celular). -FASE estacionária: Há carência de nutrientes ou a presença de produtos tóxicos que provocam a redução do crescimento bacteriano. -FASE de declínio (morte): Marcada por um declínio no número de células viáveis. Curva de Crescimento A DB C Fases da Curva de Crescimento de bactérias: - Fase Lag - Fase Estacionária - Fase Exponencial ou Logaritmica (Log) - Fase de Declínio A C B D horas Como o crescimento da cultura bacteriana pode ser acompanhado? 1. Contando-se o número de células ao longo do cultivo S. Aureus (gram+) E. Coli (gram-) 2. Acompanhando-se o aumento da turvação ao longo do cultivo S. Aureus Não turvo S. Aureus Turvo 3. Visualização da formação de colônias em meio sólido E. coli P. aeruginosa CRESCIMENTO BACTERIANO FATORES NECESSÁRIOS Fontes de carbono, nitrogênio, íons FATORES DE CRESCIMENTO vitaminas, aminoácidos, água temperatura, oxigênio, pH Crescimento bacteriano - fatores Fontes de carbono • Heterotróficas - exigem fontes orgânicas de carbono, tais como: carboidratos, aminoácidos, lipídios, etc; • Autotróficas - utilizam CO2 como fonte de carbono, a partir da qual a bactéria sintetiza todos os compostos orgânicos que necessita; • Capinofílicas - Necessitam de um ambiente, rico em gás carbônico (CO2). Fontes de nitrogênio • Algumas bactérias retiram nitrogênio diretamente da atmosfera e o convertem em nitrogênio orgânico (ex: Rhizobium); • Outras bactérias exigem fontes orgânicas de nitrogênio como os aminoácidos. Íons inorgânicos essenciais • Macronutrientes (precisa em maior quantidade): fósforo, enxofre, potássio, magnésio, ferro, etc. • Micronutrientes (precisam em menor quantidade): cobre, cobalto, zinco, manganês, molibidênio, sódio, etc. • São compostos orgânicos indispensáveis aos microrganismos e que eles não conseguem sintetizar, sendo assim, estes fatores devem estar no meio onde os microrganismos se encontram para que os mesmos possam se desenvolver, •exemplo: vitaminas, aminoácidos, nucleotídeos, etc. Crescimento bacteriano – fatores de crescimento Água É indispensável ao crescimento, é um solvente universal, tem importante papel na regulação térmica, etc. Temperatura Diferentes espécies de bactérias podem sobreviver em diferentes temperaturas, existem 3 faixas de temperaturas ideais aos microrganismos, onde os mesmos se multiplicam em grande velocidade: - psicrófilas (sobrevivem em baixas temperaturas – 0 - 18°C). - mesófilas (sobrevivem em temperaturas intermediárias – 25 - 40 °C). - termófilas (sobrevivem em altas temperaturas – 50-80 °C). Crescimento bacteriano - fatores Condições Físicas (Fatores Ambientais) - Psicrófilos - Mesófilos - Termófilos Temperatura Thermus aquaticus Min. 40oC òtima:70-72oC Máxima: 79 oC Oxigênio Em relação ao oxigênio, temos 5 grupos principais de bactérias: •aeróbias: exigem a presença de oxigênio; •microaerófilas: só sobrevivem em locais com oxigênio em pequena quantidade. •anaeróbias estritas: não toleram a presença de oxigênio. •anaeróbias não estritas: não utilizam o oxigênio, mas o mesmo não é tóxico a elas. •facultativas: se desenvolvem na presença ou não de oxigênio. Crescimento bacteriano – FONTE DE OXIGÊNIO Presença de Oxigênio (atmosfera) Aeróbios Obrigatórios Ex. Pseudomonas spp. Facultativos Ex. Escherichia coli Anaeróbios Obrigatórios Ex. Clostridium tetani 1 Agar tioglicolato 3 1 2 32 Condições Físicas (Fatores Ambientais) Síndrome de Fournier Úlcera por pressão Pé diabético TRATAMENTO HIPERBÁRICO pH alcalinófilasneutrófilasacidófilas C r e s c i m e n t o b a c t e r i a n o Bactérias acidófilas • Bactérias acidófilas crescem em faixas de pH extremamente baixos, entre 0,1 e 5,4, (ex: Helicobacter pylori que pode colonizar a parede estomacal). Bactérias neutrófilas • Bactérias neutrófilas crescem em faixas de pH entre 5,4 a 8,5. A maioria das bactérias apresenta um crescimento ótimo em ambientes cujo pH se aproxima da neutralidade. • A maioria das bactérias patogênicas está incluída nessa categoria. Bactérias alcalinófilas • Bactérias alcalinófilas crescem em faixas de pH entre 8,5 e 11,5. • A bactéria Vibrio cholerae apresenta um crescimento ótimo em pH 9. pH Mínimo, Ótimo e Máximo para o crescimento de alguns procariotos 10.07.6-8.66.6Nitrobacter sp 8.37.86.5Streptococcus pneumoniae 9.07.05.7Thiobacillus novellus 8.06.6-7.05.6Pseudomonas aeruginosa 9.37.15.6Erwinia caratovora 8.5-9.06.0-7.65.0-5.8Clostridium sporogenes 9.06.0-7.04.4Escherichia coli 9.37.0-7.54.2Staphylococcus aureus 6.85.8-6.64.0-4.6Lactobacillus acidophilus 7.55.5-6.03.5Zymomonas lindneri 6.04.02.0Bacillus acidocaldarius 5.02.0-3.01.0Sulfolobus acidocaldarius 4.0-6.02.0-2.80.5Thiobacillus thiooxidans pH máximopH ótimopH mínimoOrganismo Referência bibliográfica •Microbiologia – Trabulsi & Alterthum •Microbiologia médica e imunologia – Levinson & Jawetz
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