Caracterização de Carboidratos

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ROTEIRO DE AULA PRÁTICAS 
 
REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DOS GLICÍDIOS 
 Os glicídios podem ser definidos como poliidroxialdeídos ou 
poliidroxicetonas, seus polímeros, seus produtos de redução, oxidação ou seus 
produtos de substituição. Eles são as moléculas biológicas mais abundantes na 
natureza. 
 Para um completo entendimento de muitas reações que se processam com os 
glicídios nos seres vivos, é indispensável o conhecimento de suas estruturas, suas 
reações e de que maneira eles são identificados no laboratório. Apresentaremos a 
seguir uma série de reações clássicas, geralmente reações coloridas que apesar do 
advento da técnica de cromatografia ainda são utilizadas para identificação dos 
diversos tipos de glicídios. 
 
I - IDENTIFICAÇÃO DE GLICÍDIOS 
 
1-Reação com reagente de Molish (solução alcoólica de α- naftol a 5% ) 
 
 Sob a ação desidratante do ácido sulfúrico concentrado, os glicídios dão 
origem ao furfural ou aos seus derivados. Estas substâncias condensam-se com o α - 
naftol produzindo um composto de cor violeta na interfase. Se um oligossacarídeo ou 
polissacarídeo estiver presente, eles são primeiro hidrolisados aos seus 
monossacarídeos constituintes os quais então são desidratados. As pentoses dão o 
furfural e as hexoses o hidroximetilfurfural. 
 O teste de Molisch é considerado uma reação geral para glicídios, quer livres, 
quer combinados, embora não sendo específica pois se processa com outras 
substâncias. 
Preparar a seguinte série de tubos, contendo: 
 
Tubo A → 1 mL de água destilada 
Tubo B → 1 mL de solução de glicose 1% 
Tubo C → 1 mL de solução de sacarose 1% 
Tubo D → 1 mL de solução de amido 1% 
Colocar em cada tubo duas gotas do reagente de Molish. Agitar bem 
Adicionar cuidadosamente sem agitação, em cada tubo, 1 mL de ácido sulfúrico 
concentrado, inclinando o tubo e deixando o ácido escorrer lentamente pelas paredes 
do mesmo. Deixar o tubo em repouso na estante por 5 min. e observar a formação de 
um anel de cor violeta na interfase dos líquidos. Interprete os resultados. 
 
2. Reação com iodo 
 
 O iodo presente no reagente de lugol forma, com o amido, um complexo de 
cor azul e com o glicogênio , um complexo de cor vermelha. Celulose, mono e 
dissacarídeos não produzem coloração com o iodo. 
Preparar a seguinte série de tubos, contendo: 
Tubo A → 1 mL de água destilada 
Tubo B → 1 mL de solução de glicose 1% 
Tubo C → 1 mL de solução de sacarose 1% 
Tubo D → 1 mL de solução de amido 1% 
Acrescentar, a cada tubo, duas gotas de reagente de lugol, misturar e observar. 
Aquecer ligeiramente no banho-maria o tubo D até mudança da coloração. Resfriar 
em água corrente e observar novamente. Explicar o ocorrido. 
 
II - IDENTIFICAÇÃO DE GLICÍDIOS REDUTORES 
 Os glicídios que possuem grupamento glicosídico livre (hidroxila anomérica 
livre), são capazes de reduzir íons de Cu++, Ag+ e Bi++. 
 A redução do Cu++ é conseguida em meio alcalino, a quente: 
 
Cu++ Cu+ Cu2O + H2O 
 quente alcalino Vermelho ou 
 amarelo 
 Mas o Cu++ também reage com o meio alcalino: 
 
Cu++ Cu (OH)2 CuO 
 alcalino preto 
 
 Para evitar que esta reação mascare o teste de presença de glicídio redutor, o 
íon Cu++ é mantido em solução alcalina sob a forma de complexo. Há vários 
reagentes à base de Cu++, (como Fehling , Benedict) que diferem em relação ao 
solubilizador, ao alcalinizante ou ao reagente para o Cu++ formado. 
Reativo de Benedict. (Contém citrato de sódio, carbonato de sódio anidro e sulfato 
de cobre). 
Reação de Benedict 
Preparar a seguinte série de tubos, contendo: 
Tubo A → 1 mL de água destilada 
Tubo B → 1 mL de solução de glicose 1% 
Tubo C → 1 mL de solução de frutose 1% 
Tubo D → 1 mL de solução de amido 1% 
Acrescente a cada um deles 1 mL do reagente de Benedict. Aquecer ± 3 minutos, em 
banho-maria fervente. Observar. Explicar. 
 
III-DIFERENCIAÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES 
 
Reação de Seliwanoff - O reagente de Seliwanoff contém resorcinol diluído em ácido 
clorídrico. Este teste permite diferenciar aldoses e cetoses, que sob a ação 
desidratante do ácido clorídrico são transformadas em derivados de furfural, que se 
condensam com o resorcinol formando um composto. A reação com cetose é rápida 
e mais intensa pela facilidade de formação do derivado furfural. A sacarose dá reação 
positiva: Explicar este fato. 
 
Preparar os seguintes tubos de ensaio: 
Tubo A → 3 mLde Seliwanoff + 5 gotas de água destilada 
Tubo B → 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de solução de frutose 1% 
Tubo C → 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de solução de glicose 1% 
Tubo D → 3 mL de Seliwanoff + 5 gotas de solução de sacarose 1% 
Colocar em banho-maria 100°C. Observar de três em três minutos, durante 
aproximadamente 10 minutos. Explicar. 
 
IV - HIDRÓLISE DE DISSACARÍDEOS 
 
A sacarose é um dissacarídeo encontrado nas plantas (açúcar comum) e é formada por 
uma unidade de D - glicose e uma de D - frutose com uma ligação do tipo α - 1,2 O-
glicosídica. 
O amido é o material de reserva celular dos vegetais. Contém dois tipos de polímeros 
da glicose, a amilose e a amilopectina. O primeiro consiste de cadeias longas, não 
ramificadas de unidades de D-glicose conectadas por ligações α-1,4. A 
amilopectina é altamente ramificada. As ligações glicosídicas unindo os 
resíduos de glicose nas cadeias da amilopectina são α-1,4, mas os pontos de 
ramificação, são ligações α-1,6. 
 
Hidrólise da sacarose 
 
Preparar os seguintes tubos de ensaio: 
Tubo A → 2 mL de solução de sacarose 1% + 3 gotas de ácido sulfúrico 
concentrado 
Tubo B → 2 mL de solução de sacarose 1% + 3 gotas de água destilada 
Colocar em banho-maria 100°C durante três minutos. Adicionar a cada tubo 3 mL 
do reativo de Benedict . Agitar. Recolocar no banho-maria durante três minutos. 
Retirar. Explicar.