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Teste de oxidação/fermentação (o/f) Testes Bioquímicos Para Identificação de Bactérias. CENTRO DE CIÊNCIA BIOLÓGICAS E DA SAÚDE MICROBIOLOGIA GERAL DOCENTE: TICIANO DE LIMA DISCENTE: ÉMERSON MARQUES Objetivo Distinguir bactérias de acordo com a capacidade de oxidar ou fermentar açúcares específicos, ou seja identificar se ela é aeróbica ou anaeróbica facultativa. Materiais Tubos de ensaios contendo meios de cultura simples com baixas concentrações de peptona e altas concentrações de açúcar. Indicador Azul de Bromotimol. Vaselina líquida. Alça e agulha de platina. princípio A transformação de carboidratos em produtos ácidos pode ocorrer tanto aeróbicamente, pela oxidação, como anaerobicamente pela fermentação. AERÓBICOS ANAERÓBIOCOS FACULTATIVOS princípio O teste é realizado em um meio semi-sólido, com baixa concentração de ágar. A metabolização do carboidrato promove a formação de produtos ácidos. A indicação é feita pelo indicador de pH azul de bromotimol. Verde: pH = 7,1 Amarelo: pH = 6,0 Azul : pH = 7,6 Procedimento Os dois tubos contendo a fonte de carboidratos(açúcar) são inoculados com o microrganismo a ser testado com o auxílio de uma agulha estéril. Após a inoculação um dos tubos é celado com 2,0 – 3,0ml de óleo vegetal, criando assim um ambiente anaeróbio. O outro tubo é deixado aberto em contato com o ar, permitindo assim o crescimento aeróbico. A inoculação é feita a 35°C por 48 horas, para posteriormente ser feita a análise da mudança de cor. Interpretação dos resultados Organismos com cor azulada ou uma não alteração na coloração inicial verde, indica micrororganismos que são indiferentes ao carboidrato testado. A mudança da cor para amarelo no tubo tento selado quanto o aberto, indica microrganismos capazes de fermentar ou fermentar e oxidar o açúcar. Os organismos capazes de metabolizar somente na presença de oxigênio promoverão uma mudança de cor para o amarelo somente no tubo não selado, deixando o outro verde ou azul. Interpretação dos resultados Obrigado!
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