AULA 7 BACTERIOLOGIA II

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MICROBIOLOGIA
Aula 7: Bacteriologia II
Microbiologia
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Parede celular bacteriana
A parede celular é a estrutura presente externamente à membrana celular de bactérias do Domínio Eubactéria.
A parede celular bacteriana pode ser identificada pelo Método de coloração de Gram, criada em 1884 pelo bacteriologista Hans Christian Gram. 
As que se coram de roxo (azulado) são denominadas Gram positivas, enquanto as que se coram de vermelho (róseo) são denominadas de Gram negativas.
https://claraealinebioifes.files.wordpress.com/2011/04/gram-negativas-e-positivas.jpg
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Parede celular
GRAM POSITIVAS → Apresentam extensa camada de peptideoglicano, com ácidos teicoicos e lipoteicoicos inseridos nessa.
GRAM NEGATIVAS → Apresentam espaço periplásmico, fina camada de peptideoglicano e outra membrana celular externa.
http://www.microbiologybook.org/Portuguese/bact-mem-port.jpg
http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/bacterias/imagens/bacterias3g.jpg
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Composição básica:
peptideoglicano  polímero exclusivamente encontrado no domínio Bacteria:
N-acetilglicosamina (NAG),
ácido N-acetilmurâmico (NAM), 
Tetrapeptídeo (L-alanina, ácido glutâmico, L-lisina e D-alanina )
Organização:
esqueleto de NAG e NAM ligações entre os tetrapeptídeos de cadeias adjacentes  enorme rigidez. 
Parede Celular
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Parede celular - GRAM +
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Apenas cerca de 10% da parede corresponde ao peptideoglicano:
uma ou duas camadas;
restante: membrana externa.
Parede celular - GRAM 
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Membrana Externa: 
acima do peptideoglicano, 
contém fosfolipídeos, lipoproteínas, proteínas e lipopolissacarídeos,
corresponde a uma segunda bicamada lipídica  semelhante à membrana plasmática
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Hans Christian Gram (1884)  desenvolveu método de coloração de bactérias que permitia sua separação em dois grupos distintos:
Gram positivas (Gram +)  coloração roxa;
Gram negativas (Gram )  coloração vermelha. 
Método de coloração de Gram
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Método de coloração de Gram
http://biomedicinaparatodos.blogspot.com.br/2015/06/coloracao-de-gram-sabe-o-que-e-entenda.html
O Método de coloração de Gram é a técnica aplicada para a identificação da parede celular bacteriana.
Reagentes utilizados:
	
Violeta de genciana (Cristal de violeta) 
Lugol (Iodo)
Solução álcool-acetona
Fucsina
Os micoplasmas e as micobactérias não se coram pelo Método de Gram.
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Método Ziehl Neelsen
As bactérias do gênero Mycobacterium (micobactérias) não se coram pelo Método de coloração de Gram.
São bacilos-álcool-ácido-resistentes (BAAR) e possuem, externamente à parede celular, uma camada composta por ácidos micólicos. 
Os BAAR são corados pelo Método de Ziehl Neelsen.
http://image.slidesharecdn.com/micatip2008alessandram-141101183410-conversion-gate01/95/micobactrias-atpicas-de-crescimento-rpido-no-tuberculosa-3-638.jpg?cb=1414866986
http://www.scielo.br/img/revistas/abmvz/v60n5/09f1.jpg
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Reprodução bacteriana
Crescimento microbiano é o aumento na quantidade de células.
O crescimento ocorre por divisão binária (fissão binária).
Bactérias formam colônias e estas podem ser vistas a olho nu.
Cada bactéria possui taxa de crescimento e tempo de geração específicos. 
http://gerencia.ambientebrasil.com.br/midia/imagens/81.gif
http://static.hsw.com.br/gif/bacteria-2.jpg
http://lh4.ggpht.com/-0lnFKtdgXYo/UgGjyVg1FzI/AAAAAAAAOa8/csgOUZ-zDK8/colonia%25255B2%25255D.png?imgmax=800
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Crescimento bacteriano
Taxa de crescimento – variação na quantidade de células por unidade de tempo.
Geração – intervalo em que uma célula origina duas novas.
Tempo de geração – tempo necessário para a população bacteriana dobrar em número.
Crescimento exponencial – padrão em que o número de células é duplicado a cada período de tempo (2, 22, 24, 28,...) 
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAeu6QAE/fisiologia-microbiana?part=2
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Curva de crescimento
Em meio de cultura (sistema fechado), o crescimento bacteriano ocorre em etapas, denominadas: Fase lag, Fase log (ou exponencial), Fase estacionária e Fase de declínio (ou morte).
As fases da curva de crescimento em sistema fechado são: 
Fase Lag → Período de repouso e adaptação ao meio.
