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Transcrição e processamento de RNA decarlitamara@gmail.com O DNA mitocondrial possui 37 genes Dogma Central da Biologia Como o DNA se relaciona com as proteínas? - É feita uma cópia (negativa) de um trecho de DNA (transcrição) - mRNA é traduzido em resíduos (tradução) Organização gênica procarioto X eucarioto Promotor Região Codificadora Terminador DNA RNA (transcrito primário) PROTEÍNA Ribossomo Estrutura de um Gene A estrutura de um gene de procarioto Promotor Região Codificadora Sítio de PoliA Pre-mRNA AAAAAAAAAA mRNA AAAAAAAAAA Intron Exon DNA RNA ESTRUTURA DE UM GENE DE EUCARIOTO A estrutura de um gene de eucarioto Principais etapas envolvidas na expressão de um gene Adaptado de Alberts et al. (2002) Molecular Biology of THE CELL, 4nd edition, GS Garland Science Taylor & Francis Group. Características Gerais da síntese de RNA Precursores: trifosfato de ribonucleosídeos (trifosfato de desoxiribonucleosídeos – DNA) Apenas uma fita é usada como molde (DNA- ambas as fitas eram replicadas) Não necessitam de um iniciador (primer) O sentido da síntese é 5’ ---- 3’ (igual ao DNA) Início da síntese (sequências específicas de nucleotídeos chamadas promotores) Bolha de transcrição A C G T A T G C A T A C G T A C T G C A T G 5’ 3’ A T 5’ 3’ A C G U A A C G U A 5’ 3’ RNA polimerase Molécula de RNA nascente Gene ativo Transcrição em procarioto Etapas da transcrição 1.INÍCIO 2. ALONGAMENTO 3. TERMINAÇÃO RNA polimerase (principal enzima da transcrição) FATOR SIGMA- Só participa do início da transcrição. Reconhece e se liga a RNA pol ao início da transcrição / promotor Início da trancrição Ligação da RNA polimerase a uma região promotora no DNA Desenrolamento das duas fitas do DNA , fornecendo um filamento molde livre para fazer pares de bases com os nucleotídeos que chegam Formação de ligação fosfodiéster entre os primeiros ribonucleotídeos na cadeia de RNA Onde a enzima se liga? Seqüência consenso para todos os promotores de E. coli TTGACAT TATAAT Região -35 Região -10 Promotor Região Codificadora Terminador DNA Alongamento da cadeia Terminação (direto) Terminação (finalização dependentes) Transcrição em eucariotos Processo mais complexo Participação de 3 diferentes enzimas Os RNAs produzidos devem ser levados ao citoplasma para serem traduzidos a proteínas A região codificante possui apenas um gene Os transcritos primários sofrem modificações antes de serem levados paro o citoplasma RNA polimerase em eucarioto Tipos de Polimerases - RNA polimerase I - RNA polimerase II, - RNA polimerase III Ao contrário da RNA pol de procariotos estas precisam de ajuda de outras proteínas: FATORES DE INICIAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO Inicio da transcrição Onde a enzima se liga? Alongamento Terminação Processamento dos mRNA (retiradas dos íntros) ► Modificação covalente das extremidades do mRNA ► Splicing (excisão dos introns) mRNA maduro Pré-mRNA Processamento Capeamento e adição da cauda poli(A) Cap: − Protege o RNA da degradação − Só ocorre no mRNA − Ajuda no processamento do mRNA e exportação para o citoplasma − Ajuda na tradução de proteínas Cauda Poli A − Facilita na exportação para o citoplasma − Estabiliza a molécula (sinal de degradação) − Ajuda na tradução Splicing (spliceossomo) DÚVIDAS?
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