Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
Métodos Farmacognósticos Aplicados na Avaliação da Pureza de Pós Vegetais Thiala Soares Josino da Silva Doutoranda em Ciências Farmacêuticas - UFC UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ Faculdade de farmácia, odontologia e enfermagem Departamento de Farmácia Disciplina – Farmacognosia I Pós vegetais Planta pulverizada Insumos vegetais – extratos Chás (RDC 267/2005) – 47 espécies Drogas vegetais notificadas (RDC 10/2010) – 66 espécies Conceitos Derivado vegetal: produto da extração da planta medicinal fresca ou da droga vegetal, que contenha as substâncias responsáveis pela ação terapêutica, podendo ocorrer na forma de extrato, óleo fixo e volátil, cera, exsudato e outros. Planta medicinal: espécie vegetal, cultivada ou não, utilizada com propósitos terapêuticos; Droga vegetal: planta medicinal, ou suas partes, que contenham as substâncias responsáveis pela ação terapêutica, após processos de coleta/colheita, estabilização, quando aplicável, e secagem, podendo estar na forma íntegra, rasurada, triturada ou pulverizada; RDC 26 – ANVISA, 2014 Controle de qualidade de matéria-prima Objetivos: Avaliar a autenticidade da matéria-prima; Avaliar a pureza da matéria-prima; Realizar análise fitoquímica para detecção do teor de marcadores. Controle de qualidade – Droga vegetal PUREZA IDENTIFICAÇÃO AMOSTRAGEM CQ – Droga vegetal RDC 26 – ANVISA, 2014 Testes de pureza e integridade Matérias estranhas Água Cinzas totais Cinzas insolúveis em ácido clorídrico Metais pesados Resíduos de agrotóxicos Radioatividade Contaminantes microbiológicos Micotoxinas Controle de qualidade – Como realizar??? Farmacopeia Publicações oficiais Código Oficial Farmacêutico, onde estão estabelecidos os critérios de qualidade dos medicamentos em uso (manipulados e industrializados), compondo o conjunto de normas e monografias de farmacoquímicos do país Controle de qualidade – Como realizar??? Volume 1 – Métodos gerais Volume 2 – Monografias 5ª Ed - 2010 Controle de qualidade – Como realizar??? 176 Métodos Gerais 599 Monografias 277 – Insumos farmacêuticos 210 – Especialidades 57 – Plantas medicinais 6 – Correlatos 30 – Produtos biológicos 19 – Hemocomponentes e hemoderivados Farmacopeia Brasileira – Quantificando... Controle de qualidade – Como realizar??? FARMACOPEIA BRASILEIRA 5ª ed (Vol. 1, 2010) 5.4 MÉTODOS DE FARMACOGNOSIA 5.4.1 EXAME VISUAL E INSPEÇÃO MICROSCÓPICA 5.4.1.1 EXAME VISUAL, ODOR E SABOR 5.4.2 MÉTODOS DE ANÁLISE DE DROGAS VEGETAIS 5.4.2.1 AMOSTRAGEM 5.4.2.2 DETERMINAÇÃO DE MATÉRIA ESTRANHA 5.4.2.3 DETERMINAÇÃO DE ÁGUA EM DROGAS VEGETAIS 5.4.2.4 DETERMINAÇÃO DE CINZAS TOTAIS 5.4.2.6 DETERMINAÇÃO DE CINZAS SULFATADAS ... Amostragem Amostragem Análise da qualidade de um lote é feita por amostragem fator determinante para a confiabilidade do resultado; Retirada representativa de material para análise e controle. A análise de uma amostra representará a qualidade de todo lote produzido Os procedimentos de amostragem especificados levam em consideração três aspectos: (a) número de embalagens que contêm a droga; (b) grau de divisão da droga e (c) quantidade de droga disponível Amostragem (A) Número de embalagens que contêm a droga: Amostragem (B) Grau de divisão e (C) Quantidade da droga: DROGAS < 1 CM (finamente fragmentado ou pulverizado) DROGAS > 1 CM Uso de amostrador Amostragem manual Para drogas até 100kg amostra mínimo de 250g Para drogas até 100kg amostra mínimo de 500g Acima de 100kg, amostragem + quarteamento final 250g. Acima de 100kg, amostragem + quarteamento final 500g É permissível amostrar quantidades inferiores às especificadas acima (qtde total de droga disponível seja < a 10 kg) a amostra final > 125 g Amostrador de pós Amostragem Quarteamento Amostra Distribuir a droga sobre área quadrada, em quatro partes Iguais. Rejeitar as porções contidas em dois quadrados opostos. Juntar as duas porções restantes. Repetir o processo, se necessário. Havendo diferença acentuada em dimensões de fragmentos, executar separação manual e anotar as porcentagens aproximadas dos componentes de diferentes graus de divisão encontrados na amostra. Amostragem - Exemplo Como será realizada a amostragem de um lote de uma planta rasurada que contém 150 sacos de 25Kg? a) A droga está dividida em pedaços menores do que 1 cm. b) A droga está dividida em pedaços maiores do que 1 cm. Amostragem - Exemplo 150 unidades Amostra = 10% Amostra = 15 Cada saco = 25Kg 25 X 15 = 375 kg QUARTEAMENTO Havendo mais de 100 kg a amostrar, proceder à amostragem seguida de seleção por quarteamento, gerando amostra de 250/500 g no final do processo. Até amostra de 250 g ou 500g Ensaios de pureza Determinação de materiais estranhos Os fármacos vegetais devem ser isentos de fungos, de insetos e de outras contaminações de origem animal. CLASSIFICAÇÃO MATERIAL ESTRANHO partes do organismo ou organismos dos quais a droga deriva, excetuados aqueles incluídos na definição e descrição da droga, acima do limite de tolerância especificado na monografia; quaisquer organismos, porções ou produtos de organismos além daqueles especificados na definição e descrição da droga, em sua respectiva monografia; impurezas de natureza, minerais ou orgânicas, não-inerentes à droga. Elementos estranhos < 2% m/m. Determinação de materiais estranhos PROCEDIMENTO QUARTEAMENTO Lente de aumento (5 a 10 vezes). Pesar material separado Cálculo Material estranho Separado Peso da amostra Qtde de amostra a ser analisada Raízes, rizomas, cascas, planta inteira e partes aéreas 500 g Folhas, inflorescências, sementes e frutos 250 g Materiais particulados ou fracionados (peso médio inferior a 0,5 g/componente) 50 g Pós 25 g X 100 Determinação de materiais estranhos PROBLEMAS RELACIONADOS À QUALIDADE DAS MATÉRIAS PRIMAS QUANTIDADE DE “SUBSTÂNCIAS ESTRANHAS” SUPERIOR À PERMITIDA: • Presença de plantas diferentes da solicitada; • Partes da mesma espécie vegetal, porém não a parte usada; Pata de vaca (Bauhinia forticata): Casca e caule propriedades expectorantes. Raízes vermífugas Flores purgativas Folhas diuréticas e recomendadas como antidiabéticas. Determinação de água Três métodos: Método gravimétrico não aplicável quando a droga contém substâncias voláteis Método Azeotrópico (destilação com tolueno) Método Volumétrico (Karl Fischer). – Perda por dessecação – Balança de Infra Vermelho. Valor de referência: 8 a 14% Determinação de água Método gravimétrico 2 a 5g , ou o especificado na monografia Dessecar amostra 100 - 105 ºC durante 5hr ATÉ PESO CONSTANTE Calcular a porcentagem de água em relação à droga seca ao ar: Pi - Pf Peso da amostra Pesa-filtro dessecado nas mesmas condições da amostra, durante 30 minutos X 100 Determinação de água Método azeotrópico Possibilita a determinação de água contida em amostras de natureza múltipla. A água presente é destilada com tolueno, Separada em tubo receptor apropriado após resfriamento. TOLUENO IMISCÍVEL COM ÁGUA Determinação de água Método volumétrico Reagentede Karl Fischer (iodo+ dióxido de enxofre +piridina+ metanol) 2 maneiras: - titulação visual - medida eletrométrica com eletrodo de platina (amostras coloridas). Princípio: • Titulação visual, onde o I2 é reduzido para I na presença de água. • Toda a água é consumida reação cessa, cor da solução passa de amarelo para ponto final em âmbar, característico do excesso de iodo. • Teor de água (mg) = v × T em que v = volume, em mL, de reagente consumido; T = título do reagente Determinação de água PROBLEMAS RELACIONADOS À QUALIDADE DAS MATÉRIAS PRIMAS TEOR DE UMIDADE ELEVADA: desenvolvimento de microorganismos, insetos, hidrólise, deteriorização dos constituintes químicos Cinzas Totais Cinzas: resíduo não volátil que resulta da combustão das substâncias orgânicas em condições experimentais apropriadas Cinzas: Fisiológicas e Não fisiológicas Estabelece a quantidade de substância residual não volátil no processo de incineração. cerca de 3 g da amostra pulverizada Incinerar até que todo o carvão seja eliminado. incinerar até peso constante Resfriar Pamostra - Presíduo Peso da amostra X 100 Cinzas Totais EXEMPLO DE CÁLCULO Amostra Cadinho (g) Massa amostra Cadinho + amostra Cadinho após cinzas Cinzas totais Porcentagem Cinzas Totais 1 22,4761 2,0008 24,4769 22,6022 0,1261 6,30 Pi = 22,4761 + 2,008 = 24,4769 Pf = 22,6022 2,0008 – 1,8747 2,0008 = 0,1261 2,0008 X 100 = 6,3 % 24,4769 – 22,6022 = 1,8747 Spondias mombin Pamostra - Presíduo Peso da amostra X 100 Cinzas insolúveis em ácido Materiais estranhos adicionados as drogas vegetais, como areia revelam-se pelo aumento de cinzas totais e confirma-se a sua presença pela porcentagem excessiva de cinzas insolúveis em ácido. Cinzas Insolúveis em Ácido: compreendem o resíduo obtido na fervura de cinzas totais com ácido clorídrico diluído, após filtragem, lavagem e incineração. O método determina a presença de sílica e constituintes silicosos. Cinzas insolúveis em ácido Incinerar a 500 ºC até peso constante Ferver resíduo obtido das cinzas totais durante 5 min. Lavar o vidro de relógio com 5 mL de água quente Recolher o resíduo, insolúvel em ácido, sobre papel de filtro, isento de cinza, lavando-o com água quente até que o filtrado se mostre neutro. Transferir o papel de filtro contendo o resíduo para o cadinho original 25 mL HCl 7% PROCEDIMENTO (Pf – cinzas filtro) – Pcadinho vazio Peso da amostra X 100 Cinzas insolúveis em ácido EXEMPLO DE CÁLCULO (Pf – cinzas filtro) – Pcadinho vazio Peso da amostra X 100 Amostra Cadinho (g) Massa amostra Peso após HCl - cinzas filtro Resíduo cinzas insolúveis Porcentagem Cinzas Insolúveis 1 22,4761 2,0008 22,48185 0,00575 0,287 Cinzas filtro = 0,0005g 22,48185 – 22,4761 2,0008 = 0,00575 2,0008 X 100 = 0,287 % Spondias mombin Pf = 22,48235g Determinação de cinzas PROBLEMAS RELACIONADOS À QUALIDADE DAS MATÉRIAS PRIMAS TEOR DE CINZAS SUPERIOR AO PERMITIDO: • Cinzas fisiológicas ou orgânicas; • Cinzas não-fisiológicas (areia, terra): tratamento impróprio durante a colheita, secagem e armazenamento. Em torno de 20% de cinzas fisiológicas. (Fitoterapia – Bases Científicas e Tecnológicas, 2008) Determinação de metais pesados A presença de metais pesados em plantas medicinais pode ser decorrente de diversos fatores, tais como poluentes ambientais ou resíduos de agrotóxicos. Metais pesados: principalmente Chumbo, Arsênio, Cádmio, Cobre, Mercúrio. Elementos cuja ingestão deve ser restrita devido a seus efeitos tóxicos. Metodologias: Espectrofotometria de absorção atômica, Espectrometria de emissão atômica. Determinação de metais pesados Determinação de metais pesados PROBLEMAS RELACIONADOS À QUALIDADE DAS MATÉRIAS PRIMAS TEOR DE METAIS PESADO SUPERIOR AO PERMITIDO: Chumbo Cádmio Arsênio Limites coerentes com: - espécie botânica; - características metabólicas; - região de origem; - características do solo. Contaminantes microbiológicos A contaminação microbiana de um produto não estéril (produto acabado e matéria-prima farmacêutica) pode conduzir não somente à sua deterioração, com mudanças físicas e químicas associadas, mas também ao risco de infecção do usuário. Produtos de origem vegetal, mineral e/ou animal: Contagem total de bactérias aeróbias; Contagem total de fungos/leveduras Pesquisa de micro-organismos patogênicos Contaminantes microbiológicos Contaminantes microbiológicos PROBLEMAS RELACIONADOS À QUALIDADE DAS MATÉRIAS PRIMAS CONTAMINAÇÃO MICROBIOLÓGICA ELEVADA: Aeróbios mesófilos Fungos e leveduras Enterobactérias Bacillus cereus Candida albicans Escherichia coli Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Salmonella sp. Exemplo de Laudo CQ Baccharis trimera (Carqueja) Considerações finais Ensaios de Pureza: - Materiais estranhos: outras partes da planta, elementos estranhos e impurezas de natureza mineral; - Umidade e/ou perda por dessecação: a água estimula o crescimento microbiano, de fungos e insetos, reações de hidrólise e ação de enzimas, com deterioração de constituintes da droga; - Cinzas totais: quantidade de cinza fisiológica e não fisiológica; - Cinzas insolúveis em ácido clorídrico: teor de sílica e componentes silicosos da droga. Teor acima do preconizado indica procedimentos de coleta inadequados; - Contaminantes microbiológicos; Obrigada!!! Thiala Josino josinothiala@gmail.com
Compartilhar