Fase log ou exponencial → Período de divisão celular intenso.
Fase estacionária → Período de equilíbrio, em que a quantidade de células novas equivale a de células mortas.
Fase de declínio ou morte → Período com progressão de células mortas.
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Meios de cultura
O cultivo bacteriano pode ser realizado, fornecendo as condições ótimas para cada espécie bacteriana.
Os meios de cultura são substâncias suplementadas de nutrientes e elementos químicos, necessários ao metabolismo bacteriano.
Existem meios de cultura sólidos, líquidos ou semissólidos. 
Os meios sólidos, em geral, são produzidos com a alga Agar agar e são específicos para gêneros ou espécies bacterianas.
MEIO SÓLIDO
MEIO LÍQUIDO
http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/files/2010/05/65bi.jpg
http://www.prolab.com.br/blog/wp-content/uploads/2014/12/1-Meiodecultura1.jpg
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Meios de cultura
Meios de cultura: http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-de-cultura.html#.Vk6QwnarTIU
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Meios de cultura
Os meios de cultura podem ser enriquecidos, seletivos, diferenciais e redutores. 
Exemplos de meios de cultura: 
Ágar sangue de carneiro
Ágar chocolate
Ágar manitol salgado	
Ágar Mac Conkey	
Ágar Mueller-Hinton, 	
Ágar salmonella-shigella	
Meios de cultura
http://www.ufjf.br/microbiologia/files/2012/11/Meios-de-cultura-usados-no-laborat%C3%B3rio-e-colora%C3%A7%C3%B5es.pdf
http://static1.squarespace.com/static/50e713f4e4b0888041877c38/t/524c4699e4b0ad97e93c2591/1432216489782/iStock_000019289346Large.jpg
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Meios de cultura
http://www.cenapro.com.br/images/noticias/beleza-eswcondida-escola-focus.jpg
Arte em meios de cultura: 
http://www.microbialart.com/galleries/
Crescimento bacteriano em diferentes meios de cultura
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Coleta de material
Para a identificação bacteriana, é necessário a coleta do material. Em geral, a coleta de superfícies é feita com swab estéril. Urina e secreções são coletados em frascos, e sangue em tubos ou frascos de hemocultura.
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=3562
https://www.bd.com/scripts/brasil/productsdrilldown.asp?CatID=115&SubID=308&siteID=10056&d=brasil&s=brasil&sTitle=&metaTitle=Microbiologia&dc=brasil&dcTitle=BD+-+Brasil
Coleta com swab
Frascos de hemocultura
Coleta de hemocultura
http://www.sciencecodex.com/aggregated-images/tech/jIv3x1W938BxXzHX.jpg
Coleta com frascos
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Identificação bacteriana
A identificação da espécie bacteriana pode ser feita por meio de testes bioquímicos, sistema automatizado, sistema API (Analytical Profile Index), laminocultivos ou culturas indicadoras.
http://www.biomerieux.pt/upload/API_ID41.jpg
http://www.interlabdist.com.br/produtos/mostra_produto/1573,urilab-cromoclin-trio-c10un
http://images.slideplayer.com.br/18/5764974/slides/slide_1.jpg
Testes bioquímicos
Sistema API
laminocultura
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Micoplasmas
O gênero Mycolasma pertence
à família Mycoplasmateceae.
São menores que as demais bactérias do Domínio Eubactéria e não possuem parede celular.
Algumas espécies apresentam estruturas semelhantes à micélios de fungos e, por isso, foram designados como micoplasmas.
Causam, principalmente, infecções do trato respiratório.
http://ibiantech.com/wp-content/uploads/2013/09/Micoplasma.jpg
http://www.icb.usp.br/bmm/ext/arquivos/imagens/timenetsky%20micoplasma.jpg
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Riquétsias
O gênero Rickettsia pertence à Família Rickettsiaceae. São bactérias muito pequenas, quase não vistas ao microscópio óptico. 
São, obrigatoriamente, parasitas intracelulares e costumam parasitar piolhos, pulgas e carrapatos. 
O tifo é causado pela Rickettsia prowasekii, transmitida por piolhos, enquanto a febre maculosa é causada pela Rickettsia rickettsii, transmitida por carrapato.
https://dnaeoutrascoisas.files.wordpress.com/2014/02/slide2.jpg
http://cdn.doutissima.com.br/content/uploads/2013/09/febre-maculosa.jpg
https://lh4.googleusercontent.com/-hma-n1xcYCc/UBqTO01CZnI/AAAAAAAAB4I/cB5cl8msoCg/s300/tifo-epidemico.jpg
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Assuntos da próxima aula:
Patogenicidade x Virulência;
Mecanismos de patogenicidade;
Fatores de virulência;
Microbiota residente;
Microbiota transitória.
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