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Eletrofisiologia da Membrana Plasmática Potenciais elétricos da membrana plasmática • Potencial de equilíbrio iônico • Potencial de repouso da MP • Potencial de ação (PA) Potencial de equilíbrio iônico Refere-se à diferença de potencial na membrana plasmática para um determinado íon de acordo com o seu gradiente de eqúilíbrio Obtém-se aplicando a equação de Nernst-Planck Ex = R.T.ln[X]e F.z [X]i Onde: R = 8,314 J.K-1.mol-1 T = ºC + 273K F = 9,65x104 C.mol-1 z = nº carga do íon [X]e = concentração do íon X no LEC [X]i = concentração do íon X no LIC • Refere-se ao potencial de equilíbrio eletroquímico da membrana plasmática • Aplica-se a equação de Goldman Potencial de repouso (Em) Em = R.T ln PNa[Na+]e + PK[K+]e + PCl[Cl-]e F PNa[Na+]i + PK[K+]i + PCl[Cl-]i Microeletrodo TÉCNICA de PATCH-CLAMP Potencial de Ação (PA) Célula + + Potencial de Equilíbrio Despolarização Repolarização Hiperpolarização Potencial de Ação + + + + + + - - - - - - LEC LIC + + -75mV -- + + + + + + + + - - - -- - - - +30mV + + + + + + - - - - - - - - -20mV + + + + + + + + - - - - - - - - -90mV Etapas do Potencial de Ação (PA) E Repolarização (R) Overshoot H ►Despolarização (D) D Restabelecimento da polarização ►Repolarização (R) ►Hipepolarização (H) ►Restabelecimento do Potencial de Repouso Em (mV) Tempo (ms) Potencial limiar 0 -65 -75 Potencial de AçãoIntensidade do estímulo Potencial limiar Potenciais sublimiares • Resposta Tudo ou Nada • Período refratário » Absoluto » Relativo Propriedades do Potencial de ação Propagação do PA no neurônio Fibras nervosas amielínicas Impulso nervoso = PA 0,5 – 1 m/s Fibras nervosas mielínicas Propagação do impulso nervoso saltatório 70 – 90 m/s PROPAGAÇÃO DO IMPULSO NERVOSO Transmissão sinaptica ELÉTRICA Através das junções do tipo gap, que estão presentes nas células epiteliais, da glia e musculares lisa e cardíaca. QUÍMICA Quando a transmissão sináptica ocorre por intermédio de um neurotransmissor entre células nervosas ou ainda entre neurônios e células efetoras (muscular e glandular). Exemplos de neurotransmissores: acetilcolina, dopamina, glutamato, glicina, GABA, noradrenalina, adrenalina, serotonina PA Terminação Pré-sináptica CAM quinase II calmodulina Sinapto tagmina Neurotransmissor Vesícula Área ativa Fenda sináptica Receptor Ionotrópico Receptor metabolotrópico Acoplamento Sinapse química CAM quinase II Sinapsina Zona de adesão Área ativa Translocação Via de sinalização Potencial Pós-sinaptico POTENCIAL PÓS-SINÁPTICO EXCITATÓRIO (PPSE) Quando o potencial pós-sináptico for despolarizante Em (mV) Tempo (ms) Potencial limiar 0 -65 -75 PP SE 1 PP SE 2 PP SE 3 PA pós-sináptico Potencial Pós-sinaptico POTENCIAL PÓS-SINÁPTICO INIBITÓRIO (PPSI) Quando o potencial pós-sináptico for hiperpolarizante Em (mV) Tempo (ms) Potencial limiar 0 -65 -75 PPSI1 PPSI2 Somação de Potenciais Pós-sinapticos • Somação Espacial • Somação Temporal AxônioPPSE PA1 PA2 PA3 PPSE1 PPSE2 PPSE3 Fluxo eletrônico Cone axônico Dendrito Soma Somação Espacial PA PA1 PA2 PAA Fluxo eletrônico Dendrito Soma PPSE1 PPSE2 PPSE PA Somação Temporal Neurotransmissor Despolarização Propagação do Potencial Ação Abertura de canais iônicos de potássio e/ou cloreto Hiperpolarização Fluxo eletrônico hiperpolarizante PA1 PA2 PPSE PPSI PPSE + PPSI Neurônio 3 Neurônio 1 Neurônio 2 Influência do PPSI na excitação pós-sinaptica Neurotransmissores e seus receptores Neurotransmissores Ionotrópicos Metabolotrópicos Excitatórios – geram PPSE Inibitórios – geram PPSI Receptores Receptor pós-sinaptico IONOTRÓPICO LEC LIC ACh ACh ACh ACh ACh ACh ACh ACh - acetilcolina Neurotransmissor Receptor nicotínico ACh ACh ACh ACh ACh ACh ACh ACh LEC LIC Receptor nicotínico PPSI LEC LIC GABA Receptor GABAA, GABAc Cl- Receptor pós-sinaptico METABOLOTRÓPICO Via segundos mensageiros ativados pela proteína G Via do AMPc Via do IP3 Ca+2 Abertura dos canais de Ca+2 PTN Gs AC - Adenilciclase PKA - Proteinoquinase A Neurotransmissor Receptor Neurotransmissor ligado ao receptor LEC LEC LIC LIC Via do 3,5 Monofosfato cíclico de Adenosina (AMPc) Gs (s) – ATIVA ADENILCICLASE Gi (i) – INATIVA ADENILCICLASE Receptores 2 1-2 PL C Neurotransmissor LEC LIC PIP2 IP3 IP3 IP3 DAG Canal de Ca+2 Retículo endoplasmático Citossol PKC H+ Na+ Via do Inositol trifosfato (IP3) Membrana plasmática Ca+2 Canal de Ca+2 Voltagem-depedente Íons Ca+2PLC – fosfolipase C PIP2 – fosfaditilinositol 4,5- bifosfato IP3 – inositol 1,4,5- trifosfato DAG – diacilglicerol PKC – proteinoquinase C Receptor Gq M1, M3, 1 Proteínas Gs ou Gi também podem ativar a abertura de canais iônicos R Gs R Gi Ca+2 K+ LEC LIC R - Receptor Neurotransmissor Neurotransmissor M2 Sub-unidade 2 Receptores pós-sinaptico Neurotransmissor Receptor P Na+ P K+ P Ca2+ P Cl- 3,5 AMPc IP3/DAG Acetilcolina Nicotínico M1 M2 M3 Ácido -aminobutírico GABA GABAA GABAC GABAB Glutamato AMPA NMDA Glicina Receptor de glicina Noradrenalina, adrenalina 1(A-D) 2(A-C) 1-2 Serotonina 5-HT1 5-HT2 5-HT3 5-HT4-7 M us ca rín ic o Interrupção da sinapse • Mudança conformacional do receptor • Hidrólise do neurotransmissor • Difusão do neurotransmissor pelo interstício e/ou retorno à célula pré-sináptica (terminal axônico) • Internalização do receptor por endocitose • Ligação do neurotransmissor a um receptor na membrana do terminal pré-sináptico (auto-receptor) Noradrenalina Terminal axônico Ca+2 Receptores adrenérgicos DIFUSÃO “Down regulation” Ca+2 Recaptação Receptor pré-sináptico Vesícula pré-sináptica LEC LIC CÉLULA EFETORA Membrana plasmática AcetilcolinaTerminal axônico Ca+2 Receptores colinérgicos Ca+2 Recaptação Vesícula pré-sináptica LEC LIC Fibra muscular AchE DIFUSÃO COLINA ACETIL “Down regulation”
